毛细管电泳电化学检测含乳饮料中游离的甘氨酸

Ｄｅ ｅ ｍ ｉ ａ ｉｎ ｏ ｌｃｎ ｎ Ｍ ｉｋ Ｂｅ ｅ ａ ｅ ｔ ｒ ｎ ｔｏ ｆＧ ｙ ｉ ｅ ｉ ｌ ｖ ｒ ｇ
ｂ ａ ｉａ ｙＥｌ ｔ０ ｈ ｒｓ ｔ ｅｔｏ ｈ ｍｉａ ｔｏ ｙＣ ｐｌ ｒ ｅ ｒ ｐ ｏ ｅｉ ｌ ｃ ｓ ｈＥｌ ｒ ｃ ｅ ｃ ｌ ｃ Ｍｅｈ ｄ
第４ ０卷 第 ８期
李 笑笑 ： 细 管 电泳 电化 学 检 测 含 乳 饮 料 中游 离 的甘 氨 酸 毛
１７ ２
将 铜 线 、 料 管 和 一 段 长 度 约 为 ３ａ 直 径 约 为 ４ ０ｔ 的 塑 ｍ、 ０ ｍ ｘ 铅笔芯放人盛有无水 乙醇 的烧杯 中超声 清洗约 ５ｍ ｎ 超声 完毕 ｉ，
甘氨酸（ ｌ ｉｅ 又名 氨基 乙酸 ， Ｇｙ ｎ ） ｃ 为非人体 必需 氨基酸 。甘 氨酸又是人体必需 的氨基 酸之一 ， 为营养增 补剂 广泛应 用 于 作 医药 、 品等领域 。甘氨酸有独特 的甜味 ， 食 能缓和 酸、 味 ， 盖 碱 掩 食品 中添加糖精的苦味并增强甜 味。人体 若摄入甘氨 酸 的量 过 多， 不仅不 能被人体 吸收利用 ， 而且会 打破 人体对氨基 酸 的吸收 平衡而影 响其它 氨基酸 的吸 收 ， 导致 营养 失衡 而影 响健康 。根 据我 国 Ｇ ２ ６ （ 品添加剂使用卫生标准》 Ｂ７０ 食 ” 规定 ， 甘氨酸最 大 使用量是 １０ｇｋ ， ． ／ ｇ 而且允许使用的范围仅为调味料和植物蛋 白
（ ／ ＝３ ｆｇｙ ｉｅｗｅｅ７ ９×１ 。 ｌ・Ｌ‘ ｆｒｔｅ ｅｅ ｔｏｈ ｍｉａ ｙ ．Ｎ ｓ ）ｏ ｌｃｎ ｒ ． ０＿ ｍｏ 。 ｈ ｌｃｒｃ ｅ ｃ ｌｗａ ．Ａｓａｒｓ ｌ，ｃ ｎ ｅ ｔａｉｎ ｆｄｓｏ ｉｔ ｅ ｏ ｅｕｔ ｏ ｃ ｎｒｔ ｓｏ ｉｓｃａｉ ｏ ｖ
ｇｙ ｉ ｅ ｗａ ． ｌ ｃｎ ｓ ３ ０ ｍｇ ・Ｌ‘ ｏｒｔ ｅ ｓ ｍｅ ｓ ｍｐｌ 。ｆ ｈ ａ ａ ｅ．Ｔｈ ｅ ｏ ｅ ｅ ｆｔ ｅ ｍｅｈ ｄ ｗａ ３％ 一１ ９％ ． ｅ ｒ ｃ ｖ ｒ ｓｏ ｈ ｔｏ ｓ８ ｉ ０ Ｋｅ ｙ ｗｏｒ ｄｓ：ｃ ｐ ｌ ｒ ｌｃ ｒ ｐ ｏ ｅ ｉ ａ ｉ ａ ｙ ｅ ｅ ｔｏ ｈ ｒ ｓｓ；ｃ ｒ ｏ ｉｃ ｅｅ ｔｏ ｅ；ｇｙ ｉ ｅ；ｍｉｋ ｂｅ ｅ ａ ｅ ｌ ａ ｂ ｎ ｄ ｓ ｌ ｃｒ ｄ ｌ ｃｎ ｌ ｖ ｒ ｇ
摘 要 ： 利用毛细管电泳与电化学联用体系检测含乳饮料中游离甘氨酸， 以自制的石墨圆盘电极为工作电极， 考察了缓冲液
体系 ，Ｈ及其他影响 因素 ， 到最低检测 限 （ ／ ３ ｐ 得 Ｓ Ｎ＝ ）为 ７ ９×１ ． ０～ｍｏ ・ ～， ｌ Ｌ 最终得 到同一指定样 品中游离甘 氨酸的浓度分 别为
— —— —— 墨 — — —— —叫 墨— —
