草莓组培实习报告

草莓组培实习报告
草莓组培实习报告

草莓组培实习

华南农业大学李志真

一、实习意义

植物脱毒苗在农业生产中广泛使用对于降低农业生产成本、提高农产品的品质、改善农业的产业结构、提高农民经济收入都有重要的作用。草莓属多年生草本植物,靠生长出的匍匐茎进行营养繁殖,经多年种植后极易感染多种病毒,致使品质及产量降低,经济效益明显下降。利用组培快繁技术可对草莓脱毒苗进行快速繁殖及推广,出苗整齐,可进行周年生产,不受季节限制,实现新品种的工厂化育苗,并迅速推广。因此在草莓组织培养中,掌握草莓脱毒苗的培养与移栽有重要意义。

二、实习内容

实习主要掌握草莓脱毒苗的培养及大田移栽方法。

移栽的适宜温度为15度到25度。环境温度太高,炼苗不易成活,而环境温度太低,则幼苗生长缓慢。因此,炼苗宜在春秋两季温度适宜时进行。冬季也可以在温室内进行炼苗。炼苗时最好使用由透气性能好、保水能力强的蛭石作为基质配制成的培养体系。蛭石无菌无毒,但亦无营养,因此应定期浇以稀释1倍的MS培养液作为营养液代替水进行浇灌,保证脱毒苗营养及水分的供给。

移栽时,先将草莓生根培养瓶上的扎口绳或皮筋松开使组培苗初步接触空气,让植株开始长出角质层。时间约为2~3d。然后移去瓶口包扎物,让组培苗充分接触空气,2~3d后,组培苗对外界环境已逐渐适应,且培养基已开始长出菌类,此时进行组培苗的出瓶炼苗。首先,小心地用镊子夹持组培苗将苗从瓶中移出,用流水慢慢冲净植株根部的培养基,注意切勿伤及根部的根毛,小心地将洗净的脱毒苗移栽到事先已经灭菌处理过的苗床上。栽苗的深度要做到,浅不露根,深不埋心,浇足水,并用塑料膜进行覆盖使棚内的相对湿度保持在80%左右,以后定期放风,逐渐降低棚内的相对湿度,直至将塑料膜去掉。

于4月上旬选择透气性良好、疏松肥沃的土壤种植脱毒草莓苗,行距、株距各为1m,浇足水,并用防虫网进行覆盖,防止病虫害感染传毒。于9月上旬取健壮的匍匐茎苗进行大田移栽。

三、实习收获

本次实习中我们亲自动手进行组培苗的接种,之后师兄帮我们炼苗,最后我们又实地进行移栽。通过实习,我们掌握了草莓组织培养技术、移栽的过程方法,虽然与产业化的标准操作有些差异,但还是对草莓苗的产业化的生产有了一定的了解。在实验过程中,锻炼了我们的动手能力,合作能力。也让我们将课堂上学到的知识与实践相结合,丰富了我们专业课的学习生活。

最后特别感谢在实习过程中老师和师兄给予我们的帮助!

