山豆根中生物碱类化学成分研究

山豆根中生物碱类化学成分研究

王文蜀12*周亚伟12叶蕴华1, 闫萍2

1生物有机与分子工程教育部重点实验室, 北京大学化学与分子工程学院北京 100871

2 北京大学世佳研究中心北京 100084

中药山豆根为豆科植物越南槐Sophora tonkinensis Gaonep.的根主产广西贵州, 史载于宋代开宝本草历代本草均有收载其味苦性寒为清热解毒消肿利咽之要药收入中国药典八五版临床和药理实验证明其生物碱有抗菌消炎平喘抗癌和保肝等活性因此我们对山豆根进行了化学成分研究经过0.5%盐酸水溶液渗漉通过732型阳离子交换树脂

0.6%氨醇溶液洗脱树脂的方法提取山豆根中总生物碱成分采用碱性氧化铝柱层析硅胶柱层析凝胶柱层析和制备薄层色谱分离纯化得到15个化合物鉴定了其中7个生物碱经理化性质测定和波谱解析的方法鉴定为苦参碱[+-matrine]氧化苦参碱[(+)-matrine N-oxide]

异苦参碱[(isomatrine)]槐果碱[(+)-sophocarpine]槐定碱[+-sophoridine]

槐胺[+-sophoramine]槐醇[+-sophoranol]

1 仪器与材料

旋转蒸发器 RE52A 上海亚荣生化仪器厂电子恒温水浴锅 天津市泰斯特仪

器有限公司循环水式多用真空泵 SHB B95型 郑州长城科工贸有限公司 WRR熔点仪 上海精密仪器有限公司质谱仪 ESI Mass Esquire-LC核磁共振仪Mercury 200MHz

Varian732型阳离子交换树脂(上海化工厂)碱性氧化铝(柱层析用) 西德MERCK公司

柱层析用硅胶200-300目硅胶GF254均为青岛海洋化工厂产品石油醚丙酮甲醇等有

机溶剂均为分析纯北京化工厂氘代试剂CDCL

3北京化工厂分装山豆根药材购置于

安徽毫州

2 提取与分离

山豆根药材5.0kg, 以19倍量0.5%盐酸水溶液渗漉渗漉液载入732型阳离子交换树脂

经水及30%乙醇溶液洗脱除杂然后以6%氨醇溶液洗脱总生物碱成分减压回收氨醇液得总碱浸膏132g 取浸膏100g上碱性氧化铝柱以石油醚-丙酮501-13直至纯甲醇系统梯度洗脱层析柱200ml/段收集流出液共收集洗脱液572份22-69段得到白色针状结晶

化合物284-332段得到白色片状物质经过乙醇重结晶得化合物374-404段经一次

Sphadex-LH20柱层析反复硅胶柱层析再经过制备TLC纯化展开剂为氯仿-甲醇-浓氨水5 0.60.3得化合物 438-450段经硅胶柱层析氯仿-甲醇251-11洗脱得白色羽

状针晶化合物498-549段经硅胶柱层析氯仿-甲醇401-11洗脱再经过Sphadex-LH20柱层析结合制备TLC手段依次得到化合物

3 结构鉴定

苦参碱I白色簇晶丙酮m.p. = 76-77 分子式 C 15H24N2O, ESI-MS M/Z (%) 249 [M+H]+ (100)上述数据与文献[1]苦参碱数据一致此外它与苦参碱的标准品在多种溶剂系统中薄层层析所得比移值一致,混合物斑点均匀不分开

氧化苦参碱无色棱晶丙酮m.p. = 162-163分子式C

15

H24N2O2ESI-MS M/Z (%): 265[M+H]+ (100)上述数据与氧化苦参碱数据[2]相符此外它与氧化苦参碱的标准品在多种溶

剂系统中薄层层析所得比移值一致,混合物斑点均匀不分开

异苦参碱白色针晶甲醇, m.p. = 135-137分子式C

15H24N2O,ESI-MS M/Z(%)

249[M+H]+ (100)1H NMR CDCl 3TMSδ 4.13 (dd, J=4.2,12.4Hz, H-17a,17e), 3.55 (m, H-6,11),

2.69-2.82 (m, H-10e,14e,2e), 1.73-2.15 (m, H-2a,4,7, 8,14a,10a)上述数据与文献报道[2]异苦参碱数据一致

槐果碱羽状结晶甲醇, m.p. = 51-52分子式C

15

H22N2O,ESI-MS M/Z (%) 247 [M+H]+ (100)1H NMR CDCl 3TMSδ 6.45 (dd, J=3.8,11.2Hz, H-13), 5.75 (d, J=9.6Hz, H-14),

4.17 (dd, J=7.6,16.0Hz, H-17a,17e), 3.92 (m, H-11), 2.99 (m, H-6), 2.75 (m, H-10e,14e,2e), 1.88-2.15 (m, H-2a,4,7, 8,14a,10a)上述数据与文献报道[3]槐果碱的相应数据一致

槐定碱无色棱晶丙酮m.p. = 162-163分子式C

15H24N2O,ESI-MS

M/Z(%):249[M+H]+ (100)1H NMR CDCl 3TMSδ 3.95-4.03 (dd, J=4.2,12.4Hz, H-17a,17e), 3.58 (m, 11), 2.75 (m, H-6), 2.69-2.98 (m, H-10e,14e,2e), 1.80-2.06 (m, H-2a,4,7, 8,14a,10a)上述数据与文献报道[4]槐定碱的相应数据一致

槐胺白色针晶丙酮m.p. = 164-165分子式C

15H20N2O,ESI-MS M/Z (%):

245[M+H]+ (100)1H NMR CDCl 3TMSδ 7.30 (dd, J=9.2Hz, H-13), 6.45 (d, J=8.8Hz, H-14),

6.24 (d, J=

7.5Hz, H-12), 4.20 (q, H-17a), 3.83 (q, H-17e)以上数据和文献[5]中槐胺的相应数据相符.

槐醇白色片状结晶丙酮m.p. = 171-172. 分子式C

15

H24N2O2,ESI-MS M/Z (%): 265[M+H]+ (100)1H NMR(CDCl3,TMS)δ 4.29(d, J=13.6Hz, H-17e), 3.76(m, H-11), 3.19 (d,

J=13.2Hz, H-17a), 2.83 (bd, J=11.2Hz, H-10e), 2.72 (bd, J=11.7Hz, H-2e)上述数据同文献[5]中槐醇的相应数据一致

除了从山豆根中分离得到7个属于苦参碱类衍生物的已知生物碱成分我们还从该药材中分离得到一些含量较少的其他生物碱类化合物其结构鉴定工作仍在进行中

参 考 文 献

[1] 祝经平何明焕卢涌泉 从山豆根中提取精制苦参碱及其结构确认 «中成药» 199719 36

[2] 汪纪武«植物有效成分手册» 北京人民卫生出版社1986 P.700

[3] 汪纪武«植物有效成分手册» 北京人民卫生出版社1986 P.795

[4] 汪纪武«植物有效成分手册» 北京人民卫生出版社1986 P.298

[5] 窦金辉李家实阎文玫 山豆根生物碱成分的研究 «中国中药杂志» 198914296