HPLC测定虎杖茎中虎杖苷含量的研究毕业论文

HPLC测定虎杖茎中虎杖苷含量的研究毕业

论文

目录

摘要.................................................................. I Abstract................................................................ II 前言 (1)

1材料与方法 (4)

1．1 材料、仪器与试剂 (4)

1．2对照品溶液的制备 (5)

1．3标准曲线的绘制 (5)

1．4超临界二氧化碳流体萃取工艺流程 (5)

1．5萃取物中虎杖苷含量的测定 (5)

1．6 单因素试验 (6)

1．7最佳萃取工艺条件实验设计 (6)

2结果与分析 (7)

2．1虎杖苷对照品标准曲线的绘制 (7)

2．2单因素试验结果 (8)

2．3正交试验结果直观分析 (8)

3 结论 (15)

参考文献 (16)

致谢 (18)

HLPC测定虎杖茎中虎杖苷含量的研究

学院生物与化学工程系08级生物工程 422000 敖普章

指导老师蒋盛岩

摘要

目的:研究超临界CO2萃取压力、温度、时间和携带剂甲醇的添加量对虎杖茎中虎杖苷提取的影响，探讨虎杖茎中虎杖苷的最佳提取参数。方法:采用正交试验，用超临界CO2萃取虎杖茎中虎杖苷，并用HPLC和紫外分光光度计对提取液进行分析。结果:正交试验结果表明，影响虎杖茎中虎杖苷CO2超临界萃取的主要因素为D＞C＞B＞A（A为萃取压力，B为萃取温度，C为萃取时间，D为携带剂甲醇的添加量），其最佳组合是D1C3B2A2。结论:超临界CO2萃取虎杖茎中虎杖苷的最佳参数为：萃取温度30℃，萃取剂甲醇的添加量为50mL，萃取时间是60min，萃取压力是12Mpa。

关键词:虎杖；虎杖苷；超临界CO2萃取；高效液相色谱

Determination of Polydatin in Polygonum cuspidatum Sieb et Zucc stem by High Performance Liquid

Chromatography

Ao puzhang

(Department of Biology and Chemistry Engineering,Shaoyang University,

Shaoyang 422000,China)

Counselor:JIANG Shengyan

Abstract

Objective：Research supercritical CO2extraction pressure, temperature, time and presoaker methanol effect on polydatin extraction from Polygonum cuspidatum Sieb et Zucc stem, and discusses the best polydatin extraction parameter from Polygonum cuspidatum Sieb et Zucc stem.Methods:The experiment, using supercritical CO2 extraction of polydatin from Polygonum stem, and with HPLC and UV spectrophotometric analysis of the extract. Result:Orthogonal experiment results show that the influence of Polygonum cuspidatum Sieb et Zucc stem polydatin supercritical fluid CO2 extraction the main factors of D > C > B > A (A for extracting pressure B,for extracting temperature,C for extraction time,D for presoaker methanol), the best parameter combination is D1C3B2A2.Conclusion:The optimum supercritical CO2extraction conditions were extraction temperature 30℃,presoaker methanol 50mL,extraction time 60min, pressure 12Mpa.

Key words：Polygonum cuspidatum Sieb et Zucc；Polydatin；

Supercritical CO2 extraction；HPLC

前言

虎杖(Polygonumcuspidatum Sieb et Zucc.)是蓼科蓼属多年生灌木状草本植物，虎杖的干燥茎和根，性苦寒，归肝、肺、胆经，具有祛风利湿、祛痰止咳、清热解毒、活血化瘀之效。中医临床用于治疗湿热黄疸、肺热咳嗽、疮痈肿毒、关节痹痛、经闭经痛，其根茎富含虎杖苷、大黄素、白藜芦醇等多种活性成分。药理学研究表明，其主要活性成分虎杖苷具有较强的生物活性。研究表明,虎杖苷能抑制心肌细胞收缩性、抑制血小板聚集、降血脂、抗脂质过氧化、抗休克等作用, 此外还能减轻多种因素造成的组织器官损伤[ 1,2]。

虎杖苷对心肌细胞的作用,金春华等[ 3]报道,通过PD对大鼠心肌细胞的研究表明, 其强心作用可能是通过增加单个细胞中的游离钙离子浓度而直接增强心肌收缩性；PD的这种效应, 使其在理论上具有比洋地黄类强心苷更优越的强心功能, 它不但使心肌收缩更有力, 而且使心肌舒更彻底, 从而大大的提高心肌工作效率。

虎杖苷具有降低全血粘度，王瑜等[ 4]采用大鼠急性血瘀模型, 以全血高切变率及低切变率粘度值、红细胞压积值、血小板粘附率、纤维蛋白原含量、血浆粘度为观察指标, 探讨了虎杖苷降低急性血瘀模型大鼠血液粘度的作用。结果显示虎杖苷可以显著降低模型大鼠的纤维蛋白原含量和血小板粘附率, 其药效对血浆粘度降低所致全血粘度降低比其它原因所致更显著, 它主要通过降低血浆粘度来降低全血粘度从而显著改善大鼠血液循环。

虎杖苷对血管平滑肌细胞(VSMC)的作用，PD对细胞钙、pH有双向调节作用。正常情况下PD既促进VSMC外钙离子进人细胞,又能诱导细胞钙释放, 增加细胞游离钙;同时升高pH以提高血管力。休克时降低细胞钙浓度及降低细胞pH以降低血管力, 使血管扩; 能通过促进细胞外钠离子流使用细胞去极化来调节血管, 其作用可能与钠、钾通道开放有关, 并受肾上腺素能受体、H2受体系统及鸟苷酸环化酶系统的反向调节[ 5]。

虎杖苷用于防治脑缺血，采用改良的线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型( MCAO)研究白藜芦醇苷对大鼠局灶性脑缺血的保护机制, 结果发现PD能减轻脂质过氧化反应, 降低缺血脑组中丙二醛( MDA)含量、提高体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化(GSH-PX)及过氧化氢酶( CAT)活性, 抑制或减轻脑水肿形成, 保护细胞膜功能, 减轻缺血神经元功能损害, 对局灶性脑缺血损伤具有明显的保护作用, 这表明PD对大鼠局灶性脑缺血有明显的保护作用,其机制可