生物武器卫生防护手册

第六部分（生物武器卫生防护手册）
第三十四章生物武器的卫生防护
生物武器的卫生防护属于传染病卫生防护的一个特殊部分，在了解一般传染病卫生防护的基础上，必须对其攻击地区、范围、传播方式和战剂种类做出及时准确的判断，以便及时采取正确的卫生防护措施。

第一节生物战的分期及其各期卫生防护措施
与常规武器比生物武器缺乏即刻效应，而后效应时间比较长.根据生物武器的作用特点可把其以分成几个时期。

现将生物战中的分期及各期需要采取的对抗措施和要点列入表1中。

在完成表中各项任务中必须在指挥部门的统一领导下，有效地组织各技术部门和技术人员，充分发挥广大指战员的作用。

（1）生物武器医学防护中最有效的措施是早期发现早期处理,在战剂没有显现作用和进一步扩散之前采取有效措施,才能获得满意的成效.
（2）早期发现首先靠及时正确的侦查报警和检验.
（３）早期主要防护措施除了集体和个人物理防护外，就是划定战剂污染范围并做好消毒、灭鼠和杀虫以及免疫预防和预防治疗等.
第二节生物武器攻击的早期发现
一、生物战发生前的情报
在常规战争已经或可能发生时要系统准确地了解敌人生物武器的研制现状和动态，包括战剂的种类、释放方式，部队装备情况和规模、普遍接种的疫苗，特别要了解与季节及当地流行病无关的疫苗和武器特殊的运送工具等。

根据所获资料做好针对性卫生防护的准备工作。

此间，各战区必须根据实际情况设立生物武器监察哨所和报警监测站，进入临战状态。

二、生物武器投放的监察和发现
（一）异常空、海、炮情在战区代表地带设立观测哨配合雷达站进行针对性工作。

1．记录敌机侵入时间（晴天的早晚、夜和阴天投放可能性大）和当地的气象情况（温度梯度中性、逆增投放可能性大），观察敌人飞机或其他飞行器飞行高度
（一般较低）、路线（攻击目标上风向）、特别注意是否喷放气雾（气溶胶）。

2．记录敌舰侵入时间，观测是否喷射气雾或投放异物，并记录喷射时间，始末点，云团高和宽，运行方向和距离。

3．记录炮战时间，观测有否异常炮弹（见2.2.2.）。

（二）观察记录敌人投掷的炸弹和其他投放物
1．是否有降落伞或其他减速装置。

2．爆炸力、爆音、闪光大小（相对弱）。

3．爆炸云团的大小、高度、浓度和走向.
4．弹坑深浅大小和形状等（浅小）。

5．弹坑附近有否异常粉状物质或液体物质并测量分布和密度。

6．寻找弹片和其他投掷物，以确定是不是生物战剂容器或气溶胶发生器。

7．弹坑周围是否有昆虫、小动物和其他异常物并判定种类、死活，测量分布和密度。

（三）生物战剂气溶胶攻击预警和报警
1．在战区具有代表性地带设立（多点）生物战剂气溶胶监测点，安装气溶胶粒子监测仪（预警）、生物气溶胶监测仪（报警）、生物气溶胶采样器（样品检测后
送）、生物气溶胶样品快速检测仪。

监测仪可常开，特别是在气溶胶云团不容易垂直扩散和不容易迅速水平扩散的气象条件下必须开机监测。

2．设立流动监测器把上述生物战剂气溶胶监测仪的某一种或几种合理地安装在机动运载工具上(车辆或飞行器)。

定期（同上）和有情况时出动进行监测。

（１）如发现疑是生物气溶胶云团应立即追逐采样监测。

（２）上述监测应在具有集体和个人物理防护条件下进行，如防生物、化学气溶胶工事内、个人佩带专用口罩或面具条件下进行，特别是有异常情况流动
监测时如追逐云团采样监测时更要有可靠的物理防护,穿防毒衣和面具。

