第七章食用菌菌种生产

因此，迄今为止，中国常见栽培蕈菌所使 用的菌种基本上都是固体菌种。
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菌种按生产程序 • 菌种的类型 一级种 (母种）
二级种（原种）
在生产中 根据菌种的来源、繁殖 代数及生产目的，把菌 种分为母种、原种和栽 培种。分别叫一级种、 二级种、三级种。
三级种(栽培种）
• 母种：
一支试管可以扩繁 为20－30支试管
3、培养条件 菌种培养室
在制作一 级种和少量二级 种时，可采用电 热恒温箱或隔水 式电热恒温箱， 目的是控制温度， 适温培养
恒 温 箱
4、消毒灭菌条件
5、制种常用容器 • 玻璃容器： 试管、培养皿、三角瓶、罐头瓶、菌种瓶等。 • 塑料容器： 聚乙烯、聚丙烯塑料袋或筒料，塑料套环，聚 丙烯膜等。 6、菌种保藏条件 冰箱 冷藏室 冷库
固体培养基 优点是原材料广泛，价格低廉，配制 容易，营养丰富。 固化培养基 是指将各种营养物质按比例配成营养 液后，再加入适量的凝固剂，冷却后凝固。
按营养物质来源
•天然培养基 用化学成分还不清楚或化学成分不恒
定的天然有机物制成的培养基。常用的有马铃薯、胡
萝卜、蚕蛹粉、豆芽汁、花生饼粉、玉米粉、酵母等，
在原料的选择上应注意如下几点
1、原料要新鲜、干燥
陈旧、潮湿的原料不仅容易滋生杂菌、螨类等有 害生物，而且某些养分的含量也大为减少。 例如，新鲜米糠含有大量维生素B1和烟酸，但陈 旧的米糠中烟酸几乎不再存在。新鲜米糠含有相 当数量的粗脂肪，在高温。高湿条件下，存放一 个月之后，即可分解，损失60%以上 因此，除木屑有时可选用较陈旧的(如用于金针菇 制种)之外，要力求选用新鲜、干燥的原料。
菌种的类型
保藏用菌种
使用目的 试验用菌种 生产用菌种 培养基 培养对象 粪草菌种 谷粒菌种
颗粒菌种
枝条菌种
木质菌种
草质菌种
木块菌种
木屑菌种 矿石菌种
液体菌种 物理形状
培养容器
固体菌种
固化菌种
袋装菌种
瓶装菌种
颗粒状菌种 外观形态 片状菌种 砖状菌种
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
• 中国是产量位居世界第一的蕈菌生产大国，每 年所需菌种及制作菌种的原料的数量都十分庞大。 固体菌种具有原料廉价易得、生产规模可灵活调整、 菌丝体生产健壮、便于用户对菌种质量进行目测、 贮存及长途运输均较为方便等优点，同时，各级菌 种生产单位在长期实践中，在固体菌种制作过程中 的质量控制及生产管理方面已积累了较丰富的经验。
适合于各类微生物的生长。取材方便、价格低廉，除
实验室经常应用外，更适于在生产上大规模培养菌类
时使用。
合成培养基 是指用已知成分和数量的化合物配 制而成的培养基。成分精确，试验结果的重复 性强，但价格昂贵，适用研究 半合成培养基 利用天然物质作为碳、氮源及 维生素的来源另加一些无机盐类配制而成。斜 面菌种培养中常用的马铃薯葡萄糖培养基 （PDA）就是一种半合成培养基。
配制培养基的原则

要根据不同菇类的营养需要配制相应的培养基
如培养木耳、猴头等木腐菌原种和栽培时， 多采用木屑、棉籽壳等为主要原料的培养基；而 培养双孢蘑菇、草菇等草腐菌的原种和栽培种时， 要采用粪草为主要原料的培养基。 在整个菌种制备过程中，从母种，原种到栽培 种各个阶段的目的和要求不同，所选用的培养基 营养成分也应有不同。

要使培养基能保持适宜的酸碱度
如猴头菌丝喜欢酸性环境，需调节pH值 为4～5;又如草菇菌丝喜碱性环境，需将pH 值调为7．5～8。
用氢氧化钠、石灰或过磷酸钙等调节pH值。

