蛋白质的改性
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酰化反应式:
酰化后蛋白质分子表面负电荷增多, 多肽链伸展 及空间结构发生较大改变,导致分子柔韧性提高, 从而增强蛋白质溶解性、持水性及持油性,改善乳 化性及起泡性。
2、3去酰胺改性
一般认为蛋白质中的脱酰胺是羧基中的0和H直接 发生质子化作用,导致NH释放,即将蛋白质中天 冬酰氨和谷氨酰胺脱去酰胺基生成天冬氨酸和谷氨 酸。通过去除此类蛋白质酰胺基团,便可获得良好 溶解性、乳化性及发泡性。 蛋白质化学去酰胺作用可通过以下二种机制进行: (1)酸或碱催化下水解;(2)p一转变机制(pshiftmechanism)。
2、 化学改性 化学改性是通过化学试剂作用于蛋白质, 使部分肽 键断裂或者引入各种功能基团如亲水亲油基团、二 硫基团、带负电荷基团等, 利用蛋白质侧链基团的 化学活性, 选择地将某些基团转化为衍生物, 以此来 达到改变蛋白质功能性质的目的。 食品蛋白质化学改性方法,包括酸碱化、酰化、脱 酰胺、磷酸化、糖基化(即美拉德反应) 等方法。
2、1 酸调改性 蛋白质在水溶液中是两性离子,在其等电点,蛋白 质分子本身具有最低的自由电荷,分子自身容易相 互聚集,并从水溶液中沉淀出来,其水合度也达到 最低。利用这一特点,用各种酸改性蛋白质,研究 制得的塑料样片在吸水性能上的变化。调节pH值的 酸包括盐酸、硫酸、醋酸、丙酸、磷酸和柠檬酸等 。 例:加入硼酸3%会明显提高全粉白豆蛋白的机械 性能。
Hale Waihona Puke 酸碱去酰胺改性是在比较温和条件下进行。 (1)在酸性条件下,去酰胺反应是直接水解蛋白 质酰胺键中氨,脱氨形成羧酸。但酸法去酰胺由于 温度高,不仅在酸的催化下肽键水解控制不好,蛋 白质也有部分变性。 (2)用碱催化去酰胺改性仅台湾有报道,这种方 法虽速度快,但使蛋白质中氨基酸发生消旋作用, 使必需氨基酸L一对映体减少和消化率降低,并产 生赖丙氨酸,毒理研究表明它对小鼠肾有毒害作用, 因此研究甚少。
蛋白质的改性
张攀攀
蛋白质是由各种氨基酸相互联结而构成的具有 空间结构的生物大分子。其理化性质(尤其分 子量、氨基酸组成、静电荷和表面疏水性等) 与功能特性直接相关。
蛋白质改性就是用生化因素(如化学试剂、酶制剂等) 或物理因素(如热、射线、机械振荡等)使其氨基酸 残基和多肽链发生某种变化,引起蛋白大分子空间 结构和理化性质改变,从而获得较好功能特性和营 养特性蛋白质。
目前常用的蛋白质改性技术有: 1、物理改性 2、化学改性 3、酶法改性 4、基因工程改性等
1、物理改性 所谓蛋白质的物理改性是指利用机械处理、热、挤 压、冷冻、电、磁等物理作用形式,改变蛋白质的 高级结构和分子间的聚集方式。一般不涉及蛋白质 的一级结构。如蒸煮、搅打等均属于物理改性技术。 它具有费用低,无毒副作用,作用时间短及对产品 营养性能影响较小等优点。 物理改性主要用于蛋白的增溶和凝胶。
因 点 改 变 示 意 图
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2、5 磷酸化作用改性 蛋白质的磷酸化作用是无机磷酸与蛋白质上特定的 氧原子( Ser、Thr、Tyr 的-OH) 或氮原子( Lys 的氨 基、Arg 的胍基末端N) 作用形成C-O- Pi 或C-N- Pi 的酯化反应。蛋白质的磷酸化改性可通过化学方法 或酶法予以实现。常用的磷酸化试剂有化学磷酸化 试剂和蛋白激酶。