3．生物战剂气溶胶警报器报警有两类。

第一类是非特异性异常情况报警。

此类警报器以测定空气中粒子数及大小作为警报的标准，可以作为预警.此类仪器因交通工具、大风、烟囱排放烟等都可能报警。

其它还有利用气溶胶物理化学、生化特性及生物特性设计的警报器，仅可报告有气溶胶物质存在。

此类传感器包括激光远程测量及采样测定两种。

第二类是特异性生物战剂报警器。

特异性生物战剂传感器是利用病原微生物的免疫学特性或分子生物学特点设计的，对样品检测后可以特异性地报告病原微生物的种类。

非特异性传感器报警更为快速敏感，特异性传感器必须有一定样品浓度，测定分析后才能报警，它更准确，但测定样品的种类受到一定的限制。

3.特殊疫请和生物战
在前期没能发现生物武器攻击，但发现如下事态应考虑生物战的可能：
（１）特殊疫情，如暴发性、诊断不清的传染病。

（２）病种特殊的烈性传染病，特别是症状不典型的特种传染病。

（３）在当地突然发现多起从未见过的传染病，或者在当地少见的，或不接触畜产品、家畜时发生大批炭疽病人等。

（４）在上述情况下应立即组织特种医疗队进行地区性封锁或半封锁性治疗的同时，启动所有卫生防护系统。

特别要注意近期在本地可能受染但已经离
开本地的人员的医疗跟踪监督
4.结果判定如果上述观测为阳性，特别是发现投掷物是异常弹型、喷洒物、昆虫、
动物和其他异物既可报警，预报、警报阳仪器检测阳性，也应立即向上级报告并
同时启动所有卫生防护系统，进入战斗状态。

第三节生物武器攻击地区的处理
在生物武器攻击报警后，必须对受生物武器攻击地区进行如下处理
一、污染区域的划定
（一）污染区的初步划定根据上述生物武器攻击的初步确认和所获参数（源强、气象参数和战剂种类等）由专业技术人员估算有效（杀伤）的污染面积。

