提取类论文

毕业论文（设计）

题目绞股蓝皂甙的提取研究指导老师

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2008 年 6 月 2 日

摘要

本文主要研究绞股蓝皂甙的提取工艺，采用单因素法及正交设计法，以绞股蓝皂甙提取量为参考指标，对影响绞股蓝皂甙提取工艺的因素进行优选，结果表明，绞股蓝皂甙的最佳提取工艺为：浸提温度为100℃，浸提时间为1.5h～2.0h，浸提溶剂量为50倍。

关键词：绞股蓝皂甙；提取工艺；单因素法；正交设计

目录

引言 (4)

1材料与方法 (4)

1.1实验材料 (4)

1.2实验试剂 (5)

1.3实验仪器 (5)

1.4绞股蓝皂甙的提取研究 (5)

1.5绞股蓝皂甙含量的测定 (5)

1.5.1预处理 (5)

1.5.2样品液的配制 (5)

1.5.3标准液的配制 (6)

1.5.4结果计算 (6)

1.6 实验分析方法 (6)

1.6.1. 单因素法 (6)

1.6.2. 正交设计法 (7)

2结果 (7)

2.1单因素法分析对绞股蓝皂甙得率的影响 (7)

2.1.1浸提时间对绞股蓝皂甙得率的影响 (7)

2.1.2浸提温度对绞股蓝皂甙得率的影响 (8)

2.1.3浸提溶剂量对绞股蓝皂甙得率的影响 (8)

2.2正交设计法分析绞股蓝皂甙的最适提取条件 (9)

3 讨论 (10)

3.1绞股蓝干样与鲜样的选择 (10)

3.2标准品的选择 (10)

3.3最大波长的选择 (10)

3.4净化方法的选择 (10)

3.5绞股蓝皂甙提取温度的选择....................................... (10)

3.6 绞股蓝皂甙提取时间的选择....................................... (10)

4结论 (11)

5参考文献 (12)

引言

绞股蓝(Oynostemma pentaphyllum(Thunb)makino) 系葫芦科绞股蓝属多年生草本植物，绞股蓝在长江以南的地区均有分布，野生资源丰富。它的医疗和保健价值已有研究报道。在临床上除普遍用作防癌药物外，对白细胞减少症、高血脂症及胃溃疡、肝炎等均有确切疗效。系统药理学和临床试验也证明：绞股蓝中含有独特的生物活性物质，其主要有效成分为人参皂甙、黄酮类物质、多糖以及多种氨基酸和微量元素[1]。因此，已有以绞股蓝为原料研制各种保健品的报道。有些产品(如饮料、医药品和食品添加剂等)需要先浸提。绞股蓝总皂苷片作为药品已经上市多年，用于高脂血症，见有心悸气短、胸闷肢麻、眩晕头痛、健忘耳鸣、自汗乏力或脘腹胀满等心脾气虚、痰阻血瘀者。所以绞股蓝皂甙，可以有效的调节儿童生理机能、增强肌体免疫力、清除激素类药物副作用、抗癌、抗疲劳、抗缺氧、抗热、抗衰老、促进细胞新陈代谢，强壮补矗等作用。对大脑中枢有良好的镇静、兴奋双向调节作用及白嫩肌肤等功能．且无毒副作用，无三致作用，是目前医药及保健品行业大量需要的原料[2-4]。

为了最大限度提取并保持绞股蓝的有效成分，保证绞股蓝药材资源的充分利用，提高经济效益，本文以绞股蓝为材料，设置浸提温度、浸提时间、浸提溶剂量3个因素，采用单因素法和正交实验设计，研究提取绞股蓝皂甙保健成分的最佳浸提条件，从而使绞股蓝的有效成分能得到充分利用。此工艺提取物质质量好，生产成本低，提取速度快，其中所含的保健因子适合应用于各类保健品中[5,6]。

1 材料与方法

1.1实验材料

绞股蓝，浙江缙云

1.2实验试剂

香兰素冰醋酸溶液：称取5g香兰素，加冰已酸溶解并定溶至100ml

高氯酸：分析纯天津市鑫源化工厂20060902

人参皂甙Re粉：中国药品生物制品检定所

PT大孔树脂：南开大学试剂厂

人参皂甙Re标准溶液：精确称取人参皂甙Re标准品0.020g，用甲醇溶解并定容至10.0 ml：即每毫升含人参皂甙Re2.0m g

冰醋酸：分析纯国药集团化学试剂有限公司20070911

1.3实验仪器

双联打浆机,型号MDJ

真空浸提灌,型号SLG-500

电热鼓风干燥箱, 型号DGF-5AB

20目细度的滤布,

夹层锅, 型号100L

恒温水浴锅，浙江海宁新华医疗器械厂，型号HHS-2

大孔树脂预柱，江苏省江阴第二医疗器械厂，型号DT

微量进样管，宁波市镇海玻璃仪器厂

电子天平，余姚市金诺天平仪器有限公司，型号JT

721分光光度计，上海精密科学仪器有限公司，型号16C14

1.4绞股蓝皂甙的提取

称取1g绞股蓝样品→放入高型烧杯→加入50ml水→盖上表面皿→温度控制在100℃→提取过程中每 5 min搅拌1次→水提1.5h左右→浸提后用滤纸过滤定容至100 ml。

1.5绞股蓝皂甙含量的测定步骤

1.5.1预处理

用25ml纯化水洗柱，洗液弃去（水洗）→ 用25ml70％的酒精洗柱，洗液弃去（酒精洗）→再用25ml纯化水洗柱，洗液弃去（再水洗）

1.5.2样品液的配制

用1ml移液管移取1ml样品入柱→用25ml纯化水洗柱，洗液弃去→用

25ml70％的酒精洗柱，接收洗液（可用25ml容量瓶，也可用蒸发皿直接接收）→60℃水浴挥干（注：水温不高于70℃）→加入0.2ml5％的香兰素冰醋酸溶液（用1ml吸管吸）→加0.8ml高氯酸（分两次加，洗涤蒸发皿）→60℃水浴→10min 迅速冷却→加5ml冰醋酸，混匀，倒进10ml的比色皿中，比色，波长560nm，与标准管一起比色测定

1.5.3标准液的配制

精密称取人参皂苷Re标准溶液（2.0mg/ml）50ul放入具塞试管中→加入新配置的0.2ml5％的香兰素冰醋酸溶液（用1ml吸管吸）→加0.8ml高氯酸（分两次加，洗涤蒸发皿）→60℃水浴，10min迅速冷却→加5ml冰醋酸，摇匀，作为供试品溶液→另取15 ml具塞试管中→加入新配置的0.2ml5％的香兰素冰醋酸溶液（用1ml吸管吸）→加0.8ml高氯酸（分两次加，洗涤蒸发皿）→60℃水浴，10min迅速冷却→加5ml冰醋酸，摇匀，作为空白溶液→取供试品溶液和空白溶液，在560 nm的波长处分别测定吸收度。

1.5.4结果计算

X= A1

×C÷V ×100 × 1 A2m 1000 1000

X----试样中总皂甙量,g/100g

A1----测液的吸光度值

A2----标准液的吸光度值

C----标准管人参皂甙Re的量,ug

V----试样稀释体积ml

m----试样质量

1.6 实验分析方法

1.6.1. 单因素法

根据初步试验结果，选用三个单因素，分别为浸提温度，浸提时间，浸提溶剂量，并且每因素选择3个水平进行试验，以绞股蓝皂甙得率为考察指标进行优选。

1.6.

2. 正交设计法