肺肉芽肿性疾病的病理诊断
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现在国内还未见相应的抗体，国外虽有，但 效果不理想。
CD68 CK
CK 胸膜结核
CD68
HE
38KD
CD68
38KD
Diagnosis of intestinal tuberculosis using a monoclonal antibody to Mycobacterium tuberculosis. World J Gastroenterol. 2012, 18(47):6974-80.
坏死性病变
❖ 当结核菌量多、毒力强、机体抵抗力低下或变态 反应强烈时，渗出性和增生性病变可出现坏死。
❖ 坏死的特征:结核性坏死属凝固性坏死，因在坏死 组织中含有结核分枝杆菌的脂质和巨噬细胞在变 性坏死中所产生的细胞内脂质等，这种坏死组织 不液化，呈淡黄色，均匀细腻，细颗粒状，形态 似奶酪，故称干酪样坏死。
二、肺肉芽肿性疾病的诊断 与鉴别诊断及存在的问题
结核性肉芽肿
结核病病理学诊断方法
❖ 组织形态学
根据组织病理形态变化诊断。
❖ 特殊染色
查找病原体等。
❖ 免疫组织化学
确定细胞类型来源，病原菌蛋白表达等。
❖ 分子病理检测
TB/NTM鉴别诊断，菌种鉴定，耐药相关基因检测。
结核病病理学诊断
组织病理学诊断：仍然是结核病病理学 诊断的基础和重要手段。
❖ 目前常用检测方法有：荧光定量PCR、PCR-HRM、 PCR-HPLC、探针杂交等。
TB/NTM荧光定量PCR
结核病病理学诊断趋势
组织水平
HE染色
细胞水平 特殊染色
蛋白水平
免疫组化
核酸水平
基因检测
敏感性、特异性、诊断精准性
结核病病理诊断存在的问题
1、仅靠形态学特征能否直接诊断结核病 诊断“符合结核”等术语应是常态，要结合
误判，假阴性导致漏诊。
非结核分枝杆菌感染
首都医科大学附属北京胸科医院
百度文库
非结核分枝杆菌
（nontubeculous mycobacberia,NTM） 指分枝杆菌属内除结核分枝杆菌复合群（结核分枝杆
菌，牛型分枝杆菌、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌等）和 麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌，其中部分为致病菌或条件 致病菌，现统称为非结核分枝杆菌。
病理形态特征： 渗出性病变 增生性病变 坏死性病变
增生性病变是结核病病理形态学比较有
特征性的病变，主要表现为肉芽肿形成（坏 死和非坏死性）。
结核结节（ tubercle ）是结核性肉芽 肿病变中一种较特异的形态结构，结节中心 为干酪样坏死，坏死周边围绕类上皮细胞、 散在多少不等的Langhans（朗汉斯）巨细 胞，结节的外侧为淋巴细胞及少量反应性增 生的纤维母细胞。
❖ 相比其他常见的免疫学检测方法，如酶联免疫吸 附试验（ELISA）、Western blotting等， IHC对于抗体的要求更高。
免疫组织化学方法：
1. CD68、CK等抗体可对类上皮细胞（上皮 样细胞）进行鉴别。
2.用针对结核分枝杆菌特异抗原的抗体，通 过免疫组化方法，可以在组织内显示结核分枝杆 菌分泌蛋白的表达，以此作为诊断重要参考依据。
特殊染色
❖ 抗酸染色
Ziehl-Neelsen染色法（经典法，加热法），目前常 用改良法（常温染色法）。在病变或坏死组织内找到抗酸杆 菌对结核病诊断有重要意义。但特别注意，抗酸杆菌并不都 是结核分枝杆菌，还包括非结核分枝杆菌等，因此病理报告 只能是查到抗酸杆菌。若要进一步明确分枝杆菌的类型，需 做菌型鉴定。
❖ 非结核分枝杆菌病与结核病病变形态类似，抗酸 染色也无法区别，只能利用PCR及基因测序等方 法进行鉴别 。
❖ 一般常见的非结核分枝杆菌：龟分枝杆菌、鸟分 枝杆菌、戈登分枝杆菌及胞内分枝杆菌等。
❖ 我国南方、沿海地区多一些。
非结核分枝杆菌病病例
HE染色
抗酸染色
分枝杆菌菌种鉴定结果为蟾蜍分枝杆菌
肺真菌病
抗酸染色及基因检测等，需与其他分支杆菌病鉴别 2、如何提高抗酸染色的阳性检出率 3、研发更特异更敏感的免疫组化抗体 4、研发检测MTBC和NTM更敏感更特异试剂盒 5、如何确保PCR准确性和防污染问题
