乙肝病毒大蛋白研

的表面抗原的组成
不存在单独前Ｓ１蛋白，前Ｓ１是大蛋白一部分
乙肝病毒包膜蛋白研究进展
• 1995-2004年 发现大蛋白前S区有复杂构象结构，是 被发现具有拓扑结构的第一个病毒外膜蛋白
• 1996－９８年 发现大蛋白具有反式激活病毒复制的 作用
• 2002年 发现导致肝细胞病变及凋亡的主要原因是大 蛋白（致病性蛋白）
大蛋白试剂结果
阳性率 阳性含量均值（） （％）
88.89
17.60
97.37
24.69
96.55
30.44
96.92
55.46
100
86.61
95.25
/
注：北京地坛医院与沈阳传染病医院汇总，其中北京地坛医院为阿德福韦抗病毒治疗患者
标本。 拷贝数对数值与－含量（）的相关系数
0.935
PreS Ag OD值（含量）
135
79.41
134
93.71
128
96.24
பைடு நூலகம்
783
92.33
注：1 阿德福韦抗病毒治疗患者43例，共检出 阳性152次； 2 拉米夫定抗病毒治疗患者51例，共检出 阳性133次。
大蛋白试剂临床研究
2、不同 拷贝数中－阳性率以及值比较
组别
1 2 3 4 5 6
拷贝数 ＜104(阴性)
104 105 106 107 108
蛋白质
反式激活作用
大蛋白试剂临床研究
1、 阳性标本中－的阳性符合率
考核单位
（＋）
例（次）数
－ （＋）
例（次）数 比例（％）
北京地坛医院1
268
北京地坛医院2（治疗系列）1
152
解放军传染病研究所
170
辽宁沈阳传染病医院
143
浙江省湖州中心医院（治疗系列）2
133
合计
848
254
94.78
149
98.03
例数 84 43 63 24 17 23
阳性例数 23 29 46 21 16 23
大蛋白试剂结果
阳性率（％）
大蛋白
21.38
0.266±0.044
67.44
0.416±0.081
73.02
0.504±0.205
87.50
0.898±0.180
94.12
1.275±0.319
100.00
1.428±0.238
• 2003年发表文章总结其反式激活机理 • 2004年 国际上进行大蛋白特殊拓扑结构研究 • 2004年 成功构建针对构象型表位的单克隆抗体
反式激活蛋白
在同一条核酸链上起调控基因表达作用的核 酸序列称为顺式作用元件；
反式激活（）,既某一基因的编码蛋白转而激 活同一基因的远离部位，或另一基因的转 录和表达。研究发现乙肝病毒的一些组成 蛋白具有反式激活作用。
大蛋白试剂临床研究
3 2.5
2 1.5
1 0.5
0 1
PresAg含量与HBV DNA含量相关性
由于非常难转阴，而 转阴停药容易反弹，抗病毒治疗缺乏 终点指标！
抗病毒治疗效果监测
• 临床上缺乏评估抗病毒治疗效果的指标。
• 以 阴转作为治疗的终点不恰当，此时停药 病情易反复。
小三阳两种预后
病毒休眠\不复制\预后好
什么指标能够分辨开?
病毒保持复制水平\肝硬化\ 肝癌
抗病毒治疗过程中病毒颗粒消退顺序
最先消失 阳性 大蛋白阳性
其次消失
阴性 大蛋白阳性
最后消失
阴性 大蛋白阴性
抗病毒治疗效果监测
• 临床上缺乏评估抗病毒治疗效果的指标。
• 以 阴转作为治疗的终点不恰当，此时停药病 情易反复。
没有指标预示治疗终点
• 期望转阴，带来过高期待，导 致过度用药，增加患者负担以 及浪费资源；据估计每年2040％左右的治疗是“多余”的。
目前临床乙肝病毒检测的缺陷
１、阴性肝炎(小三阳肝炎)的血清学诊断指标缺乏
过去认为大三阳转小三阳即的阴转意味着乙肝病毒复制降低， 传染性减弱，但是近年国内外的研究发现部分小三阳在血清转 化（或变异）后病毒仍然复制，而且预后更严重。
但是目前没有血清免疫学指标可以检测小三阳病毒携带者 是否病毒复制！
２、药物治疗效果评价血清学指标缺乏
病毒血清学检测指标
• 直接指标：外膜蛋白(表面抗原）、降解或 代谢产物蛋白、病毒核酸或
• 间接指标：各种抗体、等
目前乙肝实验血清学检测的需要
状况：指标不少，但是缺少以下关键指标 1,什么是肝炎（e抗原阴性肝炎）血清学指标？ ２、抗病毒治疗没有实验室终点指标，临床肝 炎治疗合理用药指导，避免过度用药．特别是Ｄ ＮＡ阴性后应该持续多长时间用药？
注：解放军传染病研究所， 拷贝数对数值与－ 值的相关系数
0.945
大蛋白试剂临床研究
3、不同 拷贝数中－阳性率以及含量比较
组别
1 2 3 4 5 合计
拷贝数 103 104 105 106 ＞106 /
例(次)数
54 38 58 65 80 295
阳性 例(次)数
48 37 56 63 80 281
• 大蛋白晚于血液内ＤＮＡ消退，早于消退 • 大蛋白直接导致肝细胞损伤，直接毒性作用 • 大蛋白具有反式激活增强病毒复制作用
临床使用的意义 抗原的补充
１、 病毒携带者体内病毒复制的确切血清学指标， 特别是e抗原变异或转化后可作为e抗原的补充。
2、 大蛋白具有反式激活病毒复制的能力，大蛋白 存在与否可预测病情反弹，大蛋白转阴是病毒清 除的最早迹象，可以作为抗病毒治疗终点辅助指 标。
• 有效的办法──乙肝病毒定量试验，但是外周血中 阴转已经不能作为治疗终点
• 还有比更好的标志物吗
阴性活动期肝炎
阴性活动期肝炎临床诊断现状： (1) 传统“两对半”指标不能反映此类患者复制程
度； (2) 缺乏指导合理治疗的指标； (3) 检测不易于各级医疗机构广泛开展； (4) 临床上急需能够反映复制程度及指导治疗的血
• ＤＮＡ阴转就停药，导致过早 停药，引起病情反弹
寻找比外周血检测更合适的指标
• 大部分人熟悉的“乙肝两对半”检测，其实并非 乙肝病毒的传染物质和致病物，乙肝两对半”只 能反映一个人是否感染过乙肝，却不能直接深入 地揭示乙肝病毒在人体内的复制和致病情况，也 就不能更好地指导临床用药和制订治疗方案。
清学指标。
解决方案
• 通过研制针对复杂构象结构的大蛋白的单 抗直接检测大蛋白反式激活域
• 大蛋白是外周血中唯一可以检测的病毒反 式激活因子
• 大蛋白与肝内病毒复制密切相关，和病情 反弹密切相关，是抗病毒治疗的辅助终点 指标
大蛋白检测可以弥补目前项目的不足 检测颗粒、管状病毒颗粒
• 大蛋白与肝内病毒复制（不是外周血）密切相关 • 用于e抗原检测的补充