一种新型医用消毒超声耦合剂杀菌效果和毒性实验观察

一种新型医用消毒超声耦合剂杀菌效果和毒性实验观察

研究一种新型医用消毒超声耦合剂的杀菌效果及其相关性能。方法采用载体浸泡定量杀菌试验和动物实验。结果作用10min，对金黄色葡萄球菌ATCC6538、大肠杆菌8099、白色念珠菌ATCC10231的杀灭对数值均>5.00；对家兔皮肤刺激反应积分为0；变态反应试验评分为0；经54℃放置14d后，对白色念珠菌杀灭效果无变化。结论该医用超声耦合剂有良好的杀菌作用，无毒性、刺激性，稳定性好。

用耦合剂驱除探头与人体组织之间的空气，从而建立高效、保真的超声传播通道，是超声技术的一个重大进步。为了确保超声耦合剂符合安全、有效的原则，国家有关部门对已经大量生产和普遍使用的医用超声耦合剂制定了相应标准，最新版的《医用超声耦合剂》标准(YY0299—2008)已开始实施。最近，具有灭菌功能的新型医用耦合剂陆续出现并进入医院，为了解该类型超声耦合剂消毒相关功能，在实验室对某品牌医用消毒超声耦合剂的杀菌效果、理化特性以及使用安全性进行了评价。现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 超声耦合剂“超洁”牌洁必超医用超声耦合剂，批准文号：川成都食药监械（准）字2010第1230029号，12g/支，有效期为2年。呈无色凝胶状，PH 8.0，含复合季铵盐。1.1.2 标准菌株金黄色葡萄球菌ATCC6538、大肠杆菌8099、白色念珠菌ATCC10231，均为成都军区联勤部疾病预防控制中心实验室保存菌株。

1.2 中和剂载体定量鉴定试验[1]

设平行6组试验，按载体浸泡定量杀菌试验方法进行。试验结果，以第1组不长菌或菌落数远少于第2组，第2组菌数较第1组多，但较第3、4、5组少，第3、4、5组组间菌数相差不超过15%，第6组不长菌，表明所用中和剂及其浓度适宜。

1.3 载体浸泡定量杀菌试验[1] 取无菌小平皿，按每片5.0ml 的量，将耦合剂注入平皿中。将盛有耦合剂的平皿置于20℃±1℃水浴箱内5min 后，用无菌镊子分别放入预先制备的菌片3 片，并使之浸透于耦合剂中。待菌药相互作用至各预定时间，用无菌镊子将菌片取出分别移入含5.0ml 中和剂试管中。用电动混合器混合20s，再放置5min以上充分中和，混匀。吸取1.0ml接种平皿，每管接种 2 个平皿。另取1个平皿，注入10.0ml 稀释液代替耦合剂，放入 2 片菌片，作为阳性对照组。其后的试验步骤和活菌培养计数与上述试验组相同。将金黄色葡萄球菌ATCC6538、大肠杆菌8099样本在37℃温箱中培养培养48h，白色念珠菌ATCC10231样本在25℃温箱中培养48h，观察结果。试验重复3 次，计算各组的活菌量（cfu/片），并换算为对数值（N）。

1.4 稳定性试验[1] 将该耦合剂产品原包装分两组分别经37℃放置90d，54℃放置14d，于放置前后分别取样，采用载体浸泡定量杀菌试验检测对白色念珠菌杀灭效果的变化。

1.5 毒性试验[1]

1.5.1 一次完整皮肤刺激试验在试验前24h，用脱毛剂将健康普通级家兔背部脊柱两侧左、右各约3cm×3cm的毛去掉，不得损伤皮肤。次日将受试物0.5ml涂抹一侧皮肤上。另一侧去毛皮肤作为空白对照(或溶剂对照)。4h后，用温水或无刺激性溶剂除去残留受试物。分别于去除受试物后1h、24h和48h观察皮肤局部反应，进行刺激反应评分。

1.5.2 变态反应试验选用体重200～300g的健康普通级白色豚鼠16只，随机分为试验组、阴性对照组和阳性对照组。按照《消毒技术规范（2002年版）》要求，对试验组豚鼠，给予受试物诱导和激发处理。阳性对照组给予阳性致敏物(2，4-二硝基氯苯)诱导和激发处理。阴性对照组仅给以受试物激发处理。观察皮肤反应，并进行评分。

2 结果

2.1 中和剂载体定量鉴定试验结果表明，选择0.5%吐温80+0.1%卵磷酯作为中和剂，可有效中和受试剂对试验菌的杀灭作用，该中和剂及其中和产物对试验菌及培养基均无影响

2.2 载体浸泡定量杀菌试验结果表明，用受试剂作用10min，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌的平均杀灭对数值均>5.00（表2）。

2.3 稳定性试验结果该超声耦合剂外观为无色透明膏体，在25℃时粘度为3400mPa.s~10000mPa.s, pH值5.5~8.0。结果表明，3批次该耦合剂密封包装分别经37℃保存90d，54℃保存14d，与放置前受试物的活性物相比，含量最高下降0.15%，对白色念珠菌的杀灭率最高下降0.7%，稳定性良好，可将贮存有效期定为2年（表3）。

2.4 毒性试验结果一次完整皮肤刺激试验结果表明，该耦合剂对家兔皮肤刺激反应积分为0，属无刺激性。变态反应试验评分为0，属无刺激性。

3 讨论

超声探头直接接触患者皮肤，大多数医生检查完病人后往往仅用卫生纸擦拭探头，未经严格消毒即开始下一次检查，武桂玲[2]等发现未消毒的探头都有大肠杆菌、金黄色葡萄球菌，易造成患者间的交叉感染。超声耦合剂在功能上作为诊断仪器的辅助和延伸，质量参差不齐，容易染菌，凝胶中可发现大量明显的霉菌菌丝体等微生物[3]。Ohara T等[4]发现金黄色球菌在耦合剂中生存时间比水中长，是引起医院内感染的重要传播途径，如不重视、易造成医源性感染。

因探头保护膜、外壳的结构材料及性能要求，不允许接触腐蚀性的消毒剂（如含氯消毒剂、强氧化剂等）、易着色的消毒剂（如碘伏，影响透声性能），不得高温消毒。为避免对超声波的干扰，不建议使用紫外线直射消毒探头，因液体喷洒、气体熏蒸、超薄塑料纸包裹不便日常操作，不宜长期坚持推广实施。应根据探头的结构、材料及消毒剂的理化特性，选择安全有效、简便易行的消毒剂和消毒方式[5]。

与粘膜接触（包括阴道、眼部、食道、直肠和会阴部位）的超声操作，相对于在完好皮肤上进行的非介入性超声，对患者的安全性威胁大得多。本实验表明，该含季铵盐类消毒剂的新型医用超声耦合剂，不仅具有普通超声耦合剂的性质，还对医院感染常见细菌有良好的杀灭作用，性质稳定，对人体无毒性、无刺激性，使用安全。鉴于探头所用商品护套的穿孔率达8%~81%，避孕套的穿孔率达0.9%~2%[6]，探头和耦合剂依然有接触粘膜的机会。因此，使用此类具有灭菌功能的医用超声耦合剂，配合75%酒精纱块，可有效防止病原体的传播、避免医源性交叉感染，消除医疗隐患。