非结核分枝杆菌菌种鉴定方法
DNA测序鉴定非结核分枝杆菌的研究进展
非结核分枝杆菌(nontuberculous Mycobacteria, NTM)系指除了结核分枝杆菌复合群和麻风分枝杆菌外的一大类分枝杆菌的总称。
NTM种类繁多,迄今已发现160余种,通常采用Runyon分类法(NTM在试管内的生长温度、速度、菌落形态和色素产生与光反应关系)将NTM分为光产色菌、暗产色菌、不产色菌及快速生长分枝杆菌4组[1]。
NTM广泛存在于自然环境中,主要通过水和土壤传播,极少数为致病菌,多数为条件致病菌,人通过环境接触感染NTM而患病[2-3]。
近期的研究显示,NTM的分离率由4.3%(1979年统计)上升至11.1%(2000年统计),再到21.0%(2010年统计)[4],这反映出我国的NTM病患者呈明显增多趋势。
NTM病与结核病的临床表现相似,多表现为全身中毒症状和局部损害,主要累及肺、淋巴结、皮肤及免疫受损患者,若能及时鉴定出菌种甚至亚种,可减少误诊,进而降低因误诊导致的不良后果[2,5]。
不同种类NTM感染采用的治疗方案亦不同,因此,明确NTM 是否感染及鉴定出准确的亚种是拟定最佳诊疗方案的关键。
NTM的实验室检测方法主要是传统细菌学检测和分子生物学检测,传统检测方法(培养基培养后辅以生化试验)因简单、试剂价格合理且易于推广而被沿用至今,但其耗时长、阳性率低、污染大且缺乏可重复性,不能准确、及时地为临床诊断提供参考[6]。
随着分子生物学技术的迅速发展,利用NTM同源DNA序列中的特异性可以鉴定其菌种甚至亚种,这为临床诊DNA测序鉴定非结核分枝杆菌的研究进展陈培幸韶关学院医学院,广东韶关512005[摘要]非结核分枝杆菌(NTM)感染的患者数量逐年增加,同时,NTM新的亚种不断被发现,这导致其检测鉴定难度也随之增加。
迄今发现的菌种已有160余种,而传统检测方法(培养基培养后辅以生化试验)不能准确、及时地为临床诊断提供参考。
随着分子生物学技术的迅速发展,利用NTM同源DNA序列中的特异性(如16S核糖体DNA、核糖体蛋白S1、转录间区序列1、热休克蛋白65、rpo B等)可以快速鉴定菌种。
DNA测序鉴定非结核分枝杆菌的研究进展
DNA测序鉴定非结核分枝杆菌的研究进展1. 引言1.1 背景介绍非结核分枝杆菌是一种常见的细菌，是导致一些肺部感染的主要病原体之一。
由于非结核分枝杆菌的增殖速度较慢，疾病的发展进程也较缓慢，因此经常导致诊断和治疗上的困难。
传统的检测方法包括培养和荧光染色技术，然而这些方法存在耗时长、操作复杂、准确性不高等缺点。
随着DNA测序技术的快速发展，研究人员开始将其应用于非结核分枝杆菌的鉴定和诊断。
DNA测序技术可以准确快速地鉴定非结核分枝杆菌的种类和亚种，有望解决传统方法的局限性。
DNA测序技术还可以帮助研究人员了解非结核分枝杆菌的耐药性、毒力和传播途径，为疾病的控制和预防提供重要的参考。
开展DNA测序技术在非结核分枝杆菌研究中的应用具有重要的意义和价值。
1.2 研究意义研究意义：非结核分枝杆菌是导致结核病以外的各种疾病的病原体，其种类繁多且耐药性强，给公共卫生和临床诊断治疗带来了很大挑战。
传统的分枝杆菌鉴定方法繁琐且耗时，往往不能满足快速、准确的检测需求。
而DNA测序技术的出现为非结核分枝杆菌的快速鉴定提供了新的可能性，具有高度的准确性和灵敏度。
通过对非结核分枝杆菌基因组进行测序分析，可以更准确地确定其种属和毒力基因，为疾病的防控和治疗提供重要的依据。
深入研究DNA测序技术在非结核分枝杆菌鉴定中的应用及其优势与局限性，对于提高疾病的早期诊断和治疗效果具有重要的意义。
本文旨在系统总结目前相关研究进展，分析影响因素，并展望未来研究的发展方向，以期为该领域的进一步探索提供参考。