估算主要有：根据源强（点源、线源和多点源）估算起始源强。

1．根据风速、风向、温度梯度、地形地貌等用大气气溶胶扩散公式计算下风向轴线和两侧的战剂空气浓度，必要时计算垂直浓度分布。

2．根据战剂种类的存活力和感染力（最强的战剂）估计有效作用战剂浓度的分布、划定有效作用区域。

3．对上风向地带，根据云团的大小适当划入，一般把源点上风向５０—１００米以内的地带划入污染区。

（二）污染区初步测定
1．根据污染区的初步划定，进行污染区的取样，进行战剂快速和常规检测与鉴定。

2．根据快速检测结果重新确定污染区域。

3．污染区测定必须留有余地。

即，在初步划定污染以外的邻近地带进行适当取样监测。

（三）污染区的最后测定
1．根据样品战剂检测或鉴定结果确定真正污染地带.
2．在根据4.1.1.中的（３）确定污染和有效污染地带。

二、污染区域的封锁污染区的封锁即控制污染区人员、动物和物品的进出。

对污染
区内进行杀虫灭鼠，对地面、器具等进行消毒，对人员进行隔离治疗，对已经离开的受染人员进出追踪观察等。

在执行上述措施中必须做到：
（一）有工作人员严密做好生物安全工作，包括生物预防、物理防护、预防治疗等等。

（二）人员和物品必须进出污染区时，要严格执行〈〈进出污染区的操作规程〉〉。

（三）封锁面积和范围要根据“污染区划定范围”确定和修改，并留有余地。

（四）在封锁区周围设立封锁岗哨，岗哨距污染区外沿５—１０公里，岗哨间视线清晰能够控制人和牲畜出入。

岗哨人员生物安全防护要可靠，通讯交通
快速准确。

（五）疫请地区的封锁根据我国〈〈传染病控制法〉〉进行处理。

三、污染区域的消毒
（一）对污染区要依据《消毒规程》进行各项消毒，包括人员、物品、武器和各种表面。

（二）对污染严重的地面（战剂源上风向５０米、下风向１００—５００米）必须进行初次消毒。

（三）对其他污染地面视战剂种类而定。

如果是抵抗力很强的芽胞类要扩大消毒面积，如果是抵抗力较差的战剂可利用自然消亡去除。

（四）最后消毒面积依据实测污染面积为准。

（五）对消毒效果要实施监测，直到灭菌为止。

四、污染区域的杀虫无论任何方式的生物武器攻击，对污染区都要按〈〈杀虫规程〉〉实施杀虫。

（一）杀虫范围依据污染范围而定。

（二）如果是昆虫媒介战剂攻击杀虫加强针对性，杀虫范围还要根据此种昆虫分布进行修正。

（三）战剂如果在自然传播中属昆虫传播也要有针对性，并以此进行修正。

（四）实施杀虫中对各类昆虫进行“带菌”监测，并作为杀虫措施的依据。

（五）对污染以外附近的昆虫进行扑检“带菌”情况，并作为杀虫措施的依据。

五、污染区域的灭鼠任何方式的生物武器攻击都要按着〈〈灭鼠规范〉〉对污染实施灭鼠措施
（一）鼠范围依据污染区划定进行和修正。

（二）如果发现鼠带战剂攻击灭鼠要更加迅速。

（三）如果攻击战剂传播媒介是鼠类灭鼠也要迅速。

（四）实施鼠类“带菌”监测，并以此修正灭鼠范围和持续时间。

（五）对污染以外附近的鼠类进行扑检“带菌”，并以此修正灭鼠范围和持续时间。

六、污染区域封锁的收缩和解除对污染区采取上述措施后，在下例各项条件具备时可解除封锁或改为半封锁或收缩。

（一）染区内各种样品战剂检测阴性。

（二）污染区内各种昆虫战剂检测阴性。

（三）污染区内各种鼠类战剂检测阴性。

（四）距战剂感染发病地区最后发生病例的时间超过战剂传染人体的潜伏期。

第四节生物战剂的取样和运送
一、生物战时的现场调查
在获得可疑发生生物战信息时，应首先组成调查小组，作好个人防护，携带采样器材等到可疑地点采样、调查。

其任务是：
（一）地理位置及环境条件；
（二）鉴定可疑敌投物及其迹象；
（三）初步判定污染的范围、人数、人员去向及目前情况；
（四）追访目击者，询问附近人员，了解发现可疑情况的前后经过；
（五）调查当地的卫生、防疫力量，当地医学动物本底等；
（六）以上情况的调查除笔录外，还须及时拍照、摄像、录音等；
（七）采集检验标本，对现场进行处理；
（八）疫情及临床诊断着重调查患者发病与生物战的关系，疫情发展趋势，调查可能扩散的原因，迅速作出初步临床诊断结果，指导防疫、治疗
及病原学的特异检测。

（李钟铎）
二、微生物标本采集的特点
生物战时标本的采集，不同于通常医学微生物检验标本及卫生防疫标本的采集。

其特点是：
（一）采集标本时机、地点、种类可供参考的条件不同;
（二）生物战剂的采集包括除通常医学微生物检验标本的种类之外，还可能有空气、受污染水源及物体表面灰尘等标本。

因此，需在有生物战迹
象时果断的迅速采集，防止微生物标本漂流、扩散及衰亡；
（三）战剂污染的范围大，需组织多方面、多点、多种类采集;
（四）采集标本需重视调查和取证，如发现证人、证词、主要征象、准确地点及联系方法。

三、采集标本种类
生物战时要采集标本的种类除在平时疫情发生时的采样标本外还应包括：（一）受袭击地区室内外空气样品；
（二）可疑被污染水源；
（三）可疑被污染的物体表面；
（四）突发异常不明来源的昆虫、动物及尸体和可疑污物如树叶、土壤等；
（五）受袭击地区未包装的食品；
（六）病人的各种标本。

四、标本采样箱组成：
（一）结构由箱体、采样工具、标本保存运送器材、工作人员防护及现场处理材料、记录用品等组成.可供现场采集标本使用，2000型试装微生物采样箱见图1.1。

（二）微生物采样箱技战术指标：
1．采集样品器材消毒后可以反复使用；
2．无菌器材干燥条件下可保存两年；
3．每次可采集标本10-15份，视标本种类增减。

图1.1 试装微生物采样箱（2000型）
五、微生物检验车
微生物检验车为机动性强的小型实验室，具有必要的仪器设备和防护条件，可完成采集标本、现场检测、病原体初步分离、鉴定工作。