影响病理诊断的因素
首都医科大学附属北京胸科医院
1、送检材料有限。 2、组织内具有诊断特征的病变不充分。 3、诊断经验不足。 4、技术影响：抗酸染色假阳性（污染）造成
肺肉芽肿
感染性肉芽肿
非感染性肉芽肿
感染性肉芽肿
1、分枝杆菌感染 结核分枝杆菌感染（结核病） 非结核分枝杆菌感染
2、真菌感染 曲菌、毛霉菌、隐球菌、组织胞浆菌、芽生菌
、球孢子菌等。 3、寄生虫感染
非感染性肉芽肿
1. 结节病 2.外源性过敏性肺泡炎 3.肉芽肿性血管炎 4. 铍沉积症（铍肉芽肿） 5. 异物肉芽肿 6.肺朗格罕斯细胞组织细胞增生 7.坏死性结节病样肉芽肿病 8.支气管中心肉芽肿 9.其它
金胺罗丹明染色，主要用于痰涂片。 不易保存。
❖ 六胺银、过碘酸雪夫（PAS）染色
可以使真菌显色，其意义在于同结核病的鉴别。
抗酸染色
特殊染色
PAS染色
结核病病理学诊断——蛋白检测
❖ 免疫组织化学（IHC）是在病理组织标本中检测 是否有目的蛋白的表达，在肿瘤诊断及肿瘤分型 中使用广泛，但是在结核病病理学诊断中的应用 极少。近年来，研究发现利用识别分枝杆菌抗原 的抗体用于IHC检查，可以提高结核病病理学诊 断的敏感度。
分枝杆菌分泌蛋白的免疫组织化学检测
结核病病理学诊断——基因检测
❖ 基因检测技术是目前分子病理学诊断中最常用的方法。 通过检测病原菌特异基因序列（如16s rRNA、 IS6110、 IS1081等），可以鉴别诊断结核病与 非结核分枝杆菌病，并能进行菌种鉴定。
❖ 通过检测耐药相关基因（如rpoB，katG等）的突 变情况，可以为耐药结核病的诊断提供辅助依据。
肺肉芽肿性疾病的病理诊断
肺肉芽肿性疾病的病理诊断
一、肺肉芽肿性疾病分类 二、肺肉芽肿性疾病的诊断与鉴别
诊断及存在的问题
一、肺肉芽肿性疾病分类
肉芽肿（肉芽肿性炎、慢性肉芽肿性炎）
由巨噬细胞及其衍生的增生细胞，如上皮样细胞 （类上皮细胞）、多核巨细胞等，呈限局性浸润和 增生所形成的边界较清楚的病变。
病因：真菌感染
➢ 内源性：正常情况存在于呼吸道，如念珠菌等 ➢ 外源性：吸入真菌孢子感染，如曲霉菌等 ➢ 继发感染：隐球菌等
CD68 CK
CK 胸膜结核
CD68
HE
38KD
CD68
38KD
Diagnosis of intestinal tuberculosis using a monoclonal antibody to Mycobacterium tuberculosis. World J Gastroenterol. 2012, 18(47):6974-80.
坏死性病变
❖ 当结核菌量多、毒力强、机体抵抗力低下或变态 反应强烈时，渗出性和增生性病变可出现坏死。
❖ 坏死的特征:结核性坏死属凝固性坏死，因在坏死 组织中含有结核分枝杆菌的脂质和巨噬细胞在变 性坏死中所产生的细胞内脂质等，这种坏死组织 不液化，呈淡黄色，均匀细腻，细颗粒状，形态 似奶酪，故称干酪样坏死。
二、肺肉芽肿性疾病的诊断 与鉴别诊断及存在的问题
结核性肉芽肿
结核病病理学诊断方法
❖ 组织形态学
根据组织病理形态变化诊断。
❖ 特殊染色
查找病原体等。
❖ 免疫组织化学
确定细胞类型来源，病原菌蛋白表达等。
❖ 分子病理检测
TB/NTM鉴别诊断，菌种鉴定，耐药相关基因检测。
结核病病理学诊断
组织病理学诊断：仍然是结核病病理学 诊断的基础和重要手段。
❖ 目前常用检测方法有：荧光定量PCR、PCR-HRM、 PCR-HPLC、探针杂交等。
TB/NTM荧光定量PCR
结核病病理学诊断趋势
组织水平
HE染色
细胞水平 特殊染色
蛋白水平
免疫组化
核酸水平
基因检测
敏感性、特异性、诊断精准性
结核病病理诊断存在的问题
1、仅靠形态学特征能否直接诊断结核病 诊断“符合结核”等术语应是常态，要结合
误判，假阴性导致漏诊。
非结核分枝杆菌感染
首都医科大学附属北京胸科医院
百度文库
非结核分枝杆菌
（nontubeculous mycobacberia,NTM） 指分枝杆菌属内除结核分枝杆菌复合群（结核分枝杆
