微生物基础知识及无菌操作

⑵ 火焰灭菌法：接种环、金属器械等耐燃烧物品。
⑶ 干热灭菌法：温度160-170℃，时间2小时。 ⑷ 高压蒸汽灭菌法：温度121℃，15min; 121℃，
30min或116℃，40min; （普通培养基、生理盐 水、耐热药品、玻璃制品、金属器材等）。
⑸ 紫外线：细菌检验室常用低压水银石英研制的紫 外线照射灯作为室内空气消毒
微生物基础知识及无菌操作
•
目录
• 一、微生物概论 • 二、微生物的类群和形态结构 • 三、微生物的污染源及其污染途径 • 四、药品变质与微生物 • 五、消毒与灭菌 • 六、药品的卫生学评价 • 七、无菌操作
•
一、微生物概论
• 微生物（microorganism, microbe）是一类个体 微小、结构简单，肉眼不可见或看不清楚的微小 生物的统称。
• 衣着：洁净室内当工作人员穿无菌服时，静止时的发菌量 为10～300个/(min·人)，躯体一般活动时的发菌量为150 ～1000个(min·人)，快步行走时的发菌量为900～2500个 (min·人)
• 化妆品和珠宝手饰：发胶、气雾除臭剂、眼脸膏、香粉等 ，为微生物污染提供了极好的源泉。耳环、戒指、项链、 手链等首饰，因为它们难于清洗，所以可能成为感染源或 污染源。
•酵母菌的细胞形态
•
三、微生物的污染源及其污染途径
• 微生物污染：因微生物产生、附着而给特 定的环境带来的不良影响。 如果细菌得到 了必要的养料、一定量的水份和合适的温 度，它们就能迅速繁殖，它们繁殖的速度 快得惊人。通常一个细菌在仅仅2小时后可 产生出281兆(百万)个的细菌。
•
传播污染的四大媒介
• 水用于生产中，还用于设施、设备清洗中 。
• 措施：用经过处理的水进行药品生产
•• 表面—包括：天花板、源自壁、地面、设备 、容器、工具或桌子；表面的尘埃微粒和 微生物由空气传播的回降而受到污染。
• 请记住：一个表面看起来很干净，而实际上已经被千百万 个微生物所污染，除非已经做了正确的消毒灭菌。
• 措施：消毒灭菌（常用方法喷洒化学消毒 剂、紫外线照射）
空气、水、表面、人
• 空气—每立方米的空气中至少含有60万颗 尘粒，同时还存在着大量的微生物，在这 样的空气条件下进行生产，肯定会污染药 品。
• 措施： 1、对空气采取过滤-建立密闭厂房和空气净 化系统
2、对空气消毒
•
• 水—微生物在纯水中是不能生长的。但是 ，所有的各类水，不管怎样仔细地蒸溜或 过滤，总会含有一定量的可溶性有机物和 盐类。正是这些可溶性的物质可被微生物 利用作为它们生长的养料源泉。
• 生产过程中的人为差错：当员工没有按照SOP进行工作时
•
五勤
培养药品生产人员良好的个人卫生习惯，做 到 “五勤”
• 勤洗澡 • 勤理发 • 勤刮胡须 • 勤修剪指甲 • 勤换衣服
•
四、药品变质与微生物
• 营养丰富 • 微生物代谢产物 • 金属离子促进微生物生长 微生物污染的结果：
药品变质； 服用了染致病菌的药物患病（例如：可能污染
•非细胞生物 •细胞生物
•微生物的分 类
•
微生物的分类
•病毒、类病毒和朊病毒等。
•原核类的细菌、放线菌、支 原体、立克次氏体、衣原体和 蓝细菌（过去称蓝藻或蓝绿藻 ） •真核类的真菌（酵母菌和 霉菌）、原生动物和显微藻 类
•
二、微生物的类群和形态结构
• 细菌（例：金黄色葡萄球菌、大肠 杆菌、沙门氏菌等）；
•构成霉菌营养体的基本单位是菌丝。
•根据菌丝中是否存在隔膜，可把霉菌菌丝分成两种类型
•霉菌的菌丝 上：无隔膜菌丝； 下：有隔膜菌丝
•吸器
•
•霉菌菌丝的变态
•假根
•菌网和菌环
• a.菌环；b.简单菌网；c.复杂菌网
•
酵母菌是单细胞真核微生物。酵母菌细胞的形态通
常有球形、卵圆形、腊肠形、椭圆形、柠檬形或藕 节形等。比细菌的单细胞个体要大得多，一般为 1~5微米′5~30微米。酵母菌无鞭毛，不能游动。
•
• 人—人体是一个永不休止的污染媒介 。
• 人的头发和皮肤：每分钟从人类皮肤中要散发出约10,000 个微生物
• 嘴巴和鼻子——水滴：呼吸、咳嗽和喷嚏将产生出大量水 滴，这种水滴既含有尘粒污染也含有微生物污染。咳嗽一 次的发菌量为70～700个(min·人)，喷嚏一次的发菌量为 4000～60000个(min·人).
大肠杆菌、沙门菌等致病菌的制剂会导致肠道传染病的发生
和流行）； 产生内毒素、热原质（肌体发热，腹泻，出血性 休克或其他组织损伤）
•
五、消毒与灭菌
1、灭菌（Sterilization) →杀灭物体中所有微生物（ 包括病原微生物和非病原微生物）的繁殖体和芽 胞的方法。
2、消毒(Pisinfection) →杀死病原微生物的方法。具 有消毒作用的物质叫做消毒剂。一般消毒剂在常 用浓度下，只对细菌的繁殖体有效，对于细菌芽 胞是无杀灭作用的。
• 微生物的特点： 个体微小，结构简单:细胞大小以微米和纳米计量 。 种类繁多、分布广泛：一克沃土中含菌量高达几 亿甚至几十亿 生长繁殖快，代谢能力强：大肠杆菌（ Escherichia coli）在适宜的条件下，每20分钟即 繁殖一代，24小时即可繁殖72代。 遗传稳定性差，容易发生变异：自发突变频率为 10-6左右
3、无菌(Aspsis) →没有活的微生物存在的意思。 防止微生物进入机体或物体的方法叫无菌技术或 无菌操作。
•
常用的除菌方法
• 物理灭菌法→火焚、火焰灭菌法、干热灭 菌法、高压蒸汽灭菌法、紫外线
• 化学灭菌法→用化学药物进行灭菌的方法 。
• 机械除菌法→过滤除菌等。
•
物理灭菌法
⑴ 火焚：被污染的纸张等无经济价值的物品可烧掉 。
• 霉菌（毛霉属、根霉属、曲霉属、 青霉属等）；
• 酵母菌（酵母属、假丝酵母属等） ；
•
• 细菌是一类细胞细而短（细胞直径约0.5μm,0.5-5μm）、结构
简单、细胞壁坚韧以二等分裂方式繁殖和水生性较强的原核微生
物，分布广泛。
•
霉菌是丝状真菌的俗称，意即"发霉的真菌"，它们往
往能形成分枝繁茂的菌丝体，但又不象蘑菇那样产生 大型的子实体。在潮湿温暖的地方，很多物品上长出 一些肉眼可见的绒毛状、絮状或蛛网状的菌落，那就 是霉菌。