草莓组培

1、取材。每年的6-8月,选择植株生长健壮,匍匐茎充实,尖端生长良好,无病虫害的优良植株取其茎尖或花药,作为组织培养的外植体。 2、消毒。材料取来修整后用纱布包好放在自来水龙头下冲洗2-4小时(以茎尖为例),然后进行表面消毒。先用70%酒精漂洗半分钟,然后用0.1%的新洁尔灭浸泡15-20分钟,再用0.1%的升汞(氯化汞)消毒5-8分钟,最后用1-2%的过氧乙酸消毒1分钟。每次都要用无菌水冲洗3-4次后再进行下一次消毒。整个消毒过程都应在超净工作台内完成。 3、接种。接种在超净工作台内进行,接种前要先用酒精灯对接种用具(镊子、接种针、接种架等)消毒自然放凉。先用镊子一层层的剥去茎尖外的幼叶和鳞片,然后在解剖镜下找到生长点(可带1-2个叶原基)用接种针挑出生长点(小于0.5毫米),放入事先准备好的盛有培养基的培养瓶内,封好瓶口,置于培养室内培养成小植株。 4、室内培养。培养室要求干净清洁,室内装有紫外线杀菌灯,每天要对室内进行消毒,以防污染。培养温度20-28℃,最适温度25℃,相对湿度70%,光照强度1000-2000勒克斯,每日光照10小时左右。 5、继代培养。每培养25-30天,培养瓶内的小植株就会分出3-5个小植株,把这些小植株分出放于继代培养基内培养;过20-30天后又会长出小植株,如此反复进行继代培养,增加繁殖系数。 6、诱导生根。根据生产需要可在1-2月份集中一批苗子生根。草莓试管苗生根很容易,有的在继代培养基上便可生根。或者在培养基中加入0.5毫克/升的LBA,经30天左右便可长出6-10条长约2-3厘米的小根。 7、温室驯化。把生好根的小苗经光照锻炼7-10天,从试管内取出,洗净根部培养基,移栽入事先准备好的营养土内,使其逐渐长大发出5-6片新叶的过程称为驯化。驯化用的营养土要求土质以疏松的沙土掺入少量有机质。移栽后要浇透水,支小拱棚覆盖塑料薄膜保湿。驯化温度以15-20℃,前两周空气相对湿度80-100%,第三周开始短时间放风,放风强度逐渐加大,至移栽后第四周可去掉覆盖物。根据情况每天或隔天喷水一次,保持土壤湿润而不积水为宜。驯化一般需2-3个月即可移出。经病毒鉴定,确认无毒后放入网纱大棚内繁殖。 8、病毒鉴定和检验。草莓无病毒苗的鉴定检验手段是采用小叶嫁接法、蚜虫接种鉴定法和电子显微镜检测法。利用电子显微镜检测草莓病毒比前两种更直观,而且速度快。其方法是利用负染色法及超薄切片法处理待测叶片,然后在电子显微镜下观察,如果被测叶片中含有较多病毒颗粒子,可被直接观察到。经检验确认无毒的草莓苗移入网纱大棚进行繁殖。 9、网纱大棚内繁殖。草莓病毒的传播主要靠蚜虫、飞虱等虫媒传播。把无

草莓组织培养

草莓的组织培养 一、茎尖 1.概述通过对草莓茎尖离体培养的试验研究表明:取草莓茎尖为外植体,以0.35 mm大小为宜;用MS+0.5 mg/L 6-BA+O.2 mg/L NAA培养基. 不定芽再生率高;以1/2 MS+O.1 mg/L IBA 生根效果最好。 2.结论(1)再生途径:草莓刚抽出的匍匐茎的茎尖 (2)灭菌方法:洗去泥土、灰尘,再用自来水冲淋2~3h,置超净工作台上进行75 ﹪乙醇和0.1 升汞不同时间的灭菌处理,最后用无菌水冲洗5~8次,接种于诱导培养基中。诱导培养基为MS+0.5 mg/L6一BA+0.2mg/L NAA+3 蔗糖(w/v)+0.5﹪卡拉胶,pH值为5.6~5.8。每个灭菌处理接种2O枚外植体,l5d后观察记录外植体的污染、死亡、无菌成活生长等情况。 (3)培养基: ①芽诱导试验,于MS培养基附加0.2 mg/L NAA、IAA、IBA不同种类生长素的培养基中,20d后调查记录幼芽分化情况。 ②继代培养与扩大繁殖,MS培养基附加0.5 mg/L6-BA、0.01 mg/L NAA。 ③根诱导试验, 用1/2 MS附加不同浓度(mg/I )IBA 有0.05、0.1、0.2、0.5及不加IBA的5个处理. (3)条件:培养基均在1~ 1.1大气压下热压灭菌20min。培养温度(25± 2)℃。每日光照12h,光强2 000Lux。 (1)再生途径:用其花药、花蕾、叶、叶柄、子叶、下胚轴等作外植体进行离体培养。 (2)灭菌方法:洗去泥土、灰尘,再用自来水冲淋2~3h,置超净工作台上进行75 ﹪乙醇和0.1 升汞不同时间的灭菌处理. (3)培养基:①MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L(浓度单位,下同);②MS+6一BA0.5+KT 0.5;③MS+BA2.0+IAA 1.0;④MS+BA2.0+NAA0.5+2,4-D0.1;⑤MS+BA2.0+IBA0.1。以上培养基各加CH 100 mg/L,蔗糖20g/ L(①为30g/ L)。 ①用于花药诱导培养基; ②用于花药幺伤组织分化培养; ③、④用于其余5种外植体(叶盘、叶柄、下胚轴、子叶、花蕾)诱导培养;⑤仅用于花蕾培养。 (4)条件:培养条件均为12 h光照12 h黑暗。光强度1200-1500lx、温度(25 ±2)℃。 三、叶片以红颊、章姬、丰香草莓叶片为试材,对影响草莓叶片不定芽再生的主要因素进行了试验研究,建立了草莓离体叶片的再生体系。试验结果表明,基因型、不同激素种类和配比直接影响了草莓叶片再生芽的发生。基因型是影响草莓叶片再生能力的决定因素,不同激素配比是不定芽产生的关键因素。 叶片愈伤组织的诱导培养基以MS+TDZ 2~3mg/1较理想, 芽伸长的理想培养基为MS+6一BA 0.3~O.5mg/l, 生根培养基以1/2MS+IBA0.3mg/1较适宜,移栽成活率可达90%以上。 2.结论(1)再生途径:先采取当年生匍匐茎茎尖培养繁殖,建立起三个品种的无性繁殖系;再从继代3周的无菌苗上剪取叶片作为外植体,进行不同的处理,每瓶接10片叶盘,每处理重复5瓶。 (2)灭菌方法:于121℃下高温高压蒸汽灭菌20min。

