广西苦玄参不同药用部位的薄层鉴别与含量测定

第20卷第6期华　夏　医　学V o l 120N o 16
2007年10月
A cta M edicinae Sin ica
O ct 12007
广西苦玄参不同药用部位的薄层鉴别与含量测定
①
陈　君1②
,甄汉深2,韦建华2
(1.柳州医学高等专科学校,广西柳州　545006;2.广西中医学院药学院,广西南宁　530001)
摘要:目的:对苦玄参的根、茎、叶、花进行薄层鉴别和含量测定研究,为进一步的应用研究提供科学依据。

方法:采用薄层层析法对中苦玄参不同部位进行定性鉴别;采用反相高效液相色谱法(R P 2H PL C )对其不同部位进行含量测定。

结果:TL C 鉴别均表明:茎、叶、花的乙酸乙酯∶甲醇(5∶1)提取物的主斑点一致,提示根、茎、叶、花中所含部分成分有可能相同。

含量测定结果显示苦玄参苷 A 在0.0242～0.1694Λg Λl 范围内线性良好。

结论:广西龙州县苦玄参药材中苦玄参苷 A 在根、茎、叶花中的平均含量分别为0%,0.11%,1.63%,1.12%。

关键词:苦玄参;定性鉴别;含量测定
中图分类号:R 92712;R 28215 文献标识码:A 文章编号:100822409(2007)0621179203
I den tif ication and con ten t assay of P icr i a fel -t arrae lour with h igh perfor mance liquid chro m otography CHEN Jun ,ZHEN Han -shen ,W E I J i an -hua ∥L iuzhouM edical School ,L iuzhou 545006,Ch i na
Abstract :O bjective :To assay the contents of roo t ,stem ,leaf and flow er of p icria fel 2tarrae lour w ith h igh perfo r m ance liquid ch romo tography (H PL C ).M ethods :T he different parts of p icria fel 2tarrae lour w ere identified and the contents w ere detected by R P 2H PL C .R esults :T he extracts from roo t ,stem ,leaf and flow er had the sam e m ain spo ts .It sug 2gested that they have the sam e compo siti ons
.In contents assay ,there w as a good linear relati onsh i p at range of 0.0242～0.1694Λg Λl of pacria fel 2tarrae lour .Conclusi on :T he average contents of pacria fe 2tarrae lour in roo t ,stem ,leaf
and flow er are 0%,0.11%,1.63%and 1.12%,respectively .Key words :pacria fe 2te 2tarrae ;identificati on ;content assay
广西道地药材苦玄参(P icria fel 2tarrae L our )为玄参科苦玄参属植物,又名苦草,蛇总管、鱼胆草、苦胆草。

主要分布于广西、广东、贵州及云南等地,印度至菲律宾也有分布[1],在广西民间作为药用已有很长历史。

据文献记载,苦玄参具有抑菌抗炎之功效。

由于苦玄参使用的药用部位为全草,其不同药用部位的比较未见报道,因此,本实验对苦玄参的根、茎、叶、花进行薄层鉴别及含量测定研究,为更好地利用苦玄参植物资源提供参考。

1　仪器与试药
PBQ 2I 型自动薄层铺板器(重庆);A gilent H PL C 1100高
效液相色谱仪。

苦玄参采于广西龙州,经广西中医学院药用植物教研室刘寿养副教授鉴定为玄参科苦玄参属植物苦玄参。

分取根、茎、叶、花四部分粉碎,过二号筛备用。

苦玄参苷 A 对
照品由广西植物研究所成桂仁教授提供,并经鉴定为单体纯品。

薄层层析用硅胶G (200～300目),青岛海洋化工厂;甲醇为优级纯,中国医药集团上海化学试剂公司出品;色谱流动相用乙腈为色谱纯,天津市四友生物医学技术有限公司出品;其余实验试剂均为分析纯;水为超纯水,均经过0.45Λm 微孔滤膜过滤后使用。

2　薄层鉴别
2.1　供试品溶液制备
分别取苦玄参根、茎、叶、花各约1g ,加乙酸乙酯∶甲醇(5∶1)25m l ,超声提取30m in ,滤过,滤液挥干,残渣加甲醇1m l 使溶解即得。

2.2　苦玄参苷 A 对照品溶液制备
取苦玄参苷 A 对照品适量,加甲醇适量使溶解制成浓
・
9711・①②作者简介:陈君(1980-),女,2006年毕业于广西中医学院药学院,现任柳州医学高等专科学校助教。

基金项目:国家中管局项目(04-05Z M 01);广西壮族自治区科学技术厅项目(桂科攻0235022-4);广西壮族自治区教育厅项目[桂教科研
(2003)22号]。

度约(2.51m g m l )溶液。

2.3　薄层层析
照薄层色谱法实验[2],分别取上述各溶液分别点于C M C 2
N a (0.7%)2硅胶G 板上,以氯仿∶甲醇(4∶1)为展开剂,展距
为10c m ,取出晾干,以1%香草醛浓硫酸试液显色,105℃加热
5m in ,茎、叶、花溶液色谱与苦玄参苷)A 对照品溶液色谱相应
位置上显一个相同的紫色斑点(见图1)。

图1　苦玄参不同部位TL C 图
1.根;
2.茎;
3.叶;
4.花;
5.对照品
3　含量测定
3.1　色谱条件
L ich ro spherC 18,色谱柱(4.6mm ×250mm ,5Λm );流动
相:乙腈20.5%冰醋酸(36∶64);检测波长:264nm ;流速:流速
1m l m in [3]。