从防生物战需要出发，建议装备到军区、军兵种的一级防疫队。

现有的微生物检验车内设备基本可以满足需要，但车辆越野性能等方面需进一步改进，微生物检验车为最终实验室鉴定奠定基础。

微生物检验车主要功能：采样、微生物检测、储存样品、样品处理及病原体初步分离鉴定。

（李钟铎）
六、取样方法和样品的选择
（一）气溶胶标本：包括气溶胶采样器采集的标本、植被、表层的土壤、水、物体表面擦拭的棉拭子、现场工作人员的口罩外层小片及敌投可疑弹
片或气溶胶发生器散件等。

（二）媒介物标本：包括蚊虫、蚤、蜱及鼠类、水生动物和杂物等.(用于立克次体及鼠疫耶尔森氏菌、土拉弗朗西丝氏菌、霍乱弧菌和炭疽芽孢
杆菌芽孢的检验)。

（三）水及食品标本，以采集500—1000毫升为易，以便浓缩。

水及食品类以敌特投毒小范围内多见。

（四）临床及尸检标本
可根据临床表现初步临床诊断来选择应采集的标本，如表2。

表2 生物战剂所致疾病的临床及尸检标本选择
附：组织穿刺器及组织的采集
穿刺器是采集死亡病例脏器组织的工具。

由套管、内芯、拉针及手柄四部分组成。

套管内径为3mm的不锈钢管，手柄和内芯通过丝扣连接。

内芯前端为三棱尖便于推进。

拉针直径3mm，前端有大小两个缺口，大口1mm长，尖端呈斜面，也是由不锈钢制作。

采集的死亡病例脏器组织包括脑、肝、脾、肾等。

用穿刺器取材时首先将手柄连接在内芯丝扣上，插入套管中，向要采集的器官刺入，采集脑组织时需经鼻腔与面部成450角，斜向颅底刺入，在通过颅底时手有突破骨质进入颅内之感。

穿刺器到达器官之后取出内芯，将拉针通过套管插入，成人进入刻度3-5mm，进入后迅速拉出或转动拉针后拉出，用小镊子取出缺口中的组织小块，可反复取数次，得到足够数量的组织。

将组织放入无菌的小瓶中，用普通冰壶保存送至实验室。

或放入含固定液的小瓶备病理检查用。

注意用穿刺器前后都应该消毒处理器材。

(李钟铎) 七.生物气溶胶的采样技术
(一)Porton采样器的操作
Porton采样器是一种液体冲击式采样器，主要用于室内外空气中微生物的浓度采检。

具体操作如下：
1.采样器消毒灭菌。

把采样器装入塑料编织袋中，放消毒液中进行消毒
和清洁24小时，再用清水反复冲洗至洁净为止，放入搪瓷盘内晾干。

用脱脂棉把进气口和抽气嘴堵上，放烤箱160 C干烤2小时，备用。

同时，对采样用的连接橡皮管进行消毒备用。

2.依据实验设计，对采样器进行编号，依次放置在采样架上。

每个采样
器加10ml采样液，再加一滴抗泡剂橄榄油。

3.校正采样空气流量。

把转子流量计连接在采样器进气口一端，启动抽
气泵，将采样流量调节到7L/min。

4.用消毒的橡皮管将采样器的抽气口和抽气泵相连，并用止血钳夹住橡
皮管。

采样时最好把采样器放置在冰盒中，特别是采集一些易死亡的
微生物。

5.采样时，把采样器进气口的棉花取出，打开止血钳，启动抽气泵，同
时开始计时。

采样结束时，关闭抽气泵，夹住橡皮管，再用消毒棉堵
住采样器的抽气口和进气口。

换采样器，后面的采样操作如法炮制。

采样液在送回实验室分析之前，最好保存在冰盒中，防止微生物的死
亡。

6.采样液需在无菌室或生物安全柜内进行分析操作。

采样液可以用于平
板接种、肉汤培养和PCR检测等。

7.校正后的采样管道系统不得变动，以保持采样流量的准确性和稳定
性；在室外5︒C以下采样时，采样液中需要加抗冻剂或增加保温装置
以保持采样液不结冰；要防止采样器之间或与其他物品碰撞，损伤采
样器，造成采样液污染。

