《生物化学验》设计性实验可行性报告

嘉应学院生命科学学院

《生物化学实验》

设计性实验可行性报告

2013-14-1

实验题目

油脂皂化值得测定

姓名：吕晓敏

年级：1201 专业：生物科学

同组人员：谢燕萍、王艳琴

提交日期：2013 年12月9日

格式（占30%）

科学性

（占70%）

总分考核教师

内容部分

一、实验原理

皂化价：指1g油脂完全皂化所需要的KOH的毫克数，以mg KOH/g 油表示。脂肪的皂化值和其相对分子质量成反比(亦与其所含脂酸相对分子质量成反比)，脂肪的碱水解称皂化作用。KOH首先与油脂发生水解，随后与水解释放的脂肪酸形成脂肪酸钾即肥皂，由皂化价的数值可知混合脂肪(或脂酸)的平均相对分子质量。

将油脂与过量的KOH乙醇溶液在回流温度下进行完全皂化反应，完全皂化后，用HCL标准溶液滴定KOH,做空白实验根据消耗HCL 的量之差计算皂化值。

二、自行确定试验材料的依据

原料：花生油（在超市随时可以买到，实惠）

三、所需器材及试剂（需详细描述配制方法）

（1）仪器：

恒温水浴锅、电子分析天平、锥形瓶250ml（×2)、冷凝管装置、50ml 的酸式滴定管移液管、50ml碱式滴定管、量筒、滴管、玻璃珠（2）试剂：0.1mol/L KOH 乙醇溶液（无醛的）：溶硝酸银1.5g于3ml 水中，加入1000ml乙醇,混匀，另溶KOH 3克于15ml热乙醇中，冷后倾入上述硝酸银—乙醇溶液中，再混匀，静置，使氧化银虹吸取上清液，蒸馏即得。

0.1mol/L 盐酸的标准溶液：取浓盐酸（相对密度1.19）8.5ml，加水稀释到1000ml，此溶液约0.1mol/L，需要标定。

标定方法如下：称取3—5g无水碳酸钾，平铺于直径约5cm扁形称量瓶中，110℃烘烤2h,置干燥器中冷却至室温，称取此碳酸钠两份，每份重0.13-0.15g,溶于50ml蒸馏水中，加甲基橙指示剂2滴，用待定的盐酸溶液滴定至橙红色。

C=(2m/106)/(V/1000)=m/(V×0.053)

其中C为盐酸溶液的浓度（mol/L），m为碳酸钠的质量，V为滴定时所耗盐酸溶液的平均体积（ml）,如两次滴定结果相差太大(≥0.2%),需重新滴定。

（3）70%乙醇取95%乙醇70ml,加蒸馏水稀释至95ml.

（4) 指示剂称取酚酞1g溶于95%的乙醇100ml。

四、自行设计试验步骤及其依据

1）在电子分析天平上称取花生油0.5g，置于250mL 烧瓶中，加入0.100mol/L KOH 乙醇溶液50ml。

2）烧瓶上装冷凝管于沸水浴内回流30～60min，至烧瓶内的脂肪完全皂化为止(此时瓶内液体澄清并无油珠出现)。皂化过程中，若乙醇被蒸发，可酌情补充适量的70％乙醇。

3.）皂化完毕，冷至室温，加1％酚酞指示剂2滴，以0.100mol/L HCl 液滴定剩余的碱(滴定所用0.100mol/L HCl 的量太少，可用微量滴定管)，记录盐酸用量。

4.）作空白试验，除不加脂肪外，其余操作同上，记录空白试验

五、预期试验结果

皂化值=c(V2-V1)×56.1÷m

V1—空白实验中的0.100mol/L盐酸溶液的用量（ml）

V2—花生油试验所需0.100mol/L盐酸溶液的用量（ml）

c—HCl 的物质的量浓度，即0.100mol/L；

m—花生油质量(g)；

56.1—每摩尔KOH 的质量(g/mol)。

V2=47.00ml V1=30.070ml 带入数据计算

皂化值=160

六、总结与分析

1油脂皂化值为160，比网上查的理论值偏低。

预期结果比理论值低可能是因为所用花生油不新鲜，油脂变质。也可能滴定时未等红色消失。

2用盐酸滴定溶液时，要注意滴定至红色消失为止。如果溶液颜色太深，终点观察不明显，可以改用密度为10g/l的酚酞试剂做指示剂。3皂化时，要防止乙醇从冷凝管挥发，同时要注意滴定液体积，酸标准溶液大于15ml，要适当补充适量乙醇。

4两次平行实验测定结果允许误差不大于0.5。

参考文献：生物化学实验技术教程