化学发光原理及应用课件
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• 按发光持续时间可分为：闪光和辉光两类Байду номын сангаас
Part III. 化学发光法的临床应用
甲状腺功能的免疫分析 糖代谢紊乱的免疫分析 常见肿瘤标志物及其免疫分析 常见传染性疾病的免疫检测
– 病毒性肝炎 – HIV感染 – 严重急性呼吸综合征（SARS)
其他免疫检测项目
甲状腺功能的免疫分析
而重新再成年个体出 癌胚抗原
糖蛋白 结肠、直肠、胰 腺、肺、乳腺
现的蛋白，其常见的 胰癌胚抗原 糖蛋白 胰腺
检测标志如下：
鳞状细胞抗 糖蛋白 肺、皮肤、头和
原
颈部
组织多肽抗 细胞角 乳腺、结肠
原
蛋白
CEA
• 原发性结肠癌，患者CEA升高者占45-90%. • 胰腺癌、胆管癌、胃癌、食道癌、肺癌、乳腺癌和泌尿系
胰岛素
胰岛素在糖尿病的分型和诊断中意义重大，其中 I 型又称胰岛素依赖型糖尿病（IDDM），空腹血浆 胰岛素较低，口服葡糖糖试验（OGTT)或馒头餐后 上升及下降极缓慢，甚至无任何变化，说明其胰 岛β细胞功能极差。II型又称非胰岛素依赖型糖尿 病（NIDDM），包括需胰岛素治疗和不需胰岛素 治疗两类，其特点为空腹高胰岛素血症；OGTT后 胰岛素释放延迟，高峰后移，但总释放量不低， 约12%的病人呈低反应或延迟反应说明II型糖尿病 和I型糖尿病有本质的区别。 另外胰岛素对肝病、胰岛素瘤、甲状腺功能亢进 的诊断也有一定的意义。
常见肿瘤标志物及其检测
• 胚胎性肿瘤标志物 • 含糖物质类标志物 • 酶类标志物 • 激素类标志物
胚胎性肿瘤标志物
• 这一类肿瘤标志物是 标志名称 指那些原本只能在胎 盘期出现，但在机体 甲肽蛋白
生化本 相关肿瘤的组织
质
细胞来源
糖蛋白 肝细胞、胚细胞
发生肿瘤时，其基因 癌胚铁蛋白 糖蛋白 肝
表达被再度激活，从
二、甲状腺功能减退
• 甲减为甲状腺激素分泌不足引起的代谢性疾病。 临床上分为原发性甲减，又称魏甲状腺性甲减； 以及继发性甲减，又称垂体-下丘脑甲减两类。血 循环中甲状腺激素浓度的测定在诊断甲减方面， TSH和FT3、FT4是灵敏的诊断指标，明显优于总甲 状腺激素，如TT3、TT4等。其价值依次为TSH= FT4>TT4>FT3>TT3.
化学发光反应存在于生物体(萤火虫、海洋发光生物)中 ，称生物发光(bioluminescence)。
生物发光的本质是化学发光
生物体化学发光现象的研究起源于古代，但 是，直到十九世纪末，这种现象与简单的有机反 应相联系才得到解释。
1877年 洛粉碱CL 1905年 洛粉碱类似物 1928年 鲁米诺 1935年 光泽精
三、低T3和低T3、T4综合征
• 低T3综合征是一种由于非甲状腺疾病 造成的甲状 腺激素异常，其发生与机体的代谢状态，基础疾 病的性质和严重程度以及外来因素，如用药等有 关。代谢状态差、基础病情加重时其发生率随之 增高；当病情好转、机体健康状况趋于正常时， 低T3状态可自行消失。
四、其他与甲状腺疾病有关的免疫 学指标
二、糖尿病的免疫学检测
以下是临床上常见的有关糖代谢紊乱的免疫 分析指标： 1. C肽 2.胰岛素 3.胰岛素抗体 4.谷氨酸脱羧酶抗体（GAD-Ab） 5.胰高血糖素
C肽
C肽测定用于了解II型糖尿病人是否需要胰岛素治疗，如果 C肽水平较低，葡萄糖刺激反应差，则表示表明立即或最 终需要胰岛素治疗，也可用于评价糖尿病酮症酸中毒病人 的胰岛功能。C肽的另一个重要的临床用途是各种低血糖 病因的鉴别。C肽水平升高科见于轻型糖尿病患者，常见 空腹血糖升高不多者C肽大多高于正常。胰岛素瘤患者， 如血中存在胰岛素抗体，血清C肽大都增高。胰腺肿瘤患 者行胰腺切除后，如血清C肽仍可测出，提示手术未能全 部切除胰腺组织。如果手术后一度阴性，后又称为阳性， 提示肿瘤复发或转移。 在肝硬化时，血浆胰岛素有升高趋势，其原因在于肝脏摄 取和降解胰岛素减少；但空腹血糖正常。
• 甲状腺机能的常见评价指标及其临床 意义 1.甲状腺机能亢进 2.甲状腺功能减退 3.低T3和低T3、T4综合征
