氯沙坦钾片的HPLC测定

氯沙坦钾片的H PL C测定

汪正宇

(宿州市药品检验所,安徽宿州234000)

摘要:目的:建立高效液相色谱法测定氯沙坦钾片含量,为质量控制提供有效的分析手段。方法:色谱柱:Phenom enex OD S C18(5Λm、4.6mm×150mm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(55:45);检测波长:230nm。结果:制剂中辅料和有关物质对主药无干扰,氯沙坦钾在浓度100.2～350.8Λg mL范围内线性关系良好,相关系数r=0.9999;平均回收率分别为99.36%、99.68%、99.40%,R SD为0.42%。结论:本法专属性好,准确,简便。

关键词:高效液相色谱法;氯沙坦钾片;质量控制

中图分类号:R927.2　文献标识码:A　文章编号:1008-0104(2007)04-0019-01

氯沙坦钾由美国默克公司(M erck)开发,1994年首先在瑞典上市,如今该品已在欧美日等世界数十个国家和地区上市,是世界各国最为常用的抗高血压药之一。氯沙坦钾是一长效、高效、低毒的新型A T1拮抗剂,对各型高血压均有良好疗效,该品具备沙坦类药物的共同优点[1,2],用药后心血管系统可维持正常调节功能,可保持正常的内环境反射,基本无不良反应,胃肠吸收好,口服方便,1日1次足以维持稳定的降压作用,可与其它药物合并应用加强疗效,病人的耐受性良好。作者未见相关质量标准的报道。在本药研制过程中,为了有效控制氯沙坦钾片在生产及储存中产生的有关物质,本实验经过对色谱条件的摸索和优化,建立了测定氯沙坦钾片含量的高效液相色谱法,使主药和杂质及制剂中辅料能完全分离,方法专属性强,准确,方便。

1　仪器与试药

日本岛津L C-10A tvp型高效液相色谱仪,SPD-10A tvp型紫外检测器。氯沙坦钾对照品及氯沙坦钾片(规格:50m g)均由本所提供,甲醇为色谱纯,其它试剂为分析纯。

2　实验方法

2.1　色谱条件与系统适用性实验

色谱柱:Phenom enex OD S C18(5Λm、4.6mm×150mm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(55:45);检测波长: 230nm;流速:1.0mL m in;进样量:10ΛL。在此条件下,测定氯沙坦钾对照品溶液,记录色谱图,理论塔板数按氯沙坦钾峰计算为8319,与其相邻峰分离度大于1.5。

2.2　对照品溶液的制备

精密称取氯沙坦钾对照品约25m g,置100mL量瓶中,加水20mL超声助溶10m in,加入乙腈稀释至刻度,摇匀,滤过,作为对照品溶液。

2.3　供试品溶液的制备

取本品20片,精密称定,研细,精密称取细粉适量(约相当于氯沙坦钾25m g),置100mL量瓶中,加水20mL超声助溶10m in使氯沙坦钾溶解后,加乙腈稀释至刻度,摇匀,滤过,作为供试品溶液。

3　结果

3.1　线性范围

精密称取氯沙坦钾对照品50m g(实际称量50.12m g),置100mL量瓶中,加水10mL溶解,加乙腈稀释至刻度,摇匀,分别精密量取此溶液2mL、4mL、5mL、6mL、7mL置10mL的量瓶中,加乙腈稀释至刻度,进行线性考察。结果表明在浓度为100.2～350.8Λg mL范围内线性关系良好,回归方程为: A=37381C-50582,r=0.9999。

3.2　方法的精密度

分别精密称取氯沙坦钾对照品适量,加流动相稀释制成250、500、1000Λg mL三浓度,摇匀,分别取10ΛL连续进5次,记录峰面积结果见表1。结果表明,精密度良好。3.3　溶液稳定性试验

取氯沙坦钾片含量测定溶液于0,1,2,4,8h进行试验,记录峰面积,结果氯沙坦钾峰面积的R SD为0.56%。结果表明在含量测定条件下,样品溶液在8h内稳定性良好。

3.4　回收率试验

精密称取氯沙坦钾对照品(约为20、25和30m g),置100mL量瓶中,按处方比例加入空白辅料,混合均匀后,加10mL水超声溶解后,加入乙腈,配制高、中、低3种不同浓度的溶液。分别精密量取10ΛL,注入高效液相色谱仪,记录色谱面积。结果见表2。

表1　H PL C方法精密度(n=5)

浓度X(Λg mL)2505001000 S0658.96992501812569.725

S1657.83392601532567.982

S2657.96392523382566.457

S3660.13792590122568.268

S4658.7292572662567.372

平均658.72492610232567.96 R SD(%)0.140.120.05

表2　回收率测定结果(n=9)

加入量

(m g)

测得量

(m g)

回收率

(%)

平均值

(%)

R SD

(%)

平均R SD

(%)

20.2420.2199.85

20.2420.1299.4199.360.51

20.2420.0098.83

25.3325.1599.29

25.3325.2499.6499.680.410.42

25.3325.35100.1

30.5430.3999.51

30.5430.2198.9299.400.44

30.5430.4799.77

3.5　含量测定

精密量取“2.2”项下的对照品溶液和“2.3”项下的供试品溶液,注入液相色谱仪,按外标法以峰面积计算,结果见表3。

表3　样品测定的结果(n=2)

批号平均含量(%)R SD(%)

20051211101.50.15

20051212100.41.20

20051213101.80.18

4　讨论

4.1　专属性试验

经过专属性研究色谱图可知,空白辅料及空白辅料可能产生的杂质对样品有关物质测定无干扰;氯沙坦钾色谱峰与溶剂峰一致,对样品有关物质测定无干扰;样品高温、光照、强碱、强酸、强氧化破坏样品色谱图与破坏前相比,都产生了许多新杂质且原有杂质明显增大,尤以光照和强碱破坏(图1)所产生的新杂质最多,但主峰与杂质峰都能完全分离。

(下转第20页)

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9

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H E I LON GJ I AN G M ED I C I N E AND PHA RM A CY A ug.2007,V o l.30N o.4