2. 正文2.1 DNA测序技术在非结核分枝杆菌鉴定中的应用DNA测序技术已经成为非结核分枝杆菌鉴定领域中一种非常有效的工具。
通过DNA测序技术，可以准确地确定非结核分枝杆菌的物种和亚型。
在传统方法中，分枝杆菌的鉴定主要依赖于生化试剂盒检测和细菌培养，这些方法存在着较高的误差率和耗时较长的缺点。
而DNA测序技术则可以准确且快速地对非结核分枝杆菌进行鉴定，提高了鉴定的准确性和效率。
040分枝杆菌菌种鉴定标准规程
1.分枝杆菌菌种初步鉴定：1.1试剂：见培养基配制标准程序1.2 接种方法:与药物敏感试验相同，10-2mg／ml菌液，接种0.1ml。
37℃孵育，每周观一次，快速生长非结核分枝杆菌一周内可生长菌落，缓慢生长分枝杆菌，四周报告结果。
与药物敏感性试验同步进行。
1.3 结果与报告分枝杆菌菌种初步鉴定结果见表PNB TCH牛分枝杆菌 - -结核分枝杆菌 - +非结核分枝杆菌 + +参考文献:结核病诊断细菌学检验规程2.分枝杆菌菌种系统鉴定：临床分离分枝杆菌菌株，经PNB、TCH等鉴别培养基初步鉴定后，确定为非结核分枝杆菌者或药物敏感试验耐PAS的分离菌株，以及临床提出需作菌种鉴定的菌株，可按下列方法进行系统鉴定。
2.1 培养特性2.1.1 生长速度接种原始分离株的次级培养物10-2mg／ml菌液0.1ml于改良罗氏培养基上，分别置于37℃;45℃和28℃孵育，一周之内生长菌落者为快速生长分枝杆菌。
一周后生长者为缓慢生长分枝杆菌。
2.1.2色素产生将分离菌株接种两支改良罗氏培养基，一支用锡纸或黑纸包缠密封，另一支不包纸，二者一起放入37℃孵育，待不包纸管长出菌落时，开启包纸管观察，有色素产生为暗产色菌。
无色素者，开启试管胶塞通气，以100瓦钨灯泡在相距450cm处照射2—3h，继续放37℃孵育3天，每天观察一次，产生色素者则为光产色菌。
不论照光与否，菌落均无色素产生者为不产色菌。
2.2 生化试验2.2.2 耐热触酶试验（1）原理：有些分枝杆菌经68℃处理后，产生的过氧化氢酶仍保持活性，可分解过氧化氢。
（2）试剂：a)pH7.0 1／15M磷酸盐缓冲液(PB)b)30％过氧化氢溶液(H202)c)10％吐温一80溶液 121℃ 10min灭菌，4℃保存。
(3) 方法：取生长在改良罗氏培养基3—4周的菌落磨菌比浊制备10mg／ml 菌悬液，取0.5ml混悬于含试剂(1)1.0ml试管内，放入68℃水浴20min，待冷却后，缓缓滴加37％H202与10％吐温-80等量混合液0.5ml(此液临用前配制)。
非结核分枝杆菌病 诊断与处理详细讲解
非结核分枝杆菌病诊断与处理详细讲解非结核分枝杆菌病（Non-Tuberculosis Mycobacterium，简称NTM），是由非结核分枝杆菌引起的一类感染性疾病。
与结核病不同，NTM病往往在免疫功能低下的个体中发生。
NTM病病程相对较长，症状多样，通常不会自愈。
如果不及时进行诊断和治疗，将对患者的健康产生严重影响。
本文将详细讲解NTM病的诊断与处理。
一、诊断NTM病的诊断主要依靠以下几个方面：病史调查、临床表现分析、实验室检查以及影像学检查等。
1. 病史调查：患者的个人病史对于NTM病的诊断非常重要。
医生需要了解患者的基本信息、既往病史以及可能的风险因素，例如是否有免疫功能低下等。
2. 临床表现分析：NTM病的临床表现多样，常见的症状包括咳嗽、咳痰、乏力、发热等。
这些症状不容忽视，特别是对于长期咳嗽伴有咳痰的患者。
医生需要结合患者的具体表现来判断是否需要进行NTM病的进一步检查。
3. 实验室检查：实验室检查是确定NTM病诊断的重要手段之一。
目前常见的实验室检查方法有痰液培养、DNA检测、中和试验等。
其中痰液培养是最常用的检查方法，可以通过培养痰液样本中的分枝杆菌来确定是否感染NTM。
