花色苷研究进展_李安文

2010年第12期（总第250期）
吉 林 农 业
JILIN AGRICULTURAL
NO.12，2010
（CumulativetyNO.250）
花色苷是一类具有苯并吡喃结构的类黄酮化合物，具有预防心脏病、抗大脑炎症、抑制癌症、延缓衰老、抑制血小板凝集、抗辐射、清除自由基、抗氧化[1-3]等多种功效，主要用于食品、化妆品、医药保健等行业。

对于花色苷，国内外已经有大量研究，主要有源自葡萄皮、紫甘薯、桑葚、紫甘蓝、越橘等中的花色苷，文章就目前国内外越橘花色苷研究现状进行概述。

1花色苷的稳定性
花色苷极不稳定，pH、温度、光照条件等都对其稳定性影响极大，此外离子强度、存放时间以及添加剂等因素都与其稳定性有极为密切的关系。

石光等[4]研究了蓝莓花色苷的稳定性与pH 关系，认为适量添加柠檬酸、苹果酸、醋酸有利于提高花色苷的稳定性。

R.Lo scalzo[5]等研究紫色花菜和紫甘蓝花色苷稳定性与加热提取处理的关系，发现结构不同的花色苷单体在热处理条件下稳定性存在差异。

Cortes[6]等研究碱液对紫玉米花色苷的稳定性的影响，发现Ca(OH)
2
的浓度对总花色苷的含量有显著影响，而且对花色苷组分比例也存在明显影响。

Veridiana V. De Rosso [7]
等比较研究金虎尾（含较高V
c ）和巴西莓（无V
c
）花色苷的稳定性，
认为抗坏血酸可能对花色苷的稳定性存在一定的影响。

此外氧化
剂（如H
2O
2
）、还原剂、离子强度和离子类型等都能对花色苷的
稳定性产生影响。

2花色苷的提取工艺
国内外在花色苷提取方面已有许多研究[8-13]。

采用何种提取方法，主要与提取目的有关。

一般来说，如果仅仅用于试验研究则可以采用盐酸甲醇法；在生产上，由于甲醇有较大的毒害性，改用盐酸乙醇法较为适合。

单从提高提取效率方面考虑，向提取试剂中加入酶制剂特别是纤维素酶是一种比较好的手段，但是提取过程也会更加复杂而成本也将随之提高。

另外引入的酶制剂可能会造成产品污染，这也将成为考察关注的新问题。

为了避免污染，学者还比较了微波和超声波辅助提取两种效果，认为超声法是一种比较适合提高提取效率的方法。

此外提取产品中的果胶也是一个值得注意的环节，它直接关系到后面纯化工序的效率。

目前对于果胶问题，有人提出了采用超滤法进行，但是超滤膜清洗将又会成为新的课题，会直接导致生产成本的提高。

3花色苷的分离纯化
早期在花色苷分离纯化方面的研究，主要有纸层析、薄层色谱、毛细管电泳等方法，如1997年Bridle等人曾用毛细管电泳法对草莓和接骨木中的花色苷进行过分离。

目前，花色苷的分离纯化主要采用色谱法，较为经典的是柱层析法[14，15]；此外HSCCC方法[16]和制备液相方法也是比较常用的方法，特别是HSCCC具有纯化率高，操作简单实用等优点。

PC、TLC、毛细管电泳等传统方法，从技术上说已经相当成熟了，成本也相对低廉，而且对花色苷某些组分的研究具有很好的指导性，但是这仅限于试验分析而不能应用于实际生产。

目前的柱分离方法，还没有找到一种专一的树脂，所以产品的纯度还不能较大的提高，只能够快速循环的对粗产品进行纯化。

因此探寻新的树脂，将成为下一步研究的新目标，这也是关系到生产上纯化水平的一个关键控制点。

Yunyun Jiang等[17]采用二维制备液相色谱法对射干中的类黄酮进行了分离纯化，不仅溶剂用量大大减少，而且纯化时间显著缩短，这为我们分离复杂的花色苷组分既提供了新的思路。

4花色苷的分析检测方法
4.1花色苷含量的研究
对于花色苷含量的研究，主要有色价法、pH示差法、RP-HPLC等方法。

色价法方便快捷，不需要标样就能够直观对总花色苷含量定性分析。

pH示差法具有准确度高的特点，Jungmin lee[18]等运用HPLC和pH示差法测量七种果汁花色含量，得出两种方法数据（同一标样）呈高度相关的结论，认为pH示差法是一种经济、准确的检测方法。