一、甲状腺机能亢进
1972年提出T3型甲亢的诊断标准： 1.甲亢的症状和体征，常无突眼征，但心血管症状较明显； 2.血清TT4、FT4值正常； 3.TT3、FT3值升高；
T3型甲亢在临床上并非罕见，特别是缺碘地区患功能自主 性腺瘤的部分患者，或用T3治疗后出现的碘甲亢，目前认 为T3型甲亢不能算作一种独立疾病，因为发现T3型甲亢病 人中有一部分虽然TT3升高但FT3正常或低于正常，因此改 称高T3综合征为妥。 T4型甲亢，即T4毒症患者血清T3、FT3浓度正常；而T4、 FT4浓度升高。TSH值为正常低值或低于正常，并伴甲亢临 床症状。
• 抗甲状腺球蛋白抗体（TGAb） 多见于桥本氏甲状腺炎、自身免疫性甲状腺 疾病、原发性甲状腺功能减退、甲状腺功 能亢进患者等。
• 抗甲状腺微粒体抗体（TMAb） 多见于桥本氏甲状腺炎、自身免疫性甲状腺 疾病、原发性甲状腺功能亢进、原发性甲 状腺功能减退。
小结
• 综上所述，若对甲状腺功能 指标进行全面 评价，则上述各项指标对甲亢的诊断价值 依次为FT3>FT4>TT3>TT4；各项指标对甲减 的诊断价值依次为FT4=TSH>TT4>FT3>TT3
主要内容
• 化学发光基本原理 • 化学发光的分类 • 化学发光法的临床应用 • 化学发光免疫测定的特点
Part I. 化学发光基本原理
一、化学发光原理：伴随化学反应的光发射现象
某些物质在进行化学反应过程中，由于吸收了反应产生 的化学能而被激发，从激发态返回基态时，发射出一定波长 的光，这种吸收化学能使分子发光的过程称为化学发光 (chemiluminescence) 。
发现许多有机反应可产生CL
二、化学发光反应发生的条件
能量，通道，荧光物质
化学反应是放热反应。 必须存在形成电子激发态的通道。
激发态分子必须以辐射光子的形式回到
基态, 或将能量传递给荧光分子。
北京源德化学发光分析仪
MAGLUMI 化学发光分析仪
Part Ⅱ.化学发光的分类
• 按化学反应类型可分为：酶促化学发光和 非酶促化学发光两类
Part III. 化学发光法的临床应用
甲状腺功能的免疫分析 糖代谢紊乱的免疫分析 常见肿瘤标志物及其免疫分析 常见传染性疾病的免疫检测
– 病毒性肝炎 – HIV感染 – 严重急性呼吸综合征（SARS)
其他免疫检测项目
甲状腺功能的免疫分析
而重新再成年个体出 癌胚抗原
糖蛋白 结肠、直肠、胰 腺、肺、乳腺
现的蛋白，其常见的 胰癌胚抗原 糖蛋白 胰腺
检测标志如下：
鳞状细胞抗 糖蛋白 肺、皮肤、头和
原
颈部
组织多肽抗 细胞角 乳腺、结肠
原
蛋白
CEA
• 原发性结肠癌，患者CEA升高者占45-90%. • 胰腺癌、胆管癌、胃癌、食道癌、肺癌、乳腺癌和泌尿系
胰岛素
胰岛素在糖尿病的分型和诊断中意义重大，其中 I 型又称胰岛素依赖型糖尿病（IDDM），空腹血浆 胰岛素较低，口服葡糖糖试验（OGTT)或馒头餐后 上升及下降极缓慢，甚至无任何变化，说明其胰 岛β细胞功能极差。II型又称非胰岛素依赖型糖尿 病（NIDDM），包括需胰岛素治疗和不需胰岛素 治疗两类，其特点为空腹高胰岛素血症；OGTT后 胰岛素释放延迟，高峰后移，但总释放量不低， 约12%的病人呈低反应或延迟反应说明II型糖尿病 和I型糖尿病有本质的区别。 另外胰岛素对肝病、胰岛素瘤、甲状腺功能亢进 的诊断也有一定的意义。
常见肿瘤标志物及其检测
• 胚胎性肿瘤标志物 • 含糖物质类标志物 • 酶类标志物 • 激素类标志物
胚胎性肿瘤标志物
• 这一类肿瘤标志物是 标志名称 指那些原本只能在胎 盘期出现，但在机体 甲肽蛋白
生化本 相关肿瘤的组织
质
细胞来源
糖蛋白 肝细胞、胚细胞
发生肿瘤时，其基因 癌胚铁蛋白 糖蛋白 肝
表达被再度激活，从
二、甲状腺功能减退
• 甲减为甲状腺激素分泌不足引起的代谢性疾病。 临床上分为原发性甲减，又称魏甲状腺性甲减； 以及继发性甲减，又称垂体-下丘脑甲减两类。血 循环中甲状腺激素浓度的测定在诊断甲减方面， TSH和FT3、FT4是灵敏的诊断指标，明显优于总甲 状腺激素，如TT3、TT4等。其价值依次为TSH= FT4>TT4>FT3>TT3.
