药用植物学论文格式
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学号:
学生姓名:陈佳园
指导教师:刘少彬
所在学院:生命科学技术学院
专业:生物工程
中国·大庆2013 年 5 月(宋体、三号字)
(宋体、三号字)
(Times new Roman、三号字)
障复康预防大鼠D-半乳糖性白内障
郝智慧
(黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆163319)
摘要:目的观察障复康对大鼠D-半乳糖性白内障的预防作用。方法Wistar大鼠120只随机分为6组。
正常对照组和模型组灌胃生理盐水,阳性对照组灌胃障眼明片,障复康高、中、低3个剂量组灌胃相
应剂量的障复康连续18 d。灌胃给药第4天,除正常对照组以外的各组动物开始腹腔注射质量分数为
50%的D-半乳糖诱发白内障模型, 连续15 d。定期观测晶体混浊程度,造模结束后检测各组大鼠晶体
超氧化物岐化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量。结果障复康3个剂量组均能不同程度地减轻
晶体混浊程度,且能提高晶体SOD活力和MDA含量。结论障复康对大鼠D-半乳糖性白内障有一定
的预防作用,作用强度强于阳性药障眼明。
关键词:半乳糖性白内障;障复康;预防白内障;Wistar大鼠
老年性白内障(senile cataract)是眼科的常见病、多发病,是老年人失明的主要原因。世界卫生组织统计,全世界盲人由白内障引起失明的占40%左右,50-60岁老年性白内障的发病率占60%~70%,70 岁以上者可达80%。而且随着人口老龄化社会的到来,发病率还会增长[1]。白内障发展到视力丧失,虽可手术摘除晶状体,换置人工晶体,但由于多种原因,手术复明并不能广泛适用。所以药物治疗白内障已受到更多的关注[2]。尤其在对白内障发病机理研究更加深入的情况下,药物治疗白内障已成为现实。障复康是由沈阳药科大学中药学院与通化市兴科药物研究开发有限公司联合研制的防治白内障的复方制剂,作者对该药预防半乳糖性白内障进行了实验研究。
1 仪器与材料
YZSEI型裂隙灯显微镜(苏州医疗器械总厂),721A型分光光度计(四川分析仪器厂)。
障复康(黄色干燥粉末,主要由黄芩等组成,每克相当于20 g生药,通化市兴科药物研究开发有限公司提供,批号20021201,用前用蒸馏水配制成混悬液),阳性对照药(障眼明片,广州申一药业有限公司产品,生产批号:F00057,除去糖衣后呈棕褐色,给药前用蒸馏水配成混悬液),D-半乳糖(生化试剂,上海恒信化学试剂有限公司,批号:20030406),硫酸阿托品注射液(含硫酸阿托品5g·L-1,沈阳第一制药厂,批号:940601),超氧化物岐化酶试剂盒、丙二醛试剂盒、考马斯亮兰试剂盒(均购自南京建成生物工程研究所)。
Wistar大鼠,雌雄兼用,体质量100~120 g,沈阳药科大学实验动物中心提供,生产许可证号:SCXK(辽)2003—008。
2 方法
2.1 分组与给药
Wister大鼠120只,随机分成6组,雌雄各半。分别为空白对照组、模型组、阳性药障眼明(ZYM)组、障复康(ZFK)160、80、40 mg·kg-1组。空白对照组和模型组灌胃蒸馏水,阳性对照组灌胃障眼明片(160 mg·kg-1),障复康3组分别灌胃相应剂量的障复康。灌胃剂量均为10ml·kg-1,每天9—11时给药1次,于注射D-半乳糖前3 d开始给药,连续18 d。
2.2 模型制备
除空白对照组外,其余5组大鼠腹腔注射质量分数为50%的D-半乳糖(用生理盐水配制),剂量为10 g·kg-1,每天1次,连续15 d,同时自由引用质量分数为5%的D-半乳糖水(用自来水配制)12 d[3]。
2.3 晶体检查
分别于灌胃给药13 (注射D–半乳糖第10天)、15(注射D–半乳糖第12天)、18 d(注射D–
半乳糖第15天),用硫酸阿托品散瞳后,用裂隙灯显微镜检查大鼠晶体混浊度,并依照表1评分标准[4]得出分值。
Table 1 The standard of score for severity of lens opacity in rats
Phase Degree of lens opacities Score
1 T he lens is clarified0
2A Petty vacuoles emerge at the edge of lens0.1 2B Petty vacuoles occupancy 1/3 pro-cortex of lens0.7 2C Petty vacuoles occupancy 2/3 pro-cortex of lens 1.0
2.0
3 Petty vacuoles deliquesce or appearance opalescence or white
punctiform and himantoid opacity in lens
4 White sporadic and flaky sediment appearances in lens 3.0
5 Core of lens becomes turbid 4.0
6 All of the lens becomes turbid 5.0
2.4晶体SOD活力与MDA含量测定
最后1次给药后6 h将各组大鼠脱臼处死,立即取出双侧眼球,用0~4℃生理盐水冲洗3次,剥离晶体,并用滤纸吸干,放在电子天平上称质量,将双侧晶体放入玻璃匀浆器内,按质量体积比1∶9加入4℃磷酸盐缓冲液,将匀浆器管底部浸入冰水混合物中充分研磨,制成质量分数为10%的晶体匀浆。将匀浆低温离心10 min(3000r·min-1),取出上清液,用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力和硫代巴比妥酸法测定MDA含量[5,6],同时用考马斯亮兰法测定可溶性蛋白含量。测定方法按试剂盒所附说明书操作并计算。
2.5 统计分析
晶体浑浊度分值、晶体SOD活力和MDA含量比较采用组间t检验,用SPSS 12.0统计软件进行数据分析。
3 结果
3.1 障复康对D-半乳糖性白内障大鼠晶体混浊度的影响
结果表明,正常对照组大鼠晶体澄明,无任何病变发生。模型组大鼠在造模期间,晶体混浊度明显上升。障复康各组与模型组比较,晶体混浊上升缓慢,160和80 mg·kg-1剂量组在给药13(造模10 d)、15(造模12 d)、18 d(造模15 d)均有极显著差异;40 mg·kg-1剂量组,在给药13天和第18天有显著差异,在给药15天有极显著差异。且有明显的量效关系,即剂量越高晶体混浊度越低。表明障复康可以延缓D-半乳糖性白内障晶体混浊的发展,作用强度强于等效量的障眼明片,结果见表2。
Table 2. The effect of ZFK on lens opacity in galactose cataract rats(s core of lens opacity, x ±s) Group N(lens)13 d after ip D-galactose15 d after ip D-galactose 18 d after ip D-galactose Control 20 0 0 0
Model 16 0.50±0.24 1.09±0.32 1.85±0.67 ZYM(160mg·kg-1) 18 0.45±0.27 0.81±0.35a 1.32±0.55b
ZFK(160mg·kg-1) 18 0.18±0.16b0.59±0.29b 1.12±0.37b
ZFK(80 mg·kg-1) 18 0.30±0.17b0.61±0.25b 1.200±.36b
ZFK(40 mg·kg-1) 18 0.34±0.20a0.77±0.31b 1.35±0.45a
a-P<0.05,ompared with model; b-P<0.01, compared with model
3.2 障复康对晶体SOD活力和MDA含量的影响