胰蛋白酶(原)

胰蛋白酶

胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 为蛋白酶的一种，EC3.4.21.4。在脊椎动物中，作为消化酶而起作用。在胰脏是作为酶的前体胰蛋白酶原而被合成的。作为胰液的成分而分泌，受肠激酶，或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶，是肽链内切酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。它不仅起消化酶的作用，而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体，起活化作用。是特异性最强的蛋白酶，在决定蛋白质的氨基酸排列中，它成为不可缺少的工具。 1介绍

中文名称

:

胰蛋白酶

中文同义词:

胰蛋白酶;胰蛋白酶1：250（猪胰脏）;胰蛋白酶1：300（猪胰脏）;胰淀粉酶;胰液酵素;胰酶-E 酶1:250;蛋白酶类 英文名称:

Trypsin 英文同义词:

TRYPSIN;TRYPSIN, 1-250;TRYPSIN, 1-300;TRYPSIN-EDTA;TRYPSIN, HUMAN PAN

PORCINE;TRYPSIN, PORCINE PANCREAS;ec3.4.4.4 CAS 号:

9002-07-7 分子式:

C6H15O12P3 分子量:

≈24000 EINECS 号: 232-650-8 牛的胰蛋白酶氨基酸残基223个，分子量23800[1]，活性部位的丝氨酸残基是不可缺少的丝氨酸蛋白酶。除存在于脊椎动物外，还存在于蚕、海盘车、蝲姑、放线菌等范围广泛的生物体中。另外与高等动物的血液凝固和炎

胰蛋白酶降解物分析

症等有关的凝血酶、纤溶酶、舒血管素等蛋白酶在化学结构和特异性等方面与胰蛋白酶具有密切的关系，可以认为这些酶是从共同的祖先酶在进化过程中分化而来的。胰糜蛋白酶与弹

性蛋白酶在结构和催化机制方面也具有密切关系，但其特异性则完全不同。

胰蛋白酶原的激活过程

胰蛋白酶系自牛、羊或猪胰中提取的一种蛋白水解酶。中国药品标准规定按干燥品计算，每1mg 的效价不得少于2500单位。由牛、羊、猪胰脏提取而得的一种肽链内切酶，只断裂赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键。白色或米黄色结晶性粉末。溶于水，不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚。分子量24 000，pI 10.5，最适pH值7.8～8.5左右。pH>9.0不可逆失活。Ca2+对酶活性有稳定作用；重金属离子、有机磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制剂对其活性有强烈抑制。临床用于抗炎消肿，工业上用于皮革制造、生丝处理、食品加工等。

2作用与用途

本品为蛋白质水解酶，能选择地水解蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链，能消化溶解变性蛋质，对未变性的蛋白质无作用，因此，能使脓、痰液、血凝块等分解、变稀，易于引流排除，加速创面净化，促进肉芽组织新生，此外还有抗炎症作用。临床上用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤、瘘管等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等。喷雾吸入，用于呼吸道疾病。也可用于治疗毒蛇咬伤。还常用于动物细胞培养前对组织的处理。

剂量与用法

肌内注射，1 000～2 000U或5 000U用生理盐水或注射用水溶解，1次/日。治毒蛇咬伤，取本品2 000U，1～3支，加0.25%～0.5%盐酸普鲁卡因液(或注射用水)4ml～20ml溶解，以牙痕为中心，在伤口周围作浸润注射。或在肿胀部位上方作环形封闭1～2次，如病情需要可重复使用。

副作用

1 寒战、发热、头痛、头晕、胸痛及腹痛、腹泻等。

2 不可用于急性炎症及出血空腔中。

3 肝、肾损伤、血凝异常和有出血倾向者忌用。

3细胞培养

胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在pH 为8.0 、温度为37℃时，胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+ 、Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+ 、Mg2+ 的BSS ，如：D-Hanks 液。终止消化时，可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。

1. 称取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液浓度为0.25 %，用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水（若用双蒸水需要调PH 到7.2 左右）或PBS （D-hanks ）液中。搅拌混匀，置于4℃内过夜。

2. 用注射滤器抽滤消毒：配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器（0.22 微米微孔滤膜）抽滤除菌。

3. 分装成小瓶于-20℃保存以备使用可！

胰蛋白酶原trypsinogen

胰蛋白酶原trypsinogen 为胰蛋白酶的前体。在胰脏中合成，存在于胰液里，分泌到十二指肠中，通过十二指肠粘膜中的肠激酶的作用，在6位赖氨酸和7位异亮氨酸之间切断。从N 端到第6位置之间的肽链（H-val-Asp4－Lys-OH）切断时便出现活性（如牛）。这种激活作用也可以通过胰蛋白酶的自我催化反应进行。牛胰蛋白酶原氨基酸残基为229，分子量约为2万4千。