选择经济适用的原料 在食用菌制种中，原种和栽培种因原料用 量较大，选择合适的原料，可降低成本，提高 经济效益。 过去多用麦粒和玉米，现在可用锯木屑和 棉籽壳等来代替。但是选用代用料时，必须就 地取材，来源丰富、价格便宜的原则，而且原 料没有毒性。
选择性培养基 是根据某一种或某一类微生物的
特殊营养要求，或对物理、化学因素的抗性而设计 的对特定对象具有选择作用的培养基，如PDA+青霉 素。 选择性培养基在菌种分离、纯化等工作中应用 较多。例如，青霉素、链霉素等抗菌素对细菌有抑 制作用，但对食用菌的生长发育并无妨碍。因此， 在单孢分离或进行某些研究工作时，可加入青霉素、 链霉素等抗菌素制成选择性培养基，以排除细菌污 染对工作的干扰。
将经孢子分离法或组织分 离法得到的纯培养物，移接到 试管斜面培养基上培养而得到 的纯种。又称为试管种或一级 种. 采用分离法获得的母种数 量有限，一般可将菌丝再次转 接到新的斜面培养基上进行转 管繁殖，能得到更多的母种， 称为再生母种，可以繁殖原种， 也适宜菌种保藏。
• 原种:由母种扩大 繁殖培养而成的 菌种,又称二级菌 种和瓶装种。
装瓶(袋)
加棉塞
接种
培养
质检
三、各级菌种的培养时间
1、试管种 7-10天 2、二级种 30-60天 3、三级种 30-60天
• 二(三)级种装瓶
枝条种装瓶
利用周转筐装载菌种瓶（袋）灭菌
全年菌种生产时间安排 时间 袋料 8-9月 2-3月(春) 8-9月(秋) 3-4月(春) 9-10月(秋) 11-1月 2-4月(春) 8-10月(秋) 3-4月(春) 8-9月(秋) 9-10月 6-8月 (华中) 4-10月(华南)
5、玉米粉培养基：玉米粉30g，蛋白胨20g，蔗糖20g 琼脂18g，水1000ml，pH值 自然。 6、麦麸（米糠）培养基：麦麸（米糠）100g，硫酸铁 1g，蔗糖20克，琼脂20g，水1000ml，pH值 5～6 7、麦粒培养基：小麦粒200g，糖5g，碳酸钙15g，水 500ml，PH值 自然。 8、杏汁培养基（适合朴菇子实体的发生）：干杏25g， 琼脂 15—30g，水1000ml，PH值 自然。 9、胡萝卜培养基（代替马铃薯）：胡萝卜100g，糖 18～25g，琼脂20g，水1000ml。
段木
香菇 木耳 银耳 金针菇 侧耳类 猴头菇 双孢菇 草菇 2-4月 3-4月 3-4月
第二节
食用菌制种条件
• 一、食用菌制种程序
二、制种的设备和条件
1、配料设备 切片机 是将木材切 成规格木片 的专用机械， 是食用菌培 养基质粉碎 处理的预前 工序设备。
粉碎机 是将木片、 秸秆等原料 粉碎成一定 粗细度碎屑 的专用机械。
这一过程增强菌丝对 培养环境的适应性， 又起到扩繁的作用。 原种主要用于菌种的 扩大培养，也可以直 接出菇。
一支试管可以 扩繁为五瓶原种
• 栽培种：由原种扩大培养而成。可直接用于生产， 又称为三级种、生产种和袋装种。不能用于扩大 繁殖菌种。
栽培种的培养基质与二级种相似，更接近于栽 培基质。三级种数量多、成本低。
第七章 食用菌菌种生产
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第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 第七节 第八节
食用菌菌种概述 食用菌制种的条件 食用菌菌种的培养基 食用菌菌种分离 食用菌菌种制作 食用菌菌种的培养 食用菌菌种质量的鉴定 食用菌菌种保藏
第一节 食用菌菌种概述
一、菌种的概念 菌种（广义）：是指以保藏、试验、栽培和其它 用途为目的，具有繁衍能力，遗传特性相对稳 定的孢子、组织或菌丝体及其营养性或非营养 性的载体。 菌种（狭义）：是指以适宜的营养培养基为载 体进行纯培养的菌丝体，也就是培养基质和菌 丝体的联合体。或者说是指人工培养，并供进 一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。
• 根据各类微生物的特点，可以选用不同发 育阶段的菌体作为菌种。 例如：细菌是形态简单，多以裂殖方式 进行繁殖的微生物，常直接用营养体作为 菌种，放线菌常用孢子作为菌种，而异宗 结合蕈菌（大型真菌）的单核菌丝体一般 不具备结实能力，所以必须采用具结实能 力的双核菌丝体作为生产用种。
人类栽培菇类的历史可追溯到一千多年以 前，但是，科学的用纯培养技术生产菌种 还只有一百多年的历史。栽培范围遍及全 世界、产量居各种菇类之首的双孢蘑菇的 制种技术发展史，可以作为蕈菌菌种制种 技术发展史的一个代表。