图 ｌ 石墨圆盘 电极 的制作过程示意图
１铜丝 ；． ． ２ 铅笔芯 ；． 胶管 ；． ０ ；． Ｂ ；． ３橡 ４ ５２胶 ５ Ａ 胶 ６ 塑料管
Ｆ ｇ １ Ｍａ ｕ ａ ｔｒｎ ｒ ｃ ｓ ｆｔ ｅ ｃ ｒ ｏ ｉｋ ｅｅ ｔｏ ｅ ｉ． ｎ ｆ ｃ ｕ ｇ ｐ ｏ ｅ ｓｏ ｈ ａ ｂ ｎ ｄ ｓ ｌ ｃｒ ｄ ｉ １ ｃ ｐ ｅ ｉｅ ．ｅ ｄ ：３ ｈ ｓ ｐｐ ４ ５ ２ ｇ ｍ ； ． ｕ ； ｐ ａ ｔ ｉ ． ｏ ｐ ｒｗ ｒ ；２ １ａ ． ｏ ｅ ｉ ｅ； ． ０ ｕ ５ ＡＢ ｇ ｍ ６． ｌｓｉ ｐ ｐ ｃ ｅ
饮 料 ， 不 包 括 含 乳 饮 料 。对 乳 饮 料 和 乳 制 品 中游 离 的 甘 氨 酸 并 的检 测 也 有 相 关 报 道 。此 实 验 基 于 甘 氨 酸 的 电 化 学 特 性 ， 结 合 毛细 管 电泳 从 而 进 行 含 乳 饮 料 中 游 离 甘 氨 酸 的 定 性 和 定 量 分析 ， 进而可以为食 品和 工业 的分 析等 提供基 本数 据。对 于甘 氨酸 的检测 主要是 以结 晶紫为指示 剂的高氯酸标 准溶液非 水滴
第４ ０卷第 ８ 期 ２１ ０ ２年 ４月
广
州
化
工
Ｖｏ ． ． １４０ Ｎｏ ８ Ａｐ ｉ． ０１ ｒｌ ２ ２
Ｇｕ ｎ ｚ ｏ ｅ ｃ ｌＩ ｄ ｓｒ ａ ｇ ｈ ｕ Ｃｈ ｍｉ ａ ｎ ｕ ｔ ｙ
毛细管电泳电化学检测含乳饮料中游离的甘氨酸 水
李 笑 笑
（ 青岛科技大学化学与分子工程学院，山东 青岛 ２ ６４ ） ６ ０２
钾。
定， 液相色谱 ， 纸色谱 、 子交换 色谱 、 层色谱 法 、 相色谱 法 离 薄 气
等。
毛细管 电泳与 电化学联用体 系 已经应用 于各 个方 面的 检测分析 Ｊ 。本 文将 自制 的石 墨 圆盘 电极 运用 到 毛细管 电
泳 电化学检测体 系中， 讨了电极 的循环伏 安特性 ， 探 在此基 础上 应 用 毛细 管 电泳 与 电化 学 联 用 检 测 甘 氨 酸 标 准 样 品 并 用 于 含 乳 饮料 中甘 氨酸分析 ， 并得到 良好的检测结果 ， 继而期 望进一 步实
２ ２ 样 品的 电化学检 测 ．
取含乳 饮 料 样 品 约 １ Ｌ置 于 ５ Ｌ容 量 瓶 ， 加 入 ０ｍ ０ｍ 后 １ｍ ｌ Ｌ ｏ ・ 乙酸锌溶液 ５０ ｍ ． Ｌ和 ０ ２ ｌ・ 亚铁 氰化钾 溶 ．５ｍｏ Ｌ
后， 自然 晾干 ； 将直径为 ５０Ｉ ０ ｍ的铜 丝和铅笔芯重叠约 １０ａ ｘ ． ｍ， 然后用橡胶管把重叠处 包裹起来 。之后 置入长 度为 ３ ０ ｃ 内 ． ｍ、 径为 ２０ｍｍ的塑料管 中， 端露 出约 １ｍｍ铅笔 芯 （ １ ． 一 图 Ａ）。 将此露 出碳棒 的一 端浸 入到 ５ ２胶 中， 塑料 管 内充满 ５ ２胶 ０ 使 ０ （ １ ）。待玻璃管 中的 ５ ２胶 固化后 ， 线一端用 Ａ 图 Ｂ ０ 铜 Ｂ胶 封住 （ １ 图 Ｃ）。２ ４ｈ后晾干即可。用 于实 验之 前 ， 电极先后在 ６ ０ 把 ０ 目金相砂纸 、２ ０目的金相 砂纸 、． 和 ０ ０ ｍ 的氧化铝 １０ ０ ３ｍｍ ．５ｍ 粉末打磨平 ， 之后在二次水中超 声 ３ｍｉ ｎ即可。