(二)JWL-1型空气微生物采样器的采样操作
JWL-1型采样器是固体单级撞击式空气微生物采样器，主要用于室内外空气微生物粒子浓度的检测和实验研究。

操作步骤如下：
1.将特制的塑料平皿洗净、烘干，10个为一包，包好高压消毒。

2.在生物超净台内，向消毒后的每个平皿中加4.2ml采样介质（可以根据采样对
象，选择不同的采样介质），盖上平皿盖，待其凝固后，翻转倒放，在35︒C温箱内培养24小时后，选择无污染的、介质厚度均一的采样平皿备用。

3.采样前准备。

把采样头的端盖逆时针取下，用点燃的酒精棉球燃烧灭菌。

再把
采样平皿取下盖后放入三脚支架中，按实，盖上待有一线微孔的端盖，拧紧。

4.采样。

JWL-1型空气微生物采样器有两个采样定时器，当采样时间在15分钟以
内时，用定时器1，使用时顺时针旋转；当采样时间超过15分钟时，使用定时器2，使用时逆时针旋转到所需要的时间位置。

按下电源开关，采样，采样结
束后自动停机。

5.采样后操作。

取出平皿盖严，倒放。

细菌样品37︒C温箱培养48小时，真菌样
品25︒C温箱培养72小时，对平皿上的菌落数进行计数，所得结果是所采样空
气样品中的微生物粒子数。

6.计算空气中微生物粒子浓度（C）。

N
C = −−−×1000 （个/ m3）
Qt
式中，N－采样平皿中的菌落数（个）
Q－采样空气流量（L/min）
t－采样时间（min）
7.无菌条件下向平皿中加采样介质时，平皿一定要处于水平状态，保证介质的厚度均匀；介质加入量不得超过4.2ml；采样平皿在采样器的采样头上一定要放平，端盖一定要拧紧，但不要太紧，以免采样平皿被卡住。

（李劲松）
(三)空气中微生物的简易采集法
1.将广谱培养基平皿在可疑地点暴露5—10分钟，之后盖好平皿进行细菌培养。

2.敏感动物暴露法，将对预计敌用生物在剂敏感的小动物（小鼠、豚鼠等）放置可疑
地点1——2小时，之后饲养、观察，对发病动物进行微生物学检查。

八.标本的运送
(一)标本运送（冷藏）器材
1.携行，单人背；
2.总重量不超过2公斤；
3.冰块制冷；
4.保温性能
5.内容积
(二)
专人运送，火车应乘软卧包厢，注意避免日光照射和高温，以防止标
本微生物发生死亡及运送标本的丢失。

(三)包装
采集到的标本装入清洁无菌容器前必须贴上不易脱落的标签，外套防震保护之后，为防止漏脱标本应置冷藏运送容器中，外表消毒加封。

九.注意事项
1.及早到达现场，必须在对现场处理前采集标本。

2.病人血、尿、便及脑脊液等标本须在给药前采集。

3.送检标本必需按登记表细致填写，登记表应包括标本种类、数量、采集地点、
时间、采集人姓名等。

临床或尸检标本应包括症状、体征、临床诊断、尸检解
剖所见等。

4.做好工作人员的个人防护。

4.10.登记表
附表标本登记表
(李钟铎）
第五节生物战剂检验与鉴定的通用方法
一. 生物战剂的总体检验与鉴定程序
根据标本的性质、现场调研、疫情、临床诊断标本初检结果及情报部门提供的信息确定检验、鉴定程序，但还可根据对标本的性质掌握的程度对鉴定程序进行增减，如无疫情作参考的空气样品或气溶胶污染物可采用如下总体检验、鉴定程序：
待检标本
部分低温保存标本处理病理检查
普通镜检、病理
切片、免疫病理
电镜、分子病理
（初检结果）直接检查洗液、滤液、组织液标本沉淀物、
浓缩悬液（纯化浓缩组织）滤阻物（稀释）
镜检、病理检查直接及加热
ELISA、IFA 加抗菌素处理处理后接种直接检查接种动物增菌培养
TrIFA、血凝、PCR （100℃30min）
(初检结果) 动物接种接种小鼠免疫组化分离细菌
鸡胚接种接种幼猫血凝镜检（纯培养）
细胞接种接种小鸡PCR
（分离病毒(初检结果)
立克次氏体）（查毒素）
凝集、糖发酵串
珠、噬菌体试验、
分离物鉴定药敏试验、补结、
中和、凝集试验、
镜检（革兰氏染
色、荧光抗体染、
色）、表型鉴定、、
PCR、分子生物传代试验、抗菌素敏感试验、核酸型试验学鉴定、流行病
生化试验、物理性状测定、生物学性质测定学分型鉴定
电镜检查、中和、补结、血凝、ELISA、IFA
PCR、分子生物学鉴定
（最终鉴定结果）
（最终鉴定结果）
图1 生物战剂总体鉴定程序
（李钟铎）二.标本的处理
(一)标本的接收
接收标本时，在有防护的实验室中按标本登记记录数据验收，向送标本人了解有关事项，填写标本接收回执，交送标本人返回交送检单位。

