硝酸盐检测方法及基本原理

硝酸盐检测方法及基本原理

1.直接滴定碘量法

出入境检验检疫行业标准SN/T 0230.1-1993和SN/T 0230.2-1993[1]以及国际

葡萄酒总局采用的葡萄酒中亚硫酸盐快速试验方法[2]均属于此类方法。样品中

的二氧化硫包括游离态和结合态两种状态，如需测定样品中亚硫酸盐总量，则

首先向样品中加入碱溶液破坏二氧化硫的结合状态，使之与碱反应成盐，再加

入酸溶液使二氧化硫游离，以碘标准滴定溶液滴定，以淀粉指示剂指示终点。

如需测定葡萄酒中的游离亚硫酸盐，则样品中毋需加碱而直接酸化用碘滴定。直

接滴定碘量法测定的化学反应原理如下：

SO2 + 2KOH → K2SO3 + H2O （1）

K2SO3 + 2HCl → 2KCl + H2O + SO2 （2）

I2 + 2H2O + SO2 → 2HI + H2SO4 （3）

GB/T 5009.34-2003[3]中的“蒸馏-碘量法”以蒸馏手段提取样品中的二氧化

硫、通过乙酸铅溶液接收，以碘标准滴定溶液滴定。

2. 络合反应比色法

GB/T 5009.34-2003[3]中的“盐酸副玫瑰苯胺法”适用于各类食品中亚硫酸盐

总量的测定，其原理是利用亚硫酸盐与四氯汞钠形成稳定的络合物的特点，使

形成的络合物与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用呈紫红色的显色反应，在550 nm处

测定吸光度，与标准系列比较定量。

在此方法原理和使用基础上，上海出入境检验检疫局张社等研究提出了三乙醇胺

-副品红分光光度测定法[4]。该方法列举了碘量法与盐酸副玫瑰苯胺法的缺陷，

在仍然沿用络合反应比色法机理的基础上，改用三乙醇胺（TEA）替代四氯汞钠

为吸收液，在磷酸介质中采用副品红为显色剂，测定葡萄酒、淀粉和砂糖中的亚

硫酸盐总量。

日本食品卫生协会方法中的“蒸馏-比色法”分为提取和测定2个步骤，即先将

样品酸化使二氧化硫游离后在氮气流拖曳下加热蒸馏使其逸出，以氢氧化钠溶液

接收，量取一定量的接收液，加入碱性红9•甲醛混合液进行显色反应后测定吸

光度。

3. 蒸馏-碱滴定法

日本食品卫生协会方法[5]、ISO 5522-1981(E)[6]和国际葡萄酒总局常用方

法[2]均使用了相同的方法原理，即“蒸馏-碱滴定法”（蒸馏装置见图1）。样

品酸化后使二氧化硫呈游离态，在氮气流拖曳下加热蒸馏使其逸出，以过量的

过氧化氢溶液接收并将二氧化硫氧化为硫酸，以氢氧化钠标准滴定溶液滴定即

可推算样品中亚硫酸盐总量。如需测定葡萄酒中的游离亚硫酸盐含量，则毋需加

热，仅在常温下以氮气流拖曳使其逸出即可。考虑到水果、蔬菜样品中可能存在

挥发性有机酸的情况，ISO 5522-1981(E)方法中不仅对接收液进行滴定，更在附

录中提出了对滴定法测定结果的确证方法，即通过对接收液中硫酸根离子以重量

法或分光光度法加以测定，来确定样品中蒸馏出来的二氧化硫确切含量。同时规

定，滴定法与确证法的相对误差不得大于5%，否则以确证方法的检测结果为准。

4. 离子色谱测定法

上海出入境检验检疫局蔡则慈、郭德华建立的离子色谱法[7]在提取样品中的二氧化硫上沿用了样品酸化后以氮气流拖曳加热蒸馏的方法，蒸馏时间为40 min 以期完全提取其中的二氧化硫。以三乙醇胺为接收液，蒸馏结束后定容，选用抑制电导检测器以离子交换为原理进行测定，以保留时间定性、以外标法（二氧化硫标准溶液预先标定）定量。

三、各类检验方法的优缺点及适用范围

1. 直接滴定碘量法[1][2]

该方法系50年代引进的前苏联方法，原理简单、检测快速。但原上海进出口商品检验局在对出口土特产品中二氧化硫的长期检测中发现该方法存在以下缺陷：⑴ 对于出口脱水蒜、姜制品而言，由于样品中成分复杂、挥发性芳香物质多，因此标准碘溶液滴定至终点出现的蓝色极不稳定，稍瞬即逝，不可能如方法所述“保持30 s不消失”，从而给终点判定带来极大困难；

⑵ 对个别种类样品有假阴性问题。1997年，原上海进出口商品检验局接受委托，与日本海关就南通口岸出口输日盐渍藕中检出二氧化硫超过日方规定的30 mg/kg限量被扣一事进行技术交流，并先后采用SN方法（直接滴定碘量法）、GB 方法（盐酸副玫瑰苯胺法）和日本食品卫生协会方法（蒸馏-碱滴定法）对原始样品进行复验，由此而发现直接滴定碘量法对该样品中亚硫酸盐无法检出的假阴性问题，导致在此后的进出口把关中弃用该方法。但从实践来看，直接滴定碘量法仍然适用于脱水香葱等部分脱水蔬菜中亚硫酸盐的测定。

2. 络合反应比色法

2.1 盐酸副玫瑰苯胺法[3]

该方法系国家标准方法，其中亚硫酸盐与四氯汞钠能形成稳定的络合物，使测定过程中不至于因人为操作的熟练程度不同而导入误差。该方法的缺陷在于：

⑴ 由于显色反应原理的本身缺陷，可能存在干扰物质产生假阳性问题；

⑵ 方法的操作步骤繁复；

⑶ 涉及到有毒试剂（四氯汞钠）的使用和精制（盐酸副玫瑰苯胺）：

⑷ 在上述的出口盐渍藕技术交流中，盐酸副玫瑰苯胺法的测定结果明显过低而不为日方所承认，因此对该方法的适用范围须谨慎界定。

2.2 三乙醇胺-副品红分光光度法[4]

该方法以三乙醇胺代替有毒试剂四氯汞钠加入到样品中进行提取，过滤后定容在磷酸介质中用副品红显色测定葡萄酒、砂糖、淀粉中亚硫酸盐总量，具有令人满意的准确度和灵敏度：当样品中二氧化硫含量水平为0～25 μg/mL时吸光度与之呈线性关系，相关系数0.9983～0.9998，最低检出限0.10 μg，样品加标回收率98.4～111.2%。然而，由于样品的提取溶液直接参与比色，因此对白色的淀粉、砂糖乃至白葡萄酒均为适用，但红色、玫瑰红色的葡萄酒则对比色产生干扰，而且由于红葡萄酒的产地与种类繁多，使得因酒色而导致的吸光度偏差无规律可循。

2.3 蒸馏-比色法[5]

通过蒸馏方法提取样品中的二氧化硫，与接收液中的氢氧化钠反应得到亚硫酸钠，与碱性红9•甲醛显色，在580 nm下测定吸光度，与标准系列比较定量。该方法灵敏度高，适用于对蒸馏-碱滴定法难以检出（浓度为0.01 mol/L的标准