土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

[基础全练]

1．土壤中的尿素分解菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成()

A．尿素酶B．脲酶

C．蛋白酶D．肽酶

解析：土壤中的尿素分解菌体内能够产生脲酶，脲酶能够使土壤中的尿素分解为氨。

答案：B

2．用以尿素为唯一氮源加入酚红指示剂的培养基，培养细菌后，指示剂将() A．变蓝色B．变红色

C．变黑色D．变棕色

解析：细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，会使培养基的碱性增强，pH升高，加入酚红指示剂将变红。

答案：B

3．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是()

A．筛选出能分解尿素的细菌

B．对分离的菌种做进一步鉴定

C．作细菌的营养成分

D．如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素

解析：筛选出能分解尿素的细菌用选择培养基即可，不需要加指示剂。加入指示剂的培养基，目的是对分离的菌种做进一步的鉴定。

答案：B

4．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是()

A．未接种的选择培养基

B．未接种的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基

C．接种了的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基

D．接种了的选择培养基

解析：将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此可用接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。本实验的变量是培养基种类，其他方面如接种、培养条件等应相同。

答案：C

5．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是()

A．采用稀释涂布平板法统计的菌落数目往往少于实际的活菌数

B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落

C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数

D．显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法

解析：采用稀释涂布平板法获得的菌落有些可能是由两个或多个细菌形成的，所以统计的菌落数目往往少于实际的活菌数，A正确；当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落，B正确；为了保证结果准确，一般选取菌落数在30～300的平板进行计数，C错误；除平板计数法外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法，D正确。

答案：C

6．用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照实验，对于对照组的要求不包括()

A．对照组培养基也严格灭菌，且不接种任何微生物

B．倒平板时，培养基的用量与实验组必须完全相同

C．所用培养基成分及pH大小与实验组保持一致

D．对照组和实验组均放在相同且适宜的条件下培养

解析：对照组培养基也要严格灭菌，且不接种任何微生物，作为空白对照，A不符合题意；倒平板时，对照组培养基的用量与实验组不一定要完全相同，B符合题意；培养基成分、pH为无关变量，因此对照组所用培养基的成分及pH大小应与实验组保持一致，C不符合题意；对照组和实验组都要置于相同且适宜的条件下培养，D不符合题意。

答案：B

7．某同学对101、102、103倍稀释液计数的平均菌落数分别是2 760、295和16，则菌落总数为(所用稀释液体积为0.1 mL)()

A．2.76×104个/mL

B．2.95×105个/mL

C．4.6×104个/mL

D．3.775×104个/mL

解析：为保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，因此只有295符合要求。其稀度倍数为102，所用稀释液体积为0.1 mL，代入计算公式得菌落总数为2.95×105个/mL。

答案：B

8．土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请据图回答相关问题：

(1)能分解尿素的细菌属于________(填“自养”或“异养”)型微生物，为获得该种细菌，应从富含有机质的土壤表层取土样。

(2)为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用____________________的培养基进行分离，并加入________指示剂进行鉴别。

(3)因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液。取样稀释前，一定要________以减少误差。将稀释103～107倍的稀释液分别吸取0.1 mL加入固体培养基上，用________将菌液铺平，这种接种方法称为____________________________。

(4)将接种的培养皿放置在37 ℃恒温培养箱中培养24～48 h，观察并统计平板上的菌落数，选择菌落数在______之间的平板进行计数。实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理后，才能倒掉。

解析：(1)能分解尿素的细菌需利用现成的有机物，属于异养型微生物。(2)分离

土壤中分解尿素的细菌，应该用以尿素为唯一氮源的培养基进行分离，分解尿素的细菌在分解尿素时产生氨气，使酚红指示剂显红色，所以要加入酚红指示剂进行鉴别。(3)取样稀释前，一定要将菌液摇匀以减少误差；将稀释103～107倍的稀释液分别吸取0.1 mL加入固体培养基上，用稀释涂布平板法将菌液用涂布器涂布到固体培养基上。(4)估算样品中的活菌数时，往往选取菌落数在30到300之间的平板；为防止微生物污染环境和操作者，实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理，而后再倒掉。

答案：(1)异养(2)以尿素为唯一氮源酚红(3)摇匀涂布器稀释涂布平板法(4)30～300灭菌

9．空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：

①配制培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；

②制作无菌平板；

③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；

④将各组平板置于37 ℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题：

(1)该培养基中微生物所需的氮来源于______________。若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是______________。

(2)步骤③中，实验组的操作是_________________________________。

(3)若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了______________现象。若将30(即36－6)个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法__________(填“正确”或“不正确”)。

解析：(1)依据配制培养基的成分可知，该培养基中微生物所需的氮来源于牛肉膏、蛋白胨。因为该实验是“用平板收集教室空气中的微生物”，所使用的培养基应为固体培养基，配制时，需加入凝固剂，据此推知，该培养基中的成分X