菌，牛型分枝杆菌、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌等）和 麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌，其中部分为致病菌或条件 致病菌，现统称为非结核分枝杆菌。
病理形态特征： 渗出性病变 增生性病变 坏死性病变
增生性病变是结核病病理形态学比较有
特征性的病变，主要表现为肉芽肿形成（坏 死和非坏死性）。
结核结节（ tubercle ）是结核性肉芽 肿病变中一种较特异的形态结构，结节中心 为干酪样坏死，坏死周边围绕类上皮细胞、 散在多少不等的Langhans（朗汉斯）巨细 胞，结节的外侧为淋巴细胞及少量反应性增 生的纤维母细胞。
❖ 相比其他常见的免疫学检测方法，如酶联免疫吸 附试验（ELISA）、Western blotting等， IHC对于抗体的要求更高。
免疫组织化学方法：
1. CD68、CK等抗体可对类上皮细胞（上皮 样细胞）进行鉴别。
2.用针对结核分枝杆菌特异抗原的抗体，通 过免疫组化方法，可以在组织内显示结核分枝杆 菌分泌蛋白的表达，以此作为诊断重要参考依据。
特殊染色
❖ 抗酸染色
Ziehl-Neelsen染色法（经典法，加热法），目前常 用改良法（常温染色法）。在病变或坏死组织内找到抗酸杆 菌对结核病诊断有重要意义。但特别注意，抗酸杆菌并不都 是结核分枝杆菌，还包括非结核分枝杆菌等，因此病理报告 只能是查到抗酸杆菌。若要进一步明确分枝杆菌的类型，需 做菌型鉴定。
❖ 非结核分枝杆菌病与结核病病变形态类似，抗酸 染色也无法区别，只能利用PCR及基因测序等方 法进行鉴别 。
❖ 一般常见的非结核分枝杆菌：龟分枝杆菌、鸟分 枝杆菌、戈登分枝杆菌及胞内分枝杆菌等。
❖ 我国南方、沿海地区多一些。
非结核分枝杆菌病病例
HE染色
抗酸染色
分枝杆菌菌种鉴定结果为蟾蜍分枝杆菌
肺真菌病
抗酸染色及基因检测等，需与其他分支杆菌病鉴别 2、如何提高抗酸染色的阳性检出率 3、研发更特异更敏感的免疫组化抗体 4、研发检测MTBC和NTM更敏感更特异试剂盒 5、如何确保PCR准确性和防污染问题
影响病理诊断的因素
首都医科大学附属北京胸科医院
1、送检材料有限。 2、组织内具有诊断特征的病变不充分。 3、诊断经验不足。 4、技术影响：抗酸染色假阳性（污染）造成
肺肉芽肿
感染性肉芽肿
非感染性肉芽肿
感染性肉芽肿
1、分枝杆菌感染 结核分枝杆菌感染（结核病） 非结核分枝杆菌感染
2、真菌感染 曲菌、毛霉菌、隐球菌、组织胞浆菌、芽生菌
、球孢子菌等。 3、寄生虫感染
非感染性肉芽肿
1. 结节病 2.外源性过敏性肺泡炎 3.肉芽肿性血管炎 4. 铍沉积症（铍肉芽肿） 5. 异物肉芽肿 6.肺朗格罕斯细胞组织细胞增生 7.坏死性结节病样肉芽肿病 8.支气管中心肉芽肿 9.其它
金胺罗丹明染色，主要用于痰涂片。 不易保存。
❖ 六胺银、过碘酸雪夫（PAS）染色
可以使真菌显色，其意义在于同结核病的鉴别。
抗酸染色
特殊染色
PAS染色
结核病病理学诊断——蛋白检测
❖ 免疫组织化学（IHC）是在病理组织标本中检测 是否有目的蛋白的表达，在肿瘤诊断及肿瘤分型 中使用广泛，但是在结核病病理学诊断中的应用 极少。近年来，研究发现利用识别分枝杆菌抗原 的抗体用于IHC检查，可以提高结核病病理学诊 断的敏感度。
分枝杆菌分泌蛋白的免疫组织化学检测
结核病病理学诊断——基因检测
❖ 基因检测技术是目前分子病理学诊断中最常用的方法。 通过检测病原菌特异基因序列（如16s rRNA、 IS6110、 IS1081等），可以鉴别诊断结核病与 非结核分枝杆菌病，并能进行菌种鉴定。
❖ 通过检测耐药相关基因（如rpoB，katG等）的突 变情况，可以为耐药结核病的诊断提供辅助依据。
肺肉芽肿性疾病的病理诊断
肺肉芽肿性疾病的病理诊断
一、肺肉芽肿性疾病分类 二、肺肉芽肿性疾病的诊断与鉴别
诊断及存在的问题
一、肺肉芽肿性疾病分类
肉芽肿（肉芽肿性炎、慢性肉芽肿性炎）
由巨噬细胞及其衍生的增生细胞，如上皮样细胞 （类上皮细胞）、多核巨细胞等，呈限局性浸润和 增生所形成的边界较清楚的病变。
病因：真菌感染
➢ 内源性：正常情况存在于呼吸道，如念珠菌等 ➢ 外源性：吸入真菌孢子感染，如曲霉菌等 ➢ 继发感染：隐球菌等