柱色谱法分离荧光黄和亚甲基蓝

5.清理：分离结束后，应先让溶剂尽量流干，然后倒置，用吸耳球从活塞口向管内挤压空气，将吸附剂从柱顶挤压出。使用过的吸附剂倒入垃圾桶里，切勿倒入水槽，以免堵塞水槽。
五、结果与讨论
洗脱剂极性的选择原则：
第一，先极性小的，再极性大的，可以是单一溶剂，也可是混合溶剂
第二，溶剂纯度要高并经干燥过的
溶剂的结构与吸附能力的关系：
2．溶剂
色层的展开首先使用极性较小的溶剂，使最容易脱附的组分分离，然后加入不同比例的极性溶剂配成的洗脱剂，将极性较大的化合物洗脱下来。
三、仪器试剂ห้องสมุดไป่ตู้
20cm×1cm层析柱；
吸附剂：中性氧化铝100-200目；石英砂；
荧光黄和亚甲基蓝的混合液；95％乙醇；
四、实验步骤
1.装柱（干法）：在色谱柱内添加厚1cm左右的石英砂，然后添加100-200目的氧化铝约18cm左右，再在上面加一层1cm厚的石英砂。
3.装柱的技术：松紧度
4.吸附剂的用量
5.柱高：柱子太高洗脱慢
化合物的吸附性与它们的极性成正比，即极性大吸附力强，后洗脱。
色谱柱的装填分为：干法和湿法两种
柱高和柱直径之比=7.5：1
实验效果如图：
六、注意事项
1.吸附剂的选择和活化
常用洗脱剂的极性：
石油醚＜环己烷＜四氯化碳＜甲苯＜苯＜二氯甲烷＜氯仿＜乙醚＜乙酸乙酯＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水＜乙酸
2.洗脱剂的选择：对未知样品先用极性小的溶剂洗脱，再用极性大的溶剂洗脱
XXXX大学
实验报告
柱色谱法分离荧光黄和亚甲基蓝
姓名：
班级：环境XXX
开放性化学实验
课程名称
开放性化学实验
实验名称
柱色谱法分离荧光黄和亚甲基蓝
一、实验目的
1.掌握色谱法的基本原理；
2.学会利用柱色谱分离提纯有机化合物的规范操作。
二、实验原理
柱色谱利用吸附剂（硅胶、氧化铝等）对不同组分吸附能力的差异从而达到分离目的。常用的有吸附色谱和分配柱色谱两类，前者常用氧化铝和硅胶做固定相，后者是以硅胶、硅藻土和纤维素做支持剂，以吸收较大量的液体做固定相，而支持剂本身不起分离作用。
2.润湿吸附剂：向柱中倒入一定量的95%乙醇，打开活塞，赶走气泡，注意控制流出速度1滴/s左右。
3.加样：当溶剂刚好流至上层石英砂面时，立即用滴管沿壁加入1mL的荧光黄与亚甲基蓝混合液，当此溶液流至石英砂面时，立即用少量的95%乙醇清洗下管壁的有色物质，如此连续2-3次，直至洗净为止。
4.洗脱：用95%乙醇作洗脱剂进行洗脱，当色谱柱内出现明显谱带即可。
1．吸附剂
常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙等。吸附剂应经过纯化和活性处理，颗粒大小均匀。对吸附剂来说粒子越小、表面积越大，吸附能力就越高，但是颗粒小时，溶剂的流速就太慢，因此应根据需要确定。
大多数吸附剂都能强烈地吸水，而且水分易被其它化合物置换，而使吸附剂的活性降低，通常用加热的方法使吸附剂活化。