03 实验三 产中性蛋白酶芽孢杆菌的发酵复筛

一、目的意义
通过液体发酵法产生中一株高产中性蛋白 酶的菌株。
二、材料方法
关键技术:
标准曲线的制作 液体发酵产酶 Folin-酚法测定中性蛋白酶活性
技术路线：
标准曲线的制备
出发菌株（纯化） 突变株分离
初筛（水解圈法） 复筛（发酵法）
酵培养基中；
培养：37℃，180rpm摇床振荡培养； 取样：分别取24h、48h发酵液测定其酶活。
第三次实验：
（一）酶活测定： 参照《GB/T 23527-2009 蛋白酶制剂》
第三次实验：
（二）菌种鉴定方案讨论： （三）菌种鉴定试验准备
三、数据结果
四、讨论分析
标准曲线 Folin-酚法测酶活 ……
生产性能实验 菌种鉴定 菌种鉴定
第一次实验：
讨论并设计实验方案； 实验材料准备：活化培养基、发酵培养基
等； 活化：LB培养基，37℃摇床振荡16-24h
活化液体培养基
蛋白胨：10.0g； 酵母膏：5.0 g； 氯化钠：10.0g； 蒸馏水：1000ml pH到 7.0。
发酵液体培养基
葡萄糖：2.5g； 蛋白胨：5.0g； 酵母膏：2.5 g； 氯化钠：2.5g； 蒸馏水：1000ml pH到 7.0。
第二次实验：
（一）标准曲线的制备： 参照《GB/T 23527-2009 蛋白酶制剂》 蛋白酶制剂：
第二次实验：
（一）标准曲线的制备： 蛋白酶活性定义：
第二次实验：
（一）标准曲线的制备： 标准曲线：
第二次实验：
（一）标准曲线的制备： 标准曲线：
第二次实验：
（二）发酵： 接种：将活化好的菌液按照2%接种量，接种至发
微生物学实验技术
一株产中性蛋白酶芽孢细菌的选育研究
实验内容
一、产中性蛋白酶芽孢细菌的初步筛选 二、产中性蛋白酶芽孢细菌的诱变育种
三、产中性蛋白酶芽孢细菌的发酵复筛
四、产中性蛋白酶芽孢细菌的分类鉴定 五、产酶菌株生长曲线的测定 六、产酶菌株的菌种保藏
实验三 产中性蛋白酶芽孢菌的发酵复筛
一、目的意义 二、材料方法 三、数据结果 四、讨论分析 五、参考文献
五、参考文献（举例）