白蛋白溴甲酚绿法作业指导书
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白蛋白(澳甲酚绿法)作业指导书
1概述
白蛋白是肝脏合成的,因此血清白蛋白浓度可以反映肝脏的功能,同时血清白蛋白水平的改变能导致一系列的病理性继发症,因此,测定血清白蛋白常用于病人状态的非特异监视。
病理性降低:
(1)蛋白质丢失,常见于大量岀血或严重烧伤和肾脏疾病。
(2)合成障碍,肝脏功能异常。
(3)营养不良或吸收不良。空腹12小时取静脉血⑴。
2标本的收集
新鲜无溶血标本,血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时,采集静脉3ml,待凝固后(最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟)通常为加抗凝剂的血液在30・60分钟凝血析岀血清。3000r/min离心5・10分钟,分离出血清备用。不建议采用血浆标本。
3:方法原理
本法以澳甲酚绿染料为最常用,即采用漠甲酚绿染料,在ph 为
4.0-4.2条件下,白蛋白与澳甲酚绿结合成蓝绿色化合物,反应生成的蓝绿色化合物与样本中白蛋白的浓度成正比,通过测定580-630nm处吸光度值的变化,即可计算出样本中白蛋白的浓度。
4剂来源,配置及储存
试剂来源:迪瑞
试剂配置:试剂一和试剂二均为液体试剂,可直接使用。启用后在2・8度可稳定30天。若试剂混浊,或以蒸镭水为空白在6300nm处的光吸收值低于0.2A,应予丢弃。
试剂储存:试剂避光储存2・8摄氏度可稳定至标签所示失效期。
5分析仪器
CS-600B全自动生化分析仪
分析参数:样品量2 u/1试剂量:300 u/1
测光点15 测定模式:1点终点法正反应
分析波长:600nm/700nm(主波长/副波长)
6计算方法
白蛋白浓度(g/L)=样本管吸光度X校准液浓度(g/L)
校正管吸光度
7线性范围:本实验的线性范围:0…60g/L
8参考范围
成人37—53g/L
9失控控理
1:立即重测同一质控品,如重测后结果仍不再允许范围,请进行下一步。
2:新开一瓶质控品,重测失控项目,如新开的质控血清结果正常,那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质,如结果仍不再允许范围,则进行下一步。
3:进行仪器维护,重测失控项目。检查仪器状态,查明光源是否更换,比色杯是否需要清洗或更换?对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂,此时可更换试剂己查明原因。如果结果仍不再允许范围内,则进行下一步。
4:重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器,排除校准液的原因。
5:请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果,那可能是仪器或试剂已查明原因,只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。
10注意事项
1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。
2:如测试结果超出线性范围,样本应稀释后测试,调整因子数或将结果乘以稀释倍数。
3:结果的准确性仪器校正和测定温度,时间的控制。
4:若试剂混浊或以水为空白在630nm处吸光度值大于0.2A时,则不能使用。
5:由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。
11:临床意义
肝脏是合成血清蛋白质最重要的器官.血清中的白蛋白,球蛋白,以及其它参与凝血的物质,均由肝细胞合成•当肝脏病变时, 合成各种蛋白质的能力降低,体内的蛋白质发生了数量上的改变•其主要的表现,体现在白蛋白的下降,和球蛋白的增多. 临床上通过检测血清蛋白质,借以了解肝脏或肾脏的情况.
总蛋白的数量随着白蛋白或球蛋白的增减而变化.
白蛋白减低:见于慢性肝炎,肝硬化,营养不良,肾病综合征,结核病,甲亢,大失血,恶性肿瘤.
白蛋白的增高没有特殊的临床意义.
球蛋白如果增高,并与白蛋白的比值出现倒置的
现
象.