现食 品和其他饮料 中的甘氨酸快速分析 。
１ 实 验 部 分
１ １ 实验仪 器 ．
ＭＩ Ｐ —Ａ型毛细管 电泳 电化学检测仪 （ Ｉ ＭＰ —Ａ型 ） 西安瑞 ，
迈分 析仪 器有 限公 司 ； 离心机 （ Ｄ ４ Ｂ） 上 海安亭科 学仪器 Ｔ Ｌ一 ０ ，
厂； 超声波清洗器 （ Ｑ一５０ 昆 山市超声 仪器 有 限公 司 ） 昆 Ｋ ０ Ｂ， ， 山， 江苏 ； 三电极 体 系为石 墨 圆盘 电极 （ 工作 电极 ） 铂 丝 电极 ， （ 辅助 电极 ） Ａ ｇ ｌ 和 Ａ Ｃ 电极 （ 比电极 ） 参 ；弹性石英毛 细管 （ 内 径 ２ ｍ， 径 ３ ５ｔ ， ５ 外 ７ ｍ） 河北 永 年 光 导纤 维 厂 。 ｘ
基金项 目： 山东省 自然科学基金项 目（ Ｒ ０ ９ Ｍ ２ 资助 。 Ｚ ２ ０ Ｂ ０ ９） 作者简介 ： 李笑笑 （９ ７一） 男 ， １８ ， 在读硕士。 通 讯 作 者 ： 雪 梅 （ ９７一） 女 ， 孙 １６ ， 副教 授 ， 士 。 博
１ ３ 实验 方法 ．
１３ １ 石墨圆盘工作电极 的制作 ．．
Ａｂ ｔ ａ ｔ ｓ ｒ ｃ ：Ａ ｔｏ ｏ ｌｃ ｎ ｅｅ ｔｏ ｙ ｃ ｐ ｌ ｒ ｌｃｒ ｐ ｒ ｓｓ ｃ ｕ ｌ ｄ ｗｉｈ ｅ ｅ ｔｏ ｈ ｍｉ ａ ｔ ｏ ｍｅｈ ｄ ｆ ｒ ｇｙ ｉ ｅ ｄ ｔ ｃｉｎ ｂ ａ ｉｌｙ ｅ ｅ ｔｏ ｈｏ ｅ ｉ ｏ ｐ ｅ ｔ ｌｃ ｒｃ ｅ ｃ ｌｗｉ ａ ｈ ｍｅ— ａ ｈ ｍａ ｅ ｃ ｒ ｏ ｉｋ ｅ ｅ ｔｏ ｓｗｏ ｋｉｇ ｅ ｅ ｔｏ ｅｗａ ｅ ｃ ｂ ｄ ｄ ａ ｂ ｎ ｄ ｓ ｌｃｒ ｄｅａ ｒ ｎ ｌｃｒ ｄ ｓｄ ｓ ｒ ｅ ．Ｔｈ ｕ ｎｉｇ ｂ ｆｅ ，ｐ ，ｃ ｎ ｅ ｔａ ｉｎ ｏ ｆｅ ，ａ ｈ ｉ ｅｒｎ ｎ ｕｆｒ Ｈ ｏ ｃ ｎ ｒ ｔｏ ｆｂｕｆ ｒ ｎｄ ｔ ｅ ｏｈ ｒｃ ｎ ｉｉｎ ｒ ｔ ｄｉｄ ｉ ｈ ｔｃ ｉｎ ｓ ｓｅ ｔ ｅ ｏ ｄ ｔｏ ｓ ｗｅ ｅ ｓｕ ｅ ｎ ｔ ｅ ｄｅｅ ｔｏ ｙ ｔ ｍ．Ｕｎ ｅ ｈ ｐ ｉ ｍ ｏ ｄ ｔ ｎ ｆｄ ｔｃ ｉｎ．ｔ ｅ ｌｍｉ ｆ ｄ ｔ ｃｉ ｎ ｄ ｒｔ ｅ ｏ ｔｍｕ ｃ ｎ ｉ ｏ ｓ ｏ ｅ ｅ ｔ ｉ ｏ ｈ ｉ ｔ ｏ ｅｅ ｔｏ ｓ