目前国内外主要采用此方法。

孟凡丽（2003）比较了中式越橘总花色苷的含量，徐璐、郑建仙（2005）也曾测过欧洲越橘（Vaccinium myrtillus L.）中花色苷含量，Marja P Kahkonen等人[19]采用HPLC测得bilberry、blackcurrant 、cowberry总花色苷含量分别为6000、2360、680mg/kg。

由于不同品种的越橘组分存在较大的差异，而采用不同的标样，所得总量也会发生变化，比如，采用锦葵色素葡萄糖苷就要比矢车菊色素葡萄苷所得值要高。

因此，在对总量测定时，最好依据越橘花色苷指纹图谱选择合适标样进行测定。

当前国内外对该资源指纹图谱研究还相当少，而这一步恰恰是此资源开发的关键，因而对不同品种越橘花色苷指纹图谱也将成为将来开发研究的重点，这也对组分研究提出了更高的要求。

4.2花色苷分子组分研究
在研究花色苷组分这方面，采用较多的主要是色谱法，包括传统的PC、TLC、毛细管电泳。

为了更准确、快速确定花色苷组分，现代仪器中引入了HPLC和HPLC/ESI-MS联用技术，结合波谱和光谱性质综合分析，这大大的提高了人类对花色苷性质的认识深度。

Severine Talavera[20]等用HPLC分析，测得欧洲越橘花色苷15种组分。

Kaisu Riihinen[21]等对越橘果肉、果皮、叶花色苷组分进行了比较研究。

Marja P Kahkonen等人[19]用HPLC/ESI–MS 技术分析得出blackcurrant的四种糖苷，cowberry的三种单糖苷，
花色苷研究进展
李安文1，廖寅平2，徐小江1，肖文军1*
（1.湖南农业大学园艺园林学院，湖南 长沙 410128；2.柳州市农业技术推广中心，广西 柳州 545001）
摘要：作为一种很好的植物功能成分，越橘花色苷具有抗癌、除自由基等多种特殊功效。

文章主要对越橘花色苷资源开发研究中各种方法进行概述，讨论了目前在其开发过程中还存在的多种问题，为越橘花色苷资源的有效利用提供了参考。

关键词：越橘；花色苷；研究
中图分类号：TS202.3 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2010）-12-0087-2
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bilberry的15种花色苷形式。

HPLC/ESI–MS联用技术的大量引入，使得花色苷分子组分的研究更加深入，但是从很大一部分研究者的研究来看，还仅仅是为了研究某一品种花色苷功能而进行的组分研究，还没从资源利用的角度进行纵向的比较研究，如果在越橘花色苷资源质量控制体系方面有更加实质的进展，将更有利于在我国花色苷资源开发朝着合理化、标准化的路线前进。

5讨论与展望
目前还需要进一步研究完善的工作，主要体现在以下方面：5.1提取方面
虽然超临界CO
2
法、酶解法较传统溶剂法有突破性提高，但
由于酶解法可能引入污染且酶制剂成本过高、超临界CO
2
法成本过高而产量低等原因，都不适合用于工业化生产。

相反溶剂法不仅操作简单快捷，而且由于提取用的溶剂只要控制合理，可以循环使用进行多次大批量生产，更加符合生产现实要求。

如何在高效率、低能耗、安全、产品质量稳定的条件下，用一些好方法对传统方法进行改良，更好地将新科技成果朝生产转化，是一个尚需继续深入研究的课题。

5.2分离纯化方面
分离纯化要么停留在前人常用的经典树脂AB-8、D101上，纯度和效率没有实质性突破，要么仅仅通过高速逆流色谱或制备液相对少量单体的制备，并不能大规模制得高纯度花色苷成品，实现科研和生产的合理衔接。

如何突破这一瓶颈，就需要通过大量基础研究，同时在充分了解树脂性质和花色苷结构的前提下，有针对性对树脂进行改型，同时综合考虑树脂的回收和重复利用等问题改良树脂性能。

5.3检测方面
有学者比较研究了总花色苷含量的测定方法，但是还没有人针对欧美越橘和中国越橘及其组分进行分析和比较。

目前需要做的工作是，制定对生产实际进行直接指导的质量标准体系。

如何通过检测主要花色苷的含量达到对产品质量更直观的进行控制，将具有重大的现实意义。

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作者简介：李安文（1985-），男，湖南华容人，湖南农业大学硕士研究生，研究方向：茶叶功能成分化学。

通讯作者：肖文军，湖南农业大学园艺园林学院植物资源工程系。

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