此外，DNA检测和中和试验也可以用来确认NTM病的诊断。
4. 影像学检查：影像学检查在NTM病的诊断中起到重要的辅助作用。
常见的影像学检查方法有X线胸片、胸部CT等。
NTM病在影像学上通常表现为肺部或其他器官的结节、空洞、磨玻璃样阴影等。
医生可以通过影像学检查来确定病变的范围和程度，为进一步治疗提供依据。
二、处理NTM病的处理主要包括药物治疗、免疫调节治疗以及手术治疗等。
具体处理方案应根据患者的具体情况来制定。
1. 药物治疗：药物治疗是NTM病的主要治疗方法。
常用的抗生素有环丙沙星、利福平、乙胺丁醇、吡嗪酮等。
治疗方案应根据病原菌的类型、感染部位、药敏试验结果以及患者的肝肾功能等因素来确定。
药物治疗一般需要长期进行，通常持续数月甚至数年。
非结核分枝杆菌的菌种鉴定方法课件
3
分子生物学方法
该方法准确度高、速度快，但需要昂贵的仪器 和试剂，且操作复杂。
实验数据的处理方式
数据分析
利用统计学方法和计算机技术对 实验数据进行处理和分析，以获 得更准确的鉴定结果。
数据标准化
将实验数据进行标准化处理，以 消除误差和偏差，提高数据质量 。
数据可视化
将实验数据进行可视化处理，以 直观地展示数据变化趋势和结果 ，方便实验人员分析和比较。
双向电泳鉴定
总结词
双向电泳是一种分离蛋白质混合物的方法，通过在两个方向上对蛋白质进行 电泳分离，从而获得蛋白质的详细信息。
详细描述
在双向电泳中，蛋白质首先在第一个方向上进行电泳分离，然后在第二个方 向上进行电泳分离。这样可以获得蛋白质的详细信息，如分子量、等电点、 糖基化等，从而进行蛋白质鉴定。
蛋白质芯片鉴定
THANKS
基因芯片鉴定具有高灵敏度、高特异性、可重复性好等优 点，适用于临床和环境样本中多种细菌的鉴定。
04
蛋白质分析鉴定方法
质谱鉴定
总结词
质谱鉴定是一种常用于蛋白质分析的方法，通过将蛋白质离 子化并将其引入质谱中进行测量，从而获得蛋白质的结构和 相对分子质量等信息。
详细描述
质谱鉴定的原理是将蛋白质分子电离并使其进入磁场或电场 中运动，根据其质量和电荷比值的不同，形成不同的离子峰 。通过对离子峰的分析，可以获得蛋白质的结构和相对分子 质量等信息，从而进行蛋白质鉴定。
05
比较分析鉴定方法
进化树比较鉴定
总结词
同源性分析、遗传距离分析、系统发生树构建
详细描述
通过序列比对，找出非结核分枝杆菌菌种间的遗传差异，构建进化树，根据 菌种在进化树上的亲缘关系进行鉴定
非结核性分枝杆菌病,非结核性分枝杆菌病的症状,非结核性分枝杆菌病治疗【专业知识】
非结核性分枝杆菌病,非结核性分枝杆菌病的症状,非结核性分枝杆菌病治疗【专业知识】疾病简介非结核性分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria，NTM)系指分枝杆菌属中，除结核分枝杆菌复合群(人型、牛型、非洲型和田鼠型结核分枝杆菌)和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌，由NTM引起的疾病称为非结核性分枝杆菌病(disease caused by NTM)。
近年来由于检出率逐渐增多，相应的对其引起的各种疾病的认识也在逐渐提高。
非结核性分枝杆菌中大多数为腐物寄生菌，毒力低，属于条件致病菌。
非结核性分枝杆菌病的症状可有肺内、肺外之分，肺外感染可涉及皮肤、骨骼和淋巴结等。
疾病病因一、发病原因NTM以前曾命名为副结核杆菌、假性结核菌、无名分枝杆菌、未分类分枝杆菌、野种分枝杆菌、机会性分枝杆菌、非典型抗酸杆菌等。
NTM迄今已发现有100多种，其中37种已见致病病例的报道。
根据伯杰系统细菌学手册(Bergys manual of systematic bacteriology)将NTM分为快速生长型和缓慢生长型两大类，其中经国际细菌命名委员会审定的42种。
