微生物学实验链霉菌的形态结构几种常见霉菌形态结构的观察

实验 十 放线菌的形态结构（玻璃纸法） 几种常见霉菌形态结构的观察
实验 九 土壤样品中微生物的分离与纯化 结果观察
实验 九 土壤样品中微生物的分离与纯化 结果观察
各类微生物统计：（CFU/g） 放线菌 细菌 霉菌
菌落计数 (p208 页)
1.单个菌落; 2.菌落数量; 3.分布状况.
10-5 358
结果与分析（p34）
1.（1）计数原则（p208）
根据平皿上菌落数与平皿内土壤悬液的稀释倍数算得每g土 壤中微生物的数量；
选择刚好能把细菌分开，而稀释倍数最低的平板（一般含菌落30～ 300个）计算每克土样中微生物的数量
比较不同生境微生物组成和数量；
思考题
为什么在放线菌计数时要加入10％的苯酚？而在霉菌计数时 要加入几滴80％的乳酸？如果要用牛肉膏蛋白胨培养基从环境 中分离抗氨苄青霉素的微生物，应该如何进行？
印片法 试管直接观察法
霉菌的形态观察
菌丝 ▼ 营养菌丝 粗细,足细胞,假根,隔膜 单核多核 ▼ 气生菌丝 孢子梗,孢子囊 ▼ 孢子
生长繁殖方式
霉菌的形态观察
根霉(Rhizopus)
毛霉(Mucor)
曲霉(Aspergillus) 青霉(Penicillium)
根酶
毛霉属：无匍匐菌丝、假
27100
27000或
2.7×104
4 无法计 4651 513
－
513000
510000或
数
5.1×105
5
27
11
5
－
270
270或
2.7×102
6 无法计 305
12
－
30500
31000或
数
3.1×104
每毫升(g)样品中菌落形成单位(CFU) (p208, p33 页) =同一稀释度3次重复的平均菌落数×稀释倍数×10
根和囊托；
犁头霉属和根霉属：有匍匐 菌丝、假根和囊托；
犁头霉属：孢囊梗不与假根 相对，孢子囊梨形；
曲霉
Aspergillus
青霉
霉菌的形态观察方法
插片法பைடு நூலகம் 玻璃纸法 印片法 试管直接观察法
直接制片观察霉菌
• 在载玻片上加1d乳酸石炭酸棉蓝染色 液，用解剖针从菌落边缘处，挑取少量 菌丝（或取很薄的一层切片），先于 50%乙醇中浸一下，洗去脱落的孢子， 再放在载玻片上的染液中，用解剖针将 菌丝分开。盖上盖玻片，置低倍镜下观 察，必要时换高倍镜观察。
结果
绘图说明放线菌与霉菌自然生长状态的个体形 态特征。
思考题
怎样才能在显微镜下观察到自然生长状态的 放线菌与丝状真菌？
下次实验
实验11. 平板菌落计数法 实验12. 光电比浊计数 实验13. 直接计数法(显微镜)
细菌分离——平板划线p32
分区划 线
放射划线
连续划线
放线菌的形态结构（玻璃纸法） 几种常见霉菌形态结构的观察
放线菌的形态观察
菌丝体 基内菌丝 气生菌丝 孢子丝
孢子
放线菌形态观察方法
插片法 玻璃纸法：玻璃纸是一种透明的半透膜，将灭菌的玻
璃纸覆盖在琼脂平板表然后将放线菌接种于玻璃纸上，经 培养，放线菌在玻璃纸上生长形成菌苔。观察时，揭下玻 璃纸，固定在载玻片上直接镜检。这种方法既能保持放线 菌的自然生长状态，也便于观察不同生长期的形态特征。
352
363
10-6 35
33
38
例
不同稀释度的平均菌落 两个稀释 菌落总
报告方式
次
数
度菌落数
数
（CFU/mL）
10-1
10-2
10-3
之比
（CFU/
mL）
1
1360
164
20
－
16400
16000或
1.6×104
2
2760
295
46
1.6
37750
38000或
3.8×104
3
2890
271
60
2.2