中药配方颗粒汤剂与饮片汤剂等效性比较研究 - 黄连解毒汤

1.38％
1.88％
2.08％
0.92％
2种汤剂指纹图谱比较研究
色谱条件
• 色谱柱：Diamonsil C18 (250×4.6 mm，5 μm)； • 流动相：水-甲醇-0.05%磷酸，梯度洗脱； • 柱温：35℃； • 检测波长：254 nm； • 流速：1 mL ·min-1； • 进样量：10 μL。
中药配方颗粒汤剂与饮片汤剂 等效性比较研究
中药饮片改革形式
中药流浸膏 袋泡剂 中药超微颗粒 中药配方颗粒
最受关注 前景看好
中药配方颗粒的优势
克服中药饮片诸多弊端
– 方便性（免煎、服用、携带） – 剂量准确、改善药房从业人员工作环境 – 储存时间长 – 节约仓库面积
质量可控 节约药材
小鼠分组后，除空白对照组外，每天灌胃一次，连续7天， 7天后其他各组小鼠均 用二甲苯造模，1.5小时后处死小鼠，并测定小鼠左右耳朵重量。
统计学处理
肿胀度（mg）=右耳重量—左耳重量
抑制率=模型对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度×100%
模型对照组平均肿胀度 (抑制率〉30%，表明有抗炎效果)
数 据：均数±标准差 统计软件：SPSS12.0 统计方法：组间差异用One-Way ANOVA检验
配方颗粒汤剂 中（2倍低剂量） 高（4倍低剂量）
抗炎作用对比研究
动物模型制备及处置
大鼠分组后，除空白对照组外，每天灌胃一次，连续7天，7天后其他各组 小鼠均用蛋清造模，并于0.5、1、2、3、4、5、6小时后测定大鼠足趾肿 胀度。
甲醇
流动相组成（％） 0.05%磷酸
0
45
25
30
10
30
40
30
15
0
80
20
20
0
90
10
汤剂色谱图
对照品HPLC色谱图
黄连解毒汤HPLC色谱图
1盐酸小檗碱，2 盐酸巴马亭，3 盐酸药根碱，4 黄芩苷，5 栀子苷
2种汤剂各成分测定结果
样品
盐酸小檗碱 盐酸巴马亭 盐酸药根碱 黄芩苷
栀子苷
（mg /副） （mg /副） （mg /副） （mg /副） （mg /副）
• 色谱柱： Diamonsil C18 （4.6×250 mm，5 μm ）； • 流动相：水－甲醇－0.05%磷酸，线性梯度洗脱； • 检测波长：345、280、238 nm； • 柱温：35℃；流速：1 mL ·min-1；进样量：10 μL。 • 分析时间为25 min。
梯度洗脱时间程序
时间 （min） 水
指纹图谱比较：两者的指纹图谱非常相似，相似度>0.99。
主要有效成分比较：中药配方颗粒汤剂中盐酸小檗碱、盐酸巴马亭、盐酸药 根碱、黄芩苷、栀子苷等5种成分含量均明显高于传统饮片汤剂。
2种汤剂主要药效比较
实验方案
抗炎实验 解热实验
小鼠耳肿胀法 大鼠足跖肿胀法
大鼠法
体外抑菌和杀菌实验
试管二倍稀释法 平板活菌记数法
化学成分
综合比较
主要药效
2种汤剂比较
一、化学成分
1、主要成分含量
盐酸小檗碱、巴马亭、药根碱、黄 芩苷、栀子苷
2、指纹图谱
二、主要药效
黄连 9 g 黄柏 6 g 黄芩 6 g 栀子 9 g
盐酸小檗碱、 巴马亭、药根碱 黄芩苷 栀子苷
2种汤剂主要有效成分比较
同时测定盐酸小檗碱、巴马亭、药根碱、黄芩苷、栀子苷含量 色谱条件
中药配方颗粒相关争议焦点
传统饮片汤剂
配方颗粒汤剂
“混合煎煮”的方药 VS “ 单提混冲”的方药 两者是否具有等效性？
化学成分 主要药效
2方面比较研究
研究思路
研究单位：中南大 学湘雅医院 研究目的：复方的 中药配方颗粒/饮 片汤剂的等效性 复方筛选：经典方 剂
复方黄连解毒汤 传统饮片汤剂 中药配方颗粒汤剂
两两比较采用LSD法检验 p<0.05时差别有统计学意义。
实验结果
2种汤剂对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 （均数±标准差, n＝10)
分组
空白对照组 模型对照组 醋酸泼尼松组 传统饮片低剂量组 传统饮片中剂量组
传统饮片高剂量组
配方颗粒低剂量组 配方颗粒中剂量组
配方颗粒高剂量组
注： * 与空白对照组比较, p<0.05；
259.2
369.6
58.5 中药配33.方0 颗粒汤剂27质9.3量较传统388.8
10.54％ 饮片汤12.剂97稳％定。 6.28％
8.69％
101.4
56.4
354.6
571.2
103.5
57.9
363.3
579.0
104.1
58.5
369.6
581.4
102.9
57.6
362.4
577.2
△ 与模型对照组比较, p<0.05；
○ 与中、高剂量组比较, p<0.05；
肿胀度（mg）
0.22±0.11 8.58±2.71* 5.51±1.75*△ 6.56±1.76*△ ○ 4.71±1.22* △ 4.51±1.23* △ 6.58±1.72*△○
4.81±1.31* △ 4.53±1.23* △
抗炎作用对比研究
1、对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
空白对照（生理盐水）
分组
模型对照（生理盐水） 雄性小鼠
阳性对照（醋酸泼尼松） 低（临床等效剂量） 传统饮片汤剂 中（2倍低剂量） 高（4倍低剂量）
实验组 低（临床等效剂量）
配方颗粒汤剂 中（2倍低剂量） 高（4倍低剂量）
抗炎作用对比研究
动物模型制备及处置
传1 统2 饮 片3 汤 平均 剂
RSD
配1
方2
颗 粒
3
汤 平均
剂 RSD
266.7 255.6 234.6 252.3 12.16％ 476.1 481.5 483.3 480.3 0.78％
65.1
37.8
291.0
427.8
57.9 中药配30.方9 颗粒可提28高8.0药材利用369指纹图谱梯度洗脱时间程序
时间 （min）
0 2 20 30
流动相组成（％）
水
甲醇
0.05%磷酸
80
10
10
65
25
10
50
40
10
30
60
10
32
15
75
10
45
0
90
10
2种汤剂指纹图谱比较
mAU 600
500
400
300
200
100
0
10
20
30
40
min
—— 中药配方颗粒汤剂 —— 传统饮片汤剂
抑制率（% ）
35.8 23.5 45.1 47.4 23.3 43.9 47.2
抗炎作用对比研究
2、对蛋清所致大鼠足跖肿胀的影响
分组 空白对照（生理盐水）
模型对照（生理盐水） 雄性大鼠
阳性对照（醋酸泼尼松） 低（临床等效剂量） 传统饮片汤剂 中（2倍低剂量） 高（4倍低剂量）
实验组 低（临床等效剂量）