痰检实验室督导程序

昆明市疾病预防控制中心痰检实验室督导程序

1．目的

结核病细菌学检查是国家结核病防治规划的重要组成部分，为了进一步加强对区县结核病细菌学实验室质量控制的督导工作，制定本程序。

2. 依据

《中国结核病防治规划实施工作指南》、中国结核病防治规划《痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册》

3．适用范围

适用于微生物检验科每季度对区县结核病细菌学实验室进行督导工作的工作人员。

4．职责

4.1 进行督导工作的工作人员须认真执行该程序

4.2 监督人员负责规程执行情况的检查和监督。

5.工作程序

5.1 进入实验室后，首先观察实验室的设计是否达到生物安全二级的要求；其次观察实验室是否整洁，实验物品的摆放是否规范，实验室所用设施、设备（生物安全柜、高压灭菌锅、生物显微镜等）和材料（痰盒、抗酸染液等）是否是上级单位配发或符合国家相关的标准和要求。

5.2 查看受检单位结核病细菌学实验室登记本登记是否规范、数据是否齐全（格式见附件1）

5.3 查看受检单位痰涂片镜检室内质量控制登记表是否正确（格式见附件2）；

5.3 查看受检单位所制备痰涂片是否标准（标准见附件3），总量是否准确（与登记本比对）。

5.4 每年至少对受检实验室进行2次现场评价，评价内容见附件4，进行督导时，应核对以前的督导报告和被评估实验室情况，有针对性的进行评价。

5.5 对受检单位进行现场抽片，具体方法见附件5、6、7、8。

5.6 进行盲法复检，具体见附件9、10、11。

5.7 复检结果评价，具体见附件12。

5.8 盲法复检抽片后2周内将最终结果（填写完毕的附件11）反馈至受检实验室，并同时反馈给第一复检者。对盲法复检中出现定性偏差的实验室，在反馈结果的同时，应及时进行现场督导，协助查找原因、解决问题。

5.9 书写督导报告，报告模式见附件13

5.10 督导报告书写完毕后，将所有数据汇总（见附件14、15）连同督导报告发送至云南省疾病预防控制中心结核病防治科。

5.11 将所有督导过程中产生的原始数据及督导报告进行归档处理。

6. 注意事项

6.1 实验室内应保持肃静，不准吸烟、吃东西及用手触摸面部。

6.2 在实验室工作时，应该穿防护服，佩戴口罩和手套等。

6.3 正确使用和维护显微镜。

6.4 连续阅读10～12张图片后，应休息20分钟左右。

6.5工作完成后，应对实验室进行消毒。

附件1 痰涂片检查登记本

年第页

填写格式具体如下：

(1) 实验序号：为实验室流水号，每年从“1”开始，初诊患者的3个标本采用同一实验序号编号；随访患者2个痰标本采用同一实验序号编号。

(2) 痰标本来源：根据患者做痰检查时的情况，选择其中一栏填写。初诊患者填写门诊序号，随访患者填写患者登记号。

(3) 性状：标本性状按照国家实验室质量控制新标准，分为干酪痰（A）、血痰（B）、粘液痰（C）、唾液（D），分别按A、B、C、D分类登记。

(4) 结果：涂片阳性者用红笔记录为“数字+”，如“1+，2+，3+”，300个视野内仅见1～8条抗酸杆菌者填写“条数”；阴性结果填写“阴性”，不能记录为“-”或“(-)”.

(5) 签名：检验人员填写全名。

(6) 备注：填写需要特别说明的事宜，外单位送检标本请注明来源及就诊者相关信息，以便追踪。

附件2 痰涂片镜检室内控制登记表

单位名称：年月

注：至少抽查复检当日10%涂片，填入上表

附件3痰涂片制备

1.新载波片应经95%乙醇脱脂，检查无划痕后方可使用。

2.一张载波片只能涂抹1份痰标本，且只能一次性使用，严禁清洗后重复使用。

3.推荐使用一端有磨砂面的玻片。

4.用2B铅笔在玻片磨砂面上注明实验序号及标本序号，若使用无磨砂面的玻

片，则须使用玻璃刻刀在玻片一端的1/3处进行标注。

5.将约0.05ml痰标本，在玻片正面右侧2/3的中央处均匀涂抹面积为

10mm×20mm的卵圆形痰膜。

6.将已干燥的痰标本玻片放置在报纸上，若透过痰膜不能分辨报纸上的5号字，

则表明该涂片涂抹过厚。

附件4 结核病实验室痰涂片镜检督导清单

实验室准入制度（）生物危害警示标识（）

实验室消毒制度（）实验室废弃物处理制度及流程（）

5-2 染色剂（请在相应的括号中划“√”）

备注：

5-5 哪些耗材缺乏或质量不好

选择3张近期阳性涂片和2张保存1～2个月的阳性涂片。先让实验员操作显微镜寻找抗酸菌，观察实验员操作，填写5-6、5-7。

7 实验室质量保证

7-1 有无室内质量控制记录

有无频度

8 实验员对实验室工作的意见与建议

被督导单位负责人签名：

现场评估人签名：

日期：

附件5 样本量计算表

说明：

(1)涂片阳性率：指所有检测涂片中阳性涂片的比例。

(2)上一年阴性涂片总数：每年涂片总数减去全年阳性涂片数。

(3)抽样时，当上一年阴性涂片数量和涂片阳性率不在选择点，阴性涂片数值采用区间

上限，涂片阳性率采用区间下限，也就是采取偏大的样本量。

(4)涂片阳性率＜5%按5%计算，＞18%按18%计算。

附件6 现场抽样方法

(1)确定年抽片量：现场抽片时，首先核实被评估实验室“上一年阴性涂片数”

和“涂片阳性率”，根据样本量表（附件5）确定该年内应复检的涂片总量。