草莓组织培养研究进展

草莓组织培养 [摘要] 从草莓组织培养类型(草莓茎尖组织培养、草莓花药培养、草莓叶片、叶柄组织培养)开始,介绍了近几十年国内外草莓组培的研究现状和进展。 [关键词]草莓;组织培养; 草莓是蔷薇科草莓属多年生草本植物,是世界上七大水果之一,素有“水果皇后”的美称。草莓果实色泽艳丽,芳香多汁,酸甜适度,鲜美可口,营养丰富,每百克果实内含有蛋白质1g,脂肪0.6g,糖4~12g,酸0.8~2g,无机盐0.6g,粗纤维1.5g,Vc45~120mg,比苹果和葡萄高10多倍,并含有丰富的磷、钙、铁、锌等矿物质,其中锌的含量是香蕉的4倍以上,比柑橘高6倍以上,比苹果高40倍以上。另外食用草莓对肠胃病和贫血病有一定的疗效,对促进智力发育有重要作用。深受国内外消费者的喜爱。草莓作为一种栽培周期短、结果早、见效快的经济作物,近15年来在我国发展迅猛,中国园艺学会草莓分会统计2003年底,我国草莓总面积和总产量均跃居世界第一位。在浆果中,草莓的总产量和总面积仅次于葡萄,成为我国发展农村经济,促进农民增收的重要经济作物。 随着草莓在国内栽培面积的扩大和种植年限的延长,草莓的病毒病严重影响草莓的生产。作为高级浆果的草莓,在我国目前的生产栽培上多沿用无性繁殖种苗:主要方法是匍匐茎繁殖和分株繁殖,但这两种方法效率低、种苗易退化、易造成病毒蔓延。王国平(1988)等调查,我国栽培草莓带病毒植株率过80%以上,戴子林(1995)等调查,我国长江流域感染大面积植株感染率在50%以上;感染了病毒病的草莓果子一年比一年小、畸形、品质差、生长缓慢,一般减产30%-80%,并逐年加重;严重影响草莓的长势、品质和产量,对病毒病目前还没有药剂可以防治。 通过草莓组织培养扩繁草莓脱毒苗,可以解决上述问题。近年来在草莓种苗生产中,有关草莓组培快繁技术的研究备受人们的重视,本文就草莓组织培养研究与应用作一综述。 一、常见草莓组织培养类型 目前,国内外在草莓品种快速繁殖上已有不少报道:常用的外植体主要有:茎尖(Adam,1972;庆子孝,1972;谭兰英等,1981)、腋芽(Boxus,1974、1977;杨乃博,1981)、叶片、叶柄、茎段,花药(Quak,1977;大泽,1972)。常见的草莓组织培养主要的类型:草莓茎尖组织培养、草莓叶片和叶柄组织培养、