各种营养物质要有适宜的浓度和配比
应根据不同培养对象的需要，配以适当 比例。菌丝生长要求培养基(料)有一定的碳 氮比，一般碳氮比(C：N)以20:1为好。 如培养基(料)中碳源供应不足时，容易 引起菌丝的过早衰老和自溶，如氮源过多或 过少时，会引起菌丝的过于旺盛生长或生长 缓慢，对菌丝生长造成不良影响。
粉碎机
自动上料加水原料搅拌机
搅拌机 是将培养料 通过搅拌使 其分布充分 均匀的专业 机械。
装袋机是将搅 拌混合均匀后的培 养料装入塑料薄膜 筒内的机械。
装 袋 机
将培养料 装入料瓶的机 械。生产上采 用的均匀螺旋 挤入式装瓶机。
装 瓶 机
2、接种条件
接种室是 用于接种 的无菌操 作室
接种工具
食用菌菌种发明年鉴
1、双孢菇菌种 • 1894年（法国），纯种问世； • 1902年，组织分离法获得纯种； • 美国人制得瓶式菌种。 • 1932年，辛登(Sinden)发明了谷粒菌种(grain spawn)。谷粒菌种亦称麦粒菌种。 2、香菇菌种 • 1935年,日本人(森喜 作)开始研制香菇木屑种 • 1942年，获得成功
根据培养基的主料 分为马铃薯培养基、玉米粉培养基、胡萝卜培养基、 果汁培养基、棉籽壳培养基、麦粒培养基、木屑培 养基、木块培养基、枝条培养基、粪草培养基等。 根据培养基表面形状 分为斜面培养基、平面培养基、高层培养基
按照培养基的用途 基础培养基 是指含某一类微生物所需基本营养成 分的培养基，它常常作为其他特殊用途培养基的 基础成分，如PDA 。 加富培养基 是指加有某些动、植物组织提取液等 高营养成分的培养基，常用于培养某些营养需求 比较特殊的微生物，也常用于富集混合的微生物 群体中的某一种微生物，如PDA+VB1。 鉴别培养基 在培养基中加入某种试剂或化学药品， 使不同微生物产生不同的反应，借以将它们区别 开来，这样的培养基叫做鉴别培养基。
二、母种常用的培养基
1、PDA:土豆200g、蔗糖20g、琼脂18-20g、水1000ml。 2、马铃薯综合培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g， 琼脂20g，磷酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，维生 B110mg，水1000ml。 3、葡萄糖-麦芽膏-酵母膏培养基（GMY）： 麦芽膏 10 g，萄糖 11g，酵母膏 4g，琼脂 18g，水 1000ml，PH值 自然。 4、黄豆饼粉培养基：黄豆饼粉40g，葡萄糖或蔗糖 20g，琼脂18g，水1000ml，PH值 自然。
随着加工方式及 程度的不同，所得米糠及麦麸的质量也不尽相 同。米糠要用细糠，三七糠、统糠所含养分不 足，不宜供配制培养基之用。麦麸有所谓红、 白麦麸之分，宜选用营养成分较丰富的红麦麸。 3、原料的质地、粒径要适宜 原料的质地及 颗粒的粗细对培养基的质量也有较大影响，应 根据实际情况合理选用。例如，在用粪草培养 基培养蘑菇菌种时，宜用质地较软的大麦草。 如用质地坚硬、不易软化、折断的小麦草，菌 丝长势较差。
栽培种一般采用固体培养基，用聚乙烯塑料袋 或玻璃瓶作培养容器。通 常一瓶原种可繁殖30-50 袋栽培种。
一瓶原种可以接 30－40瓶栽培种
1. 试管种的制作流程
PDA
冷却至60℃
分装
摆斜面
加棉塞
灭菌(121℃ 30min)
接种 培养
质检
保藏
二(三)级种的制作流程
木屑(78%) 麸皮(20%) 蔗糖(1%) 石膏(1%) 水适量(55%-65%) 灭菌 冷却
2、原料的质量要符合要求
• 分解力较强的香菇、木耳，制种时可选用硬质 杂木屑，分解力较弱的饵耳，制种时宜选用易 分解的软质阔叶树木屑。木屑的颗粒不宜过细， 以免通气不良，影响菌丝生长。粪草培养基中， 草料不宜过长，一般以切成3cm长的短草为宜。 4、原料中应不含有害物质 松、杉，柏等针 叶树及樟树、楠树等阔叶树木屑含有芳香油、 醚等杀菌物质，不宜使用。含有过多机油的木 屑有碍菌丝生长，应予剔除。
第三节
食用菌菌种的培养基
一、培养基
概念
采用人工的方法，按照一定比例配制各种营 养物质，以供给食用菌生长繁殖的基质。
含有该菌生长发育所需要的营养物质； 条件
具有一定的生长环境；
必须经过严格的灭菌，保持无菌状态。
分
按照培养基的物理性状
类
液体培养基 优点是营养分布均匀，有利于菌丝吸 收，理化条件易控制，便于机械化操作；菌丝生 长迅速，产量高。