附表标本接收回执
(二)媒介昆虫及小动物的标本分类鉴定
对送检的蚤、蜱、蚊、蝇等昆虫及啮齿类小动物应首先分类鉴定，初步鉴定昆虫的目、科、属及种，是否为当地种类，是否有反季节出现特征。

之后按昆虫的种类分组进行病原体分离，其中传播病毒的昆虫有97种。

传播细菌的有5种，传播立克次体的昆虫有8种，虽然有些昆虫既可传播病毒又可传播非病毒的病原体，但仍然是不同病原体以不同昆虫传播为主，如鼠疫耶尔森氏菌以蚤为主，病毒以蚊虫为主。

因此，对昆虫初步鉴定有利于指导病原体分离。

小型动物以鼠类为主，也有一些鸟类等。

小型动物在局部地区可能使用，特别是在一些边境地区更需提防。

初步鉴定后取有关组织进行病原体检查及分离。

1.蚤的处理:
分类后的蚤放1/20万龙胆紫的2%盐水中，三日内检查完，挤压前胃涂片染色检
查。

病原分离一般以蚤捕获地区及种类分组，30-50只为一组，洗2-3次后加少量生理盐水在研磨器中研碎，之后进行培养。

2.蜱的处理:
先用水洗净分类后的蜱，剪断蜱肢作血淋巴涂片，染色检查可检出立克次
体。

分离病原时分组洗去体表杂菌，之后用生理盐水研磨，培养细菌。

进行病毒、立克次体培养时标本需再离心，加抗菌素处理后接种动物。

蜱悬液对组织培养细胞毒性较大。

3.蚊的处理:
分类蚊可冷冻切片荧光染色检查，在肠管细胞内可见病原特异荧光。

分离病毒时，20-30只为一组，研磨、离心、加抗菌素处理，之后接种动物或细胞培养。

悬液对细胞有一定毒性。

4.蝇的处理:
分类后蝇可用培养基洗体表物培养。

吸血蝇则洗去体表菌后加含100单位/ml青霉素的生理盐水研磨后接种动物或种选择培养基中，分离土拉弗朗西丝氏菌等。

(三)血清学检查用标本的处理
所有病人在发病时或住院首日皆取第一份血，需避免溶血和杂菌污染等，在条件许可时现场分离血清后运送急性期血液或血凝块用于病原体分离，需血浆时采血应加肝素等抗凝物质。

(四)病理学检查用标本的处理
病理检查标本采集同其它标本采集一样，最好在专业人员指导下采集。

选择病原体所在部位或病变部位，冷冻切片用组织能在1-2小时内送至实验室者不必固定，4℃运送，不用低温冻存，如果需较长时间方可送至实验室时必须放液氮中保存。

冷冻状态下上机切片。

另外可用10%福尔马林液（中性）或95%乙醇固定，室温下送至实验室进行包埋切片。

(五)抗原直接检查用标本的处理
抗原直接检查主要包括免疫荧光法，酶联免疫，血凝等敏感、快速检测方法。

组织涂片、压印片及脑脊液沉渣、尿沉渣、含漱液沉渣、咽拭子、肛门拭子涂片等，丙酮或乙醇固定后用于荧光免疫检查。

组织液（胸腹水、心包液、脑脊液等），尿、含漱液、各种拭子洗液及其它浓缩处理的标本等可以用敏感的酶联，时间分辨免疫荧光、血凝等方法直接检查抗原。