实验六细菌荚膜染色法

滴甲醇浸没 涂片1分钟
注意：固定及干燥均不能加热和 用热风吹干，因为荚膜含水量高， 加热会使其失水变形。 同时，菌体失水收缩，会与周围 染料脱离产生透明区，导致不产 荚膜的细菌被误认为有荚膜。
1、滴甲基紫染液 甲基紫染液
染色
2、水洗 不要直接冲菌膜
甲基紫染液 染色1-2分钟
3、自然干燥
1、镜检
镜检
3、脱色
20%CuSO4 水溶液
滴结晶紫染 色2分钟
镜检
1、镜检
制片置显微 镜载物台上
2、结果： 背景灰色，菌体深
紫色，菌体周围荚膜淡 紫色。
用低倍镜高 倍镜观察
加盖玻片
1、加盖玻片
将盖玻片一端 浸泡在细菌墨 水混合液中缓 缓盖上盖玻片
2、吸去多余液体
在盖玻片上放一张 滤纸，轻轻按压吸 干多余混合液
勿留气泡
1、镜检
镜检
制片置显微 镜载物台上
2、结果： 背景灰色，菌体较
暗，菌体周围荚膜呈现 明亮透明圈。
用低倍镜高 倍镜观察
干墨水法
❖ 制备细菌墨水混合液 ❖ 涂片 ❖ 固定 ❖ 染色 ❖ 镜检
制备细菌墨水混合液
1、滴生理盐水 6%葡萄糖
2、涂片 挑取少量菌苔
在载玻片一 端 滴一滴6% 葡萄糖水
再加一环 墨水,混 合均匀
涂片
1、先将推片一 2、将推片向另 端放在混合液上 一端平行滑动
3、使混合液 4、干燥 均匀铺成薄层
室温自然晾干
固定、干燥
甲醇固定，自然干燥 甲醇
倾去甲醇， 室温自然干 燥
实验六、细菌的荚膜染色法
实验的目的要求
❖学习并掌握荚膜染色法
方法
❖湿墨水法 ❖干墨水法(P78) ❖Anthony氏法(P79)
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湿墨水法
❖制备细菌墨水混合液 ❖加盖玻片 ❖镜检
制备细菌墨水混合液
1、滴绘图墨水 绘图墨水
2、制备混合液 挑取少量菌苔
滴1滴绘图 墨水在载玻 片中央
与墨水混 合均匀涂布
制片置显微 镜载物台上
2、结果： 背景灰色，菌体紫
色，菌体周围荚膜呈现 明亮透明圈。
用低倍镜高 倍镜观察
❖制片 ❖固定 ❖染色 ❖镜检
Anthony氏法
1、滴生理盐水 生理盐水
制片、固定
2、涂片 挑取少量菌苔
3、干燥固定 室温自然晾干
滴半滴生理 盐水在载玻 片中央
与生理盐水混匀 均匀涂布
染色
1、滴孔结晶紫染液 1%结晶紫染液