ａ ｄ ｗｉ ｏ ｔｓ ｎ ａｄ ｇ ｙ ｉ ｅ ｎ ｔ ｕ ｔ ｄ ｒ ｌ ｃ ｎ ｈ ａ １ ．ｍｉ ｅ ｅ ａ ｅ：２ ｌ ｂ ｖｒ ｋ ｇ ．５． ０×１ ０～ ｍｏ ｌ・Ｌ一 ｌ ｃｎ ’ｇｙ ｉ ｅ； ３．ｍｉ ｅ ｅ ａ ｅ ｗｉ ． ×１ ｌ ｂｖｒ ｔ ５０ ｋ ｇ ｈ ０～ ｍｏ ｌ・Ｌ～ ｇ ｙ ｉ ｅ ｌｃｎ ． Ｃ ｎ ｉｉｎ ： ａ ｉ ａ ｙ，Ｉ Ｄ．，２ ｍ ， Ｄ． ７ ｘ ， ５ ｃ ｉ ｅ ｇｈ， ｏ ｄ ｔｏ ｓ ｃ ｐ ｌ ｒ ｌ ． ５ Ｏ． ，３ ５ Ｉｍ ４ ｍ ｎ ｌｎ ｔ
３ ０ｍ Ｌ 且得 到乳饮料 中游离甘氨酸 的加标 回收率分别为 ８ ％ 一１９ 。 ． ｇ・ ～， ３ ０％
关键 词 ： 毛细管电泳； 石墨圆盘电极 ； 甘氨酸； 含乳饮料
中 图分类 号 ：６７８ ０ ５．
文献 标识码 ： Ａ
பைடு நூலகம்
文 章编 号 ：０１ ９７ （０２０ — １６ ０ １０ — ６７ ２１）８ ０２ — ３
、
Ｘｉｏ —ｘｉｏ ａ ａ
（ ｏ ｅｅｏ ｈ ｍ ｓ ｙａ ｄＭｏ ｃｌ ｎ ｉｅｒ ｇ Ｑ ｎ ｄｏＵ ｉｅｓｙ Ｃ ｌ ｇ ｆ ｅ ｉｒ ｎ ｌ ｕａ Ｅ ｇ ｅｉ ， ｉｇ ａ ｎｖｒｉ ｌ Ｃ ｔ ｅ ｒ ｎ ｎ ｔ ｏ ｃｅｃ ｎ ｅｈ ｏ ｇ ，Ｓ ａ ｄｎ ｉｇ ａ ６ ０ ２ Ｃ ｉａ ｆ ｉ ｅａ ｄＴ ｃ ｎｌ ｙ ｈｎ ｏｇＱｎ ｄｏ２ ６ ４ ， ｈｎ ） Ｓ ｎ ｏ
１ ２ 试 剂 ．
甘氨酸 ， 国药集 团化学试剂有 限公司 ； ， Ｆ （ Ｎ）］ Ａ ， Ｋ ［ ｅ Ｃ （ Ｒ）
天津市瑞金特化学品有限公 司 ； ａ ： Ｏ ２ 上海 亨达精细 Ｎ Ｈ Ｐ ・ Ｈ ０， 化工有 限公 司 ； ａＨ Ｏ １ Ｈ Ｏ， Ｎ ２ Ｐ ・ ２ 天津市 博迪化 工有 限公 司 ； 丙 酮， 无水 乙醇 ， 台三 和化 学试 剂 有 限公 司 ； 烟 乙酸 锌 ； 铁 氰化 亚
１３２ 石 墨 圆盘 电极 电化 学 性 能 ．．
图 ３ 含乳饮料样 品及标准甘氨酸的电化学谱 图
Ｆｉ ． Ｅｌｃ ｒ ｃ ｅ ｃ ｌ ｉ ｔｎ ｉ ｌ ｅ ｅ ａ ｅｗｉ ｇ３ ｅ ｔ ｈ ｍｉ ａ ｎ ｅ ｓｔ ｏ ｍｉｋ ｂ ｖ ｒ ｇ ｔ ｏ ｙｆ ｈ
打磨好 的电极 ， 声完后 检测 其 电化学 特性 。打开 电化学 超 分 析仪 ， 记录循环伏安 曲线 ； 录完保存数 据如 图 ２所示 。如果 记 测得 的氧化 还原 峰形 比较对称 ， 氧化还原 电位差 ８ Ｖ左右 ， ０ｍ 可 以判 断电极性 能 良好 。
液 ５０ｍＬ 定容至刻度 ， 止沉淀后 ， 滤 ， 滤液备用 。去除 ． ， 静 过 取 些杂质的干扰后 ， 取离 心样 品上 清液做为含 乳饮料标 准样 品。
一
将不同浓度 的甘氨 酸标准 溶液加 入含 乳饮料 标准样 品 ， 得到 一 系列加标样 品溶液 。在最优条件下对加 标与未加标 样品混合 液 进行检测 ， 同时得到电化学谱 图如图 ３所示 。