NTM广泛分布于自然界的土壤、尘埃、流水和生牛奶中。
显微镜下NTM形态与结核杆菌相似，抗酸染色呈红色，但在培养、生化特性与结核杆菌不同。
可根据NTM在固体培养基上的生长速度与光线对其产生色素的影响，Runyon分类法则将其分为以下四个群：Ⅰ群为光产色菌(photochromogen)，有堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌、猿分枝杆菌及亚洲分枝杆菌等，其中前两种为致病菌。
Ⅱ群为暗产色菌(scotochromogen)，有瘰疬分枝杆菌、苏加分枝杆菌、戈登分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌。
Ⅲ群为不产色菌(achromatic mycobaterium) ，有鸟分枝杆菌复合群(M.avium complex，MAIC)、胞内分枝杆菌、溃疡分枝杆菌、玛尔摩分枝杆菌、嗜血分枝杆菌(M.hemophilum)、土地分枝杆菌。
非结核分枝杆菌的菌种鉴定方法课件
基于表型特征的鉴定方法传统生物学鉴定法基于菌落形态、染色特性、生化反应等表型特征进行鉴定鉴定时间长，主观误差较大自动化仪器鉴定法基于自动化仪器检测进行菌种鉴定，提高准确性和效率仪器成本高，普及程度有限基于分子生物学的鉴定方法基于基因序列的鉴定法对菌种进行基因序列分析，比对已知基因型，确定菌种分类准确度高，可检测未知菌种基于基因芯片的鉴定法利用基因芯片技术检测菌种的特异性和基因表达情况快速简便，可检测多种菌种
xx年xx月xx日
非结核分枝杆菌的菌种鉴定方法课件
CATALOGUE
目录
绪论基础知识非结核分枝杆菌的分离与培养生理生化鉴定分子生物学鉴定临床意义与防治策略复习与思考
绪论
01
1
课程背景
2
3
非结核分枝杆菌（NTM）的感染病例逐年增加
NTM对常用抗结核药物产生多重耐药性，治疗难度大
菌种鉴定对于诊断NTM感染、指导治疗和防控传播具有重要意义
诊断和治疗
02
提高诊断准确性，及时采集标本进行培养、分离、药敏试验等；根据药敏试验结果选择敏感抗生素治疗，并密切监测病情变化。
耐药性监测
03
建立耐药性监测系统，及时发现和隔离耐药菌株，控制耐药性的传播。
疫苗研究
研究新型疫苗，提高疫苗的保护效果和覆盖面。
耐药性机制
深入研究耐药性产生和传播机制，为耐药性的防控提供理论依据。
非结核分枝杆菌的分布
广泛存在于自然环境中，如土壤、水源、动物等。
非结核分枝杆菌的种类与分布
菌种鉴定基本流程
通过培养基分离纯培养物。
菌种分离
初步鉴定
生理生化鉴定
分子生物学鉴定
根据菌落特征、细胞形态等初步判断菌种类型。
进行一系列生理生化实验，如氧化酶试验、硝酸盐还原试验等，进一步确定菌种类型。
非结核分枝杆菌的实验室鉴定方法学进展
侵犯人体肺脏 、 淋 巴结 、 骨骼 、 关节 、 皮 肤 和 软 组 织 等组 织 器 官 ， 并 可 引起 全 身 播 散 性 疾 病 。 近 年 来 ， 由 于 ＡＩ Ｄ Ｓ患 者 、 长 期 使
ｍＩ 为 实验 界 限浓 度 ， 并辅以 ２ ８℃ 生 长 试 验 ， 耐 ６ ８ ℃热 触 酶 试
１ ． ２ ． １ Ｐ Ｃ Ｒ － 寡核苷酸探 针阵列技术
Ｐ Ｃ Ｒ 一 寡 核 苷 酸 探 针 阵
列 技 术 借 助 反 向 斑 点 杂 交 核 酸 分 子 杂 交 配 对 的 特 性 对 ＤＮ Ａ 样 品的 序 列 信 息 进 行 分 析 。 梁 建 琴 等 Ⅲ ７ 先 通过 Ｐ Ｃ Ｒ — Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ初 步分析 鉴定 ２ ５ ３株 分 枝 杆 菌 临 床 分 离 株 ， 再根据 １ ６ Ｓ ｒ ＲＮ Ａ Ｐ Ｃ Ｒ 一 寡核苷酸探针 与待测菌 株生物 素标记 的 １ ６ Ｓ ｒ Ｒ ＮＡ 基 因
