ELISA法测丙肝抗体假阳性分析

第8卷第17期·总第97期 2010年09月·上半月刊

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ELISA 法测丙肝抗体假阳性分析

杨志栋 和殿峰 河南省濮阳市油田总医院（457001）

摘要：目的 了解使用酶联免疫吸附法检测丙型肝炎抗体的假阳性情况。方法 ELISA 法进行丙肝抗体检测筛选出132例按S/CO 和年龄分组，分别进行比较。结果 S/CO ＜3.8，占总阳性率26.2%；S/CO ≥3.8，占阳性率73.8%；其中50～80占84例（63%），50岁以下占48例（47%），两组存在明显差异（P ≤0.001）。结论 用ELISA 法测丙肝抗体存在假阳性偏高问题，临床诊断只能作为筛查试验，阳性不能完全证明体内存在丙型肝炎病毒感染，需做确证试验才能确诊。

关键词：酶联免疫吸附法；ELISA 法

doi ：10.3969/j.issn.1672-2779.2010.17.193 文章编号：1672-2779（2010）-17-0263-01

酶联免疫吸附试验（Elisa）法检测丙性肝炎抗体是检验科目前常用的检测方法。其操做步骤简单，特异性好，安全广泛应用于临床诊断。现在应用的第三代ELISA 检测试剂的质量，较前两代有了很大提高，但由于影响因素很多，容易引起假阳性反应，现将我院临床标本阳性情况报道如下。 1 对象与方法

1.1 实验对象在我院通过筛查为HCV-AB 阳性标本。共132例，男79例，女53例，年龄0-80岁。

1.2 仪器与试剂 E-STAR 全自动酶免仪，试剂由北京万泰生物药业公司。

1.3 采用SPSS 软件进行检验 2 结果

2.1 将阳性标本按S/CO 值区分1＜S/CO＜

3.8，占47例，S/CO ≥3.8，占85例。

2.2 将阳性标本按年龄组分类50-80占84例（63%），50岁以下占48例（47%），其中新生儿占7例，比较差异有统计学意义（P＜0.001。 3 讨论

抗HCV 是目前临床诊断丙型肝炎的常用指标，主要用于急慢性或既往丙型肝炎病毒感染，我国丙型肝炎感染率仅次于乙型肝炎，患急性丙型肝炎后约有55%-85%的患者可能变成慢性丙型肝炎，丙型肝炎自然转阴率低，治疗效果差，病程迁延，且与肝硬化肝癌显著相关。ELISA 法间接测抗HCV 仍是目前常用手段，但由于存在一定影响因素，会导致抗HCV 出现假阳性，尤其是弱阳性。

抗HCV 出现假阳性的原因是：①类风湿因子（RF）的干扰，RF 可大量存在于类风湿关节炎及患有自身免疫性疾病患者得体内，RF 多为IGG，它有与变性IGG 产生非特异性结合的特点，因此在测定抗HCV 测定中，如血清标本中存在RF，则其可与固相IGG 和酶标IGG 结合，而出现假阳性反应。②高免疫球蛋白血症，抗HCV 间接法加入的酶标抗人IGG，血清中高浓度的非特异性IGG 会致非特异性吸附于固相表面，从而与后加的酶标抗人IGG 结合造成假阳性。③标本中SOD 的干扰。用于包被固相的重组HCV 抗原片段C-100如为酵母菌产生的SOD 融合蛋白，则标本中的SOD 升高可能会造成抗HCV 假阳性结果。④用于固

相包被的HCV 基因工程抗原不纯。尤其容易出现弱阳性［1］

。

据美国文献报道2000年对HCV 抗体筛查弱阳性进行重组免疫试验（RIBA）RIBA 试验的原理是根据HCV 基因序列，将基因C33C 和N55抗原和人工合成C501-1，C100和C22多肽固定在每条条带上，血清中抗HCV 与条带上相应抗原区带结合，通过显色条带以判定阴阳性.其中86-88%为阴性，同时观察到75例ELISA 阳性标本S/CO≥3.8占65例，其中64例重组免疫试验(RIBA)阳性，占98.6%；10例S/CO＜3.8，仅3例RIBA 阳性；

目前美国已经采用了CDC 新准则，只对筛查试验S/CO≥3.8的

样本做RIBA 确证试验，既节约了资金，又提高检验质量， 筛查试验S/CO 值的应用能增加确认试验的价值，提高目前试验

的准确性［2］

。

据国内资料显示ELISA 阳性标本经确认试验，确认率为33.66%，而假阳性率为38.57%；由此可推断我们统计资料中S/CO＜3.8，的阳性标本中存在假阳性结果；尤其是老年人50岁以上组比50岁以下组明显区别，这主要是高龄组由于机体功能衰退体内高免疫球蛋白及类风湿因子等影响因素存在的几率增多导致50岁以上年龄组检测丙肝阳性率明显增高；另我们对统计6例新生儿抗-HCV 弱阳性进行HCV-RNA 检测为阴性，建议定期复查HCV 抗体，后均转为阴性；再者目前第三代丙肝ELISA 试剂皆无灰区设定， S/CO 值较低的结果也报告为阳性，这也是造成假阳性的原因之一；因此在提高抗-HCVELISA 试剂特异性基础上，有条件的单位应为丙肝抗体阳性的患者做HCV-RNA 和RIBA 补充试验，以排除丙肝假阳性。

总之，对于ELISA 法测定丙肝抗体阳性不能简单理解为感染丙肝病毒，而应进行HCV-RNA 和RIBA 试验进行确证，同时与临床紧密结合，进行医学评价，对于弱阳性标本，实验室应进行复检，排除试验操作的影响因素，进而建议患者定期复查。 参考文献

[1] 邢文革,郑怀竞.必须提高丙肝病毒实验室检验结果的可信度[J].中华肝

脏病杂志,2004,12(3):170-171.

[2] 于小洋,辛楠.提高HCV 的检测质量[J].中国医学理论与实践杂志,2006,

16(1):98-100.

（收稿日期：2010-05-09）