3.2　供试品溶液制备
分别取苦玄参药根、茎约1g ,花、叶约0.5g ,精密称定后置于100m l 锥形瓶中,加入25m l 75%甲醇浸泡10m in ,称定重量,超声30m in ,称定重量,摇匀,补足减失的重量。

取该样品溶液
1m l 于微型离心管,以10000r m in 速度离心10m in ,取上清液
进样H PL C 分析。

3.3　苦玄参苷 A 对照品溶液制备
精密称取苦玄参苷 A 12.10m g 置50m l 容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得浓度为0.242m g m l 的对照品溶液。

3.4　苦玄参苷 A 标准曲线制备
精密吸取上述苦玄参苷 A 对照品溶液1,2,3,4,5,6,
7m l ,分别定容于10m l 量瓶中,精密吸取10Λl ,注入高效液相色
谱仪,按上述色谱条件测定峰面积(见图2),以峰面积积分值
为纵坐标,苦玄参苷 A 浓度为横坐标,绘制标准曲线(见图
3),得到方程A =8111.72929×Am t -3.4766006,r =0199994,线性范围0.0242～0.1694Λg Λ
l
图2　苦玄参苷 A 的H PL C
色谱图
图3　苦玄参苷 A 的标准工作曲线图
3.5　精密度试验
取同一供试品溶液,连续进样5次,计算得到苦玄参苷 A
峰面积的R SD =0.83%
3.6　稳定性试验
取同一份供试品溶液,于配制后0,2,4,6,8,12h 依法测定苦玄参苷 A 峰面积的R SD =1.16%(n =6),说明样品在12h 内稳定。

3.7　重现性实验
取5份苦玄参叶,每份约0.5g ,精密称定,依照3.2样品溶液制备项下提取,分别进样10Λl ,测定苦玄参的含量,R SD =
2134%。

・
0811・第6期 华　夏　医　学 第20卷
3.8　加样回收率实验
取已知苦玄参苷 A 含量的样品适量,精密加入一定量苦玄参苷 A 标准品,按照“供试品溶液制备”项下条件制备待测溶液,同法测定,计算回收率,结果见表1。

表1　加样回收率(n =6)
样品原含量(m g )
加入量(m g )加样后测定值(m g )
回收率
(%)R SD (%)11.1381.1202.21097.8621.0641.1202.234102.331.1441.1202.23098.511.83
41.1061.1202.257101.451.0271.1202.11298.386
1.164
1.120
2.262
99.02
3.9　样品测定
分别取梧州苦玄参根、茎、叶、花样品适量,精密称定,按
3.2方法制备成样品溶液,进样,结果见表2。

表2　苦玄参苷 A 含量结果(n =3)
样品含量(%)
第1次
第2次
第3次
平均含量
(%)R SD (%)根-----茎0.10550.10730.10430.10571.43叶1.62831.62521.64061.63060.50花
1.1302
1.1279
1.1147
1.1174
0.74
4　讨论
4.1　植物各器官中的成分及成分的含量是有差别的。

苦玄参
叶中含有较多的叶绿素,用甲醇提取的提取液有较多的色素杂质,所展的斑点拖尾严重;用石油醚或氯仿提走色素杂质后再用甲醇提取,所得效果不理想;用乙酸乙酯提取,叶的提取液色素减少,斑点清晰,但根、茎的成分较少,用乙酸乙酯很难提取
出其成分。

因此,选用乙酸乙酯∶甲醇(5∶1)提取。

所得的苦玄参各部位提取液点样,用氯仿∶甲醇∶(4∶1)展开,展开效果比较理想,所得斑点较清晰集中,拖尾现象不明显。

结果,茎、叶、花溶液色谱与苦玄参苷)A 对照品溶液色谱相应位置上显一个相同的紫色斑点。

提示茎、叶、花中均含有苦玄参苷)A 。

4.2　苦玄参药用部位为全草但不同部位含量测定显示,苦玄
参部位中苦玄参苷 A 的含量差异较大,苦玄参叶>花>茎>根,苦玄参叶的含量最高。

中草药含量的差异与药用部位、药物产地、采收季节等因素有关。

但本实验中样品品种单一,因此,在今后的研究中,可对其他不同产地及季节的苦玄参不同部位的玄参苷 A 进行比较,确定其有效部位。

参考文献:
[1]广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准[M ].南宁:广西科学技
术出版社,1992:225.
[2]蒋明廉.苦玄参中苦玄参甙)A 的含量测定[J ].桂林医学院学报,
1997,10(6):69.
[3]邹节明,吴敏菊,王力生.苦玄参H PL C 指纹图谱研究[J ].中国药
学杂志,2005,40(9):6642666.
(收稿日期:2007-02-15)[责任编辑　王慧瑾　高莉丽]
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目的(O bjective )　简要说明研究的目的及提出问题的缘由,表明研究的范围和重要性。

方法(M ethods )　简要说明研究课题的基本设计,使用了什么材料和方法,如何分组对照,研究范围及精确程度,数据是如何取得的,经何种统计学方法处理。

结果(R esults )　简要列出研究的主要结果和数据,有什么新发现,说明其价值及局限。

叙述要具体、准确,并给出结果的置信值、统计学显著性检验的确切值。

结论(Conclusi on )　简要说明经验证、论证取得的正确观点及其理论价值或应用价值,是否可推荐或推广等。

(本刊杂志社)
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1811・第6期 陈　君等:广西苦玄参不同药用部位的薄层鉴别与含量测定 第20卷。