草莓组培苗工厂化生产的可行性报告

草莓组培苗工厂化生产的可行性报告 学科专业植物细胞工程__ 指导老师范淑芳___ 班级生物技术及应用(1)班 学号 2070307030142 姓名关前军_ _

草莓组培苗工厂化生产的可行性报告 草莓(Fragaria ananassaDuch)属蔷薇科、草莓属,多年生草本植物,在 世界小浆果生产中荣居榜首。含丰富蛋白质、无机盐、维生素C等营养物质, 食之柔软多汁、酸甜适度、芳香浓郁,深受消费者喜爱。草莓传统繁殖方法通 常用匍匐茎分株繁殖,此法繁殖速度慢,而且极易感染病毒,母本苗栽植1年 后即可被蚜传病毒感染,减产可达20%以上,高者可达60%,染毒植株果小、含 糖量低,降低商品价值和食用价值。利用组培育苗,不仅繁殖速度快,而且可获 得无毒植株。 1 项目背景 1、1 组培苗工厂化生产受限原因 ①组培生产设备、设施投资大,生产耗费高,导致产品成本较高; ②专业人才少,从业者缺乏生产和管理经验,难以对生产工艺流程进行完 善和优化; ③消费者对组培苗的认识不足,产品营销受市场制约严重,价格偏低,限 制了组培苗工厂化生产的发展; ④由于组培技术水平的限制,试管苗生产性能不稳定或难以预知,造成消 费者不敢大批量应用于生产。 1、2 社会需求 脱毒草莓苗具有出生长快,长势旺,茎叶粗壮,繁殖系数高的优良特征,同时具有果子外观好,色泽鲜红,均匀整齐,增产效益高和植株抗病能力强,等许多优点。草莓脱毒苗在生产上极明显的增产效益可连续保持三年以上,是目前农业调整产业结构,发展高效益农业的理想经济作物,故各地果农对脱毒草莓的需求巨大。 1、3 发展前景 草莓是国外最受欢迎的保健水果,具有不断增长的出口需求和发展前景草莓被欧美国家誉为“水果皇后”,不仅含有比其他水果高10倍的维生素,而且果实中所含的鞣花酸具有抗癌效果,因此在欧美市场十分畅销,售价是苹果的5倍、葡萄的2倍,而且供不应求。脱毒草莓具有科技含量高、栽培容易、增产效

草莓组织培养研究进展

[摘要] 从草莓组织培养类型(草莓茎尖组织培养、草莓花药培养、草莓叶片、叶柄组织培养)开始,介绍了近几十年国内外草莓组培的研究现状和进展。 [关键词]草莓;组织培养; 草莓是蔷薇科草莓属多年生草本植物,是世界上七大水果之一,素有“水果皇后”的美称。草莓果实色泽艳丽,芳香多汁,酸甜适度,鲜美可口,营养丰富,每百克果实内含有蛋白质1g,脂肪,糖4~12g,酸~2g,无机盐,粗纤维,Vc45~120mg,比苹果和葡萄高10多倍,并含有丰富的磷、钙、铁、锌等矿物质,其中锌的含量是香蕉的4倍以上,比柑橘高6倍以上,比苹果高40倍以上。另外食用草莓对肠胃病和贫血病有一定的疗效,对促进智力发育有重要作用。深受国内外消费者的喜爱。草莓作为一种栽培周期短、结果早、见效快的经济作物,近15年来在我国发展迅猛,中国园艺学会草莓分会统计2003年底,我国草莓总面积和总产量均跃居世界第一位。在浆果中,草莓的总产量和总面积仅次于葡萄,成为我国发展农村经济,促进农民增收的重要经济作物。 随着草莓在国内栽培面积的扩大和种植年限的延长,草莓的病毒病严重影响草莓的生产。作为高级浆果的草莓,在我国目前的生产栽培上多沿用无性繁殖种苗:主要方法是匍匐茎繁殖和分株繁殖,但这两种方法效率低、种苗易退化、易造成病毒蔓延。王国平(1988)等调查,我国栽培草莓带病毒植株率过80%以上,戴子林(1995)等调查,我国长江流域感染大面积植株感染率在50%以上;感染了病毒病的草莓果子一年比一年小、畸形、品质差、生长缓慢,一般减产30%-80%,并逐年加重;严重影响草莓的长势、品质和产量,对病毒病目前还没有药剂可以防治。 通过草莓组织培养扩繁草莓脱毒苗,可以解决上述问题。近年来在草莓种苗生产中,有关草莓组培快繁技术的研究备受人们的重视,本文就草莓组织培养研究与应用作一综述。 一、常见草莓组织培养类型 目前,国内外在草莓品种快速繁殖上已有不少报道:常用的外植体主要有:茎尖(Adam,1972;庆子孝,1972;谭兰英等,1981)、腋芽(Boxus,1974、1977;杨乃博,1981)、叶片、叶柄、茎段,花药(Quak,1977;大泽,1972)。常见的草莓组织培养主要的类型:草莓茎尖组织培养、草莓叶片和叶柄组织培养、