常用的磷酸化试剂有化学磷酸化试剂和蛋白激酶。
①化学磷酸化试剂:如磷酰氯(POC1 )磷酸、三聚磷
酸钠(STP),其中大规模应用于工业生产的为 POC1 、STP;
②蛋白激酶:如依赖于CAMP激活的蛋白激酶
(CAMPdPK)、酪蛋白激酶。 据报道,用STP改性的小麦面筋蛋白的溶解度、乳 化性及乳化稳定性、起泡性等都较未改性的面筋蛋 白有显著提高 。
3 、酶法改性 酶改性的方式有很多种,酶 法改性通常是蛋白酶的有限 水解,改性的程度与酶量、 底物浓度、水解时间等因素 密切相关 。通过蛋白酶催化 的蛋白质水解作用能提高蛋 白质的溶解度,这主要是由 于形成了较少的,弱亲水的 和较易溶剂化的多肽单位 。 大豆蛋白专用酶
同化学改性和物理改性相比,酶法改性具有以下几 个方面的优点: (1)酶解过程十分温和,不会破坏蛋白质原有的功能 性质; (2)最终水解产物经平衡后,含盐极少且最终产品的 功能性质可通过选择特定的酶和反应因素加以控制; (3)蛋白水解物易被人体消化吸收且具有特殊的生理 功能。
例:1、蛋白质或浓缩物彻底干磨后会产生小粒子 和大表面的粉末,与未研磨的试样相比,水吸收、 蛋白质的溶解度、脂肪吸收和起泡性质都得到了改 进。 2、挤压处理时,蛋白质在高温高压下受定向力的 作用而导致定向排列压力的释放,水分的瞬时蒸发, 形成具有耐嚼性和良好口感的纤维状蛋白质。
质构化(texturization)也是一种物理改性, 即将蛋白质经水 等溶剂溶胀、膨化后在一定温度下进行强剪切挤压或经螺杆 机挤出或造粒的过程,通常用于食品加工,使蛋白质的密度 降低, 吸水率和保水性提高。 据报道,小麦质构化蛋白产品, 被切成薄片时,可吸收3倍于自 重的水分,它们已成功地配用于 汉堡包、咖喱调味食品、炖制辣 味肉制品、油炸鸡胸脯和鸡块等 制品的加工。
4 、基因工程改性
基因工程法是通过重组蛋白质的合成基因,从而改变蛋白质 功能特性。但由于该技术周期长、见效慢, 目前仍处于实验 室阶段。 目前针对大豆蛋白的基因工程改性主要集中在以下几个方面: 一是改变大豆球蛋白的组成,补充提高其营养价值;二是改 变脂肪氧化酶同功酶组成,减少大豆产品的异味;三是改变 脂肪合成酶系,使其脂类组成发生变化;其他也有针对抗营 养因子的研究。 基
2、4糖基化作用改性 将碳水化合物以共价键与蛋白质分子上氨基(主要为 Lys的ε—氨基)或羧基相结合的化学反应(包括美拉 德反应),称之为蛋白质糖基化作用。 这种方法,也被广泛用来提高蛋白质功能特性。一 般来说,合成糖基化蛋白在较低离子强度或天然蛋 白等电点处仍表现出较高溶解性;同时,糖基化也 提高蛋白质了热稳定性,且随着糖基化程度提高, 糖基化蛋白质功能特性也随之提高。
2、2 酰化作用改性
酰化的原理是蛋白质分子的亲核基团(如氨基或羟基) 与酸酐的亲电子基团(如羰基)相互反应,从而引入 了酸亲水基团,然后在催化剂作用下又引入长碳链 亲油基团,使得蛋白质成为具有双极性基团的高分 子表面活性剂的过程。 酰化改性主要是通过使用酰化剂,最为常见酰化剂 为琥珀酸酐和乙酸酐。