HPLC法测定非布司他片的含量

HPLC法测定非布司他片的含量

摘要】目的用高效液相色谱法测定非布司他片的含量。方法含量测定：采用TSKgel ODS-80Ts 5μm，4.6*150mm柱；柱温40℃，以乙腈-水-冰醋酸（600：400：2）为流动相，流速1.0 mL? min-1，检测波长317nm。结果非布司他在5.05～15.15μg?mL-1浓度范围内呈良好的线性（r=1.0000），平均回收率（n=9）为100.2%。结论该方法简便灵敏、结果准确，适用于非布司他片的质量控制。

【关键词】高效液相色谱法非布司他含量测定

非布司他为新一代黄嘌呤氧化酶抑制剂，临床上用于治疗尿酸过高症。国内

有文献报道报道[1、2]，其检测波长为230nm，本文采用检测波长为317nm，测

定非布司他片的含量，该方法简便、重复性好，结果准确，适用于非布司他片的

含量测定。

1 仪器与试药

Waters2489/2996高效液相色谱仪（紫外检测器）。

非布司他对照品（批号200903069999； 99.9%）；由企业提供。非布司他片（规格10mg（批号：A002，A003，A004）、20mg（批号：B001，B002，B003，

B004，B005，B006）、40mg（批号：C001，C002，C003）为某国制药厂进口），乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱：TSKgel ODS-80Ts (5μm，4.6*150mm)；流动相：乙腈-水-冰醋酸（600：400：2），流速1.0mL? min-1；检测波长317nm；柱温40℃，进样量20μL。上述色谱条件下，非布司他峰与杂质峰达到基线分离，理论板数按非布司他计为5000，见图1。

t/min

图1 HPLC色谱图

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液精密称取105℃干燥4小时的非布司他对照品10.17mg，置100mL量瓶中，加乙腈-水（60：40）溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL

置50mL量瓶中，加上述溶剂稀释至刻度，摇匀，即得浓度为10.10μg?mL-1 的对

照品溶液。

2.2.2 供试品溶液取本品20片，精密称定，研细，精密称取细粉（约相当于

非布司他10mg），置100mL量瓶中，加乙腈-水（60：40）适量，超声10分钟

使溶解，加相同溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置50mL

量瓶中，加乙腈-水（60：40）稀释至刻度，摇匀，为供试品溶液。

2.3线性关系考察按上述色谱条件，分别精密吸取对照品溶液10，15，20，25，30μL，注入色谱仪，记录色谱图，以浓度X为横坐标，峰面积Y 为纵坐标，

绘制标准曲线，计算线性回归方程为：

Y=1.23×105X-2.61×104 r=1.0000

结果表明非布司他在5.05～15.15μg?mL-1浓度范围内呈良好的线性关系。

2.4 精密度试验精密吸取对照品溶液（10.10μg?mL-1），连续进样5次，记

录峰面积，其RSD为0.7%，表明仪器的精密度良好。

2.5 重复性试验取同一批供试品（批号：2002），分别制备成5份供试品溶

液，按拟定方法测定含量。RSD为0.9%，表明方法的重复性较好。

2.6 稳定性试验取同一批供试品溶液（批号2002），室温放置0、4、8、12、24h进样测定，其峰面积RSD=0.7%，结果表明，非布司他供试品溶液24Hr内稳

定性良好，能满足测定要求。

2.7 加样回收率精密吸取已知含量的样品（99.9μg?mL-1）（批号：2002）

2.5mL共9份，分别置50mL量瓶中，分别精密加入非布司他对照品溶液

（101.0μg?mL-1，104.9μg?mL-1，102.6μg?mL-1）2、2.5、3mL，加乙腈-水（60：40）稀释至刻度，摇匀，相当于80%，100%，120%浓度的供试品溶液，按上述

色谱条件测定，计算加样回收率，结果见表1，平均回收率（n=9）为100.2%，RSD为0.67%。

2.8 样品测定分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μL，注入色谱仪测定，记录色谱图，用外标法计算含量，见表2.

3 讨论

3.1 测定波长的选定

取含量测定项下的供试品溶液，在200～340nm波长处扫描，在217nm及

317nm的波长处有最大吸收，考虑到末端吸收的影响，采用317nm为含量测定

波长（见附图）。

3.2 本文中采用不同牌号的色谱柱试验，测定结果一致，其方法的重现性很好。

3.3 该方法简便、快速、准确，适用于非布司他片的质量控制。

参考文献

[1] 张勇.《中国新药与临床杂志》，2010，12：928-930.

[2] 白丽英，孙小惠.《黑龙剑科技信息》，2012，07，1 ：51-51.