草莓组培苗工厂化生产的可行性报告

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草莓(Fragaria ananassaDuch)属蔷薇科、草莓属,多年生草本植物,在 世界小浆果生产中荣居榜首。含丰富蛋白质、无机盐、维生素C等营养物质, 食之柔软多汁、酸甜适度、芳香浓郁,深受消费者喜爱。草莓传统繁殖方法通 常用匍匐茎分株繁殖,此法繁殖速度慢,而且极易感染病毒,母本苗栽植1年 后即可被蚜传病毒感染,减产可达20%以上,高者可达60%,染毒植株果小、含 糖量低,降低商品价值和食用价值。利用组培育苗,不仅繁殖速度快,而且可获 得无毒植株。 1 项目背景 1、1 组培苗工厂化生产受限原因 ①组培生产设备、设施投资大,生产耗费高,导致产品成本较高; ②专业人才少,从业者缺乏生产和管理经验,难以对生产工艺流程进行完 善和优化; ③消费者对组培苗的认识不足,产品营销受市场制约严重,价格偏低,限 制了组培苗工厂化生产的发展; ④由于组培技术水平的限制,试管苗生产性能不稳定或难以预知,造成消 费者不敢大批量应用于生产。 1、2 社会需求 脱毒草莓苗具有出生长快,长势旺,茎叶粗壮,繁殖系数高的优良特征,同时具有果子外观好,色泽鲜红,均匀整齐,增产效益高和植株抗病能力强,等许多优点。草莓脱毒苗在生产上极明显的增产效益可连续保持三年以上,是目前农业调整产业结构,发展高效益农业的理想经济作物,故各地果农对脱毒草莓的需求巨大。 1、3 发展前景 草莓是国外最受欢迎的保健水果,具有不断增长的出口需求和发展前景草莓被欧美国家誉为“水果皇后”,不仅含有比其他水果高10倍的维生素,而且果实中所含的鞣花酸具有抗癌效果,因此在欧美市场十分畅销,售价是苹果的5倍、葡萄的2倍,而且供不应求。脱毒草莓具有科技含量高、栽培容易、增产效果显著、周期短、没有风险和经济效益高等特点,为满足日益增长的社会需求,脱毒草莓苗是发展我国高效农业和绿色有机农业的首选经济作物。 2 生产规模的确定

草莓的组织培养

草莓的组织培养 草莓( Fr agaria ananassa Duch)是蔷薇科草莓属宿根性多年生草本植物,为世界性水果,其栽培面积和产量在世界浆果类水果生产中仅次于葡萄.草莓具有适应性广、栽培容易、结果早、产量高、收益好等优点,是一种经济价值较高的天然高档食品,除供鲜食外,还可加工成罐头、酱、酒、饮料等制品,并有较高的医疗保健作用.因此,全国各地都在积极引种. 一、茎尖组织培养 1.文章概述: 何欢乐, 阳静, 蔡润, 潘俊松等人以草莓匍匐茎为材料,截取3~4cm长的顶端.在双筒解剖镜下由外向内逐层剥去幼叶,直至闪亮半圆球的顶端分生组织充分暴露出来.切取 1.0mm的茎尖接种到MS培养基(3%蔗糖,8%琼脂,pH值为5.6)上,培养容器为100ml的玻璃瓶.培养基放30~40ml/瓶.茎尖培养通常先形成愈伤组织,再长出不定芽,经不定芽增殖形成植株. 2.结论 (1) 发生途径:选生长不久的草莓茎尖——材料处理及消毒——接种——培养——继代培养——生根. (2) 灭菌方法:自田间选取健壮草莓母株上生长充实而小叶尚为展开的匍匐茎顶端约3~4cm长的顶芽,用自来水冲洗2~3h后,在超净台上进行灭菌处理,先用小镊子将匍匐茎的外部大叶摘除,再用70%酒精快速处理30s,用饱和漂白精液浸泡15min,然后用无菌水冲洗3~5遍. (3) 培养基: 诱导草莓茎尖成活与生长的最适培养基为+BA 0.5mg/L. 丛生芽的增殖,最优的增殖培养基以MS+BA 0.5mg/L为好. 草莓是比较容易在培养基上生根的植物,其生根不需要任何激素 刺激,只需1/2 MS 就可达到最好的生根效果. (4) 条件:光照31.25umol/m2/s,14 h/d,温度25±2℃. 二、草莓叶片培养 草莓品种改良多采用常规杂交育种技术,由于草莓的高杂合性和多倍性,使得杂交育种工作周期长、工作量大,而且目标性状常与不良性状连锁,造成育种效率低.生物技术作为现今植物改良的有效手段极大地推动了草莓育种工作的进程.自

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