化学发光反应存在于生物体(萤火虫、海洋发光生物)中 ，称生物发光(bioluminescence)。
生物发光的本质是化学发光
生物体化学发光现象的研究起源于古代，但 是，直到十九世纪末，这种现象与简单的有机反 应相联系才得到解释。
1877年 洛粉碱CL 1905年 洛粉碱类似物 1928年 鲁米诺 1935年 光泽精
三、低T3和低T3、T4综合征
• 低T3综合征是一种由于非甲状腺疾病 造成的甲状 腺激素异常，其发生与机体的代谢状态，基础疾 病的性质和严重程度以及外来因素，如用药等有 关。代谢状态差、基础病情加重时其发生率随之 增高；当病情好转、机体健康状况趋于正常时， 低T3状态可自行消失。
四、其他与甲状腺疾病有关的免疫 学指标
二、糖尿病的免疫学检测
以下是临床上常见的有关糖代谢紊乱的免疫 分析指标： 1. C肽 2.胰岛素 3.胰岛素抗体 4.谷氨酸脱羧酶抗体（GAD-Ab） 5.胰高血糖素
C肽
C肽测定用于了解II型糖尿病人是否需要胰岛素治疗，如果 C肽水平较低，葡萄糖刺激反应差，则表示表明立即或最 终需要胰岛素治疗，也可用于评价糖尿病酮症酸中毒病人 的胰岛功能。C肽的另一个重要的临床用途是各种低血糖 病因的鉴别。C肽水平升高科见于轻型糖尿病患者，常见 空腹血糖升高不多者C肽大多高于正常。胰岛素瘤患者， 如血中存在胰岛素抗体，血清C肽大都增高。胰腺肿瘤患 者行胰腺切除后，如血清C肽仍可测出，提示手术未能全 部切除胰腺组织。如果手术后一度阴性，后又称为阳性， 提示肿瘤复发或转移。 在肝硬化时，血浆胰岛素有升高趋势，其原因在于肝脏摄 取和降解胰岛素减少；但空腹血糖正常。
• 甲状腺机能的常见评价指标及其临床 意义 1.甲状腺机能亢进 2.甲状腺功能减退 3.低T3和低T3、T4综合征
一、甲状腺机能亢进
1972年提出T3型甲亢的诊断标准： 1.甲亢的症状和体征，常无突眼征，但心血管症状较明显； 2.血清TT4、FT4值正常； 3.TT3、FT3值升高；
T3型甲亢在临床上并非罕见，特别是缺碘地区患功能自主 性腺瘤的部分患者，或用T3治疗后出现的碘甲亢，目前认 为T3型甲亢不能算作一种独立疾病，因为发现T3型甲亢病 人中有一部分虽然TT3升高但FT3正常或低于正常，因此改 称高T3综合征为妥。 T4型甲亢，即T4毒症患者血清T3、FT3浓度正常；而T4、 FT4浓度升高。TSH值为正常低值或低于正常，并伴甲亢临 床症状。
• 抗甲状腺球蛋白抗体（TGAb） 多见于桥本氏甲状腺炎、自身免疫性甲状腺 疾病、原发性甲状腺功能减退、甲状腺功 能亢进患者等。
• 抗甲状腺微粒体抗体（TMAb） 多见于桥本氏甲状腺炎、自身免疫性甲状腺 疾病、原发性甲状腺功能亢进、原发性甲 状腺功能减退。
小结
• 综上所述，若对甲状腺功能 指标进行全面 评价，则上述各项指标对甲亢的诊断价值 依次为FT3>FT4>TT3>TT4；各项指标对甲减 的诊断价值依次为FT4=TSH>TT4>FT3>TT3
主要内容
• 化学发光基本原理 • 化学发光的分类 • 化学发光法的临床应用 • 化学发光免疫测定的特点
Part I. 化学发光基本原理
一、化学发光原理：伴随化学反应的光发射现象
某些物质在进行化学反应过程中，由于吸收了反应产生 的化学能而被激发，从激发态返回基态时，发射出一定波长 的光，这种吸收化学能使分子发光的过程称为化学发光 (chemiluminescence) 。
发现许多有机反应可产生CL
二、化学发光反应发生的条件
能量，通道，荧光物质
化学反应是放热反应。 必须存在形成电子激发态的通道。
激发态分子必须以辐射光子的形式回到
基态, 或将能量传递给荧光分子。
北京源德化学发光分析仪
MAGLUMI 化学发光分析仪
Part Ⅱ.化学发光的分类
• 按化学反应类型可分为：酶促化学发光和 非酶促化学发光两类