非结核分枝杆菌 （ ＮＴ Ｍ） 是指 除结核 分枝杆 菌复合 群 （ 人
型、 牛型 、 非 洲 和 田 鼠分 枝 杆 菌 ） 及 麻 风 分 枝 杆 菌 以外 的 其 他 分 枝 杆菌， 是一种 条件 致病 菌 ， 极 易 导 致 院 内感 染 。 Ｎ ＴＭ 可 以
菌株和 １ ６ 株分枝杆菌临床分离菌株 １ ６ Ｓ － ２ ３ Ｓ ｒ Ｄ ＮＡ Ｉ Ｔ Ｓ测 序 ， 利用 １ ６ Ｓ － ２ ３ Ｓ ｒ ＤＮ Ａ 内转 录间 隔 区 序 列 既有 高度 保 守 的属 特 异 性 序 列 又有 高度 可变 的种 特 异 性 序 列 的 特点 ， 设 计 种 特异 性 引物 ， 并 以此 序 列 为 靶 基 因 ， 经Ｐ Ｃ Ｒ 扩增 后 形 成 ３ 末 端带 有 荧光标 记 的相 差 一 个 碱 基 的不 同 长 度 的 产 物 ， 由于 １ ６ Ｓ － ２ ３ Ｓ ｒ Ｄ ＮＡ Ｉ ＴＳ序 列 长 度较 短 ， Ｐ Ｃ Ｒ扩 增 产 物 一 次 测 序 可 获 得 全序列 ， 含有足够信息 ， 再 构 建 分 枝 杆 菌菌 种 聚类 分 析 树 状 谱 ， 进行核苷酸序列分析 ， 即 可 鉴 别 ＭＴ Ｂ 与 ＮＴ Ｍ 。直 接 测 序 法 操 作 易 于 标 准 化 与 自动 化 ； 利用 对 １ ６ Ｓ － ２ ３ Ｓ ｒ Ｄ ＮＡ Ｉ Ｔ Ｓ序 列 的
非结核分枝杆菌病诊断与治疗PPT
预后：早期诊 断和治疗可提 高治愈率，减
少并发症
03
非结核分枝杆菌病的诊 断方法
细菌学诊断
细菌培养：分离培养非结核分枝杆 菌
药敏试验：检测非结核分枝杆菌对 常用抗菌药物的敏感性
细菌鉴定：通过生化试验和分子生 物学方法鉴定
免疫学检测：检测患者血清中非结 核分枝杆菌特异性抗体
分子生物学诊断
加强宣传教育，提高公众认识
宣传非结核分枝 杆菌口 罩等
提高公众对非结 核分枝杆菌病的 认识和警惕性
鼓励公众参与预 防工作，如定期 体检、及时报告 疑似病例等
加强环境卫生整治，减少传播途径
保持室内空气流通，避免长时间处于密闭空间 定期进行室内清洁，保持环境卫生 避免接触病患，减少感染风险 加强个人卫生，勤洗手，保持手部清洁
病理学诊断
临床诊断与鉴别诊断
临床表现：发 热、咳嗽、咳
痰、胸痛等
实验室检查： 血常规、生化、
免疫学等
影像学检查： X线、CT等
病原学检查： 痰培养、分子
生物学等
鉴别诊断：与 其他肺部疾病 如肺结核、肺
癌等相鉴别
治疗方法：抗 结核药物、手
术治疗等
04
非结核分枝杆菌病的治 疗原则
抗感染治疗
药物选择：根据细菌种类和耐药性选择合适的抗生素 剂量和疗程：根据病情严重程度和药物特性确定合适的剂量和疗程 联合用药：根据病情需要，可以采用两种或两种以上抗生素联合使用 药物监测：定期监测药物浓度，确保药物疗效和安全性
环丙沙星：对非结核分枝杆菌有良好 疗效，对结核分枝杆菌也有一定疗效
治疗方案与疗程
药物选择：根据病情和患者情况选择合适的药物 疗程：一般需要6-12个月的治疗时间 药物剂量：根据病情和患者情况调整药物剂量 药物副作用：注意药物副作用，及时调整药物剂量或更换药物
非结核分支杆菌病的诊断与处理
Taq I酶切的电泳结果（一）
M为DNA marker。第1列为脓肿分枝杆菌标准 株，其余为脓肿分枝杆菌临床株
Taq I酶切的电泳结果（二）
注：M为DNA marker。1、2列为经生化法鉴定为龟分枝杆菌 的临床株，3、4列为龟分枝杆菌标准株，第5列为脓肿分枝 杆菌标准株
PCR-DNA测序
PCR扩增细菌DNA的某个特异片段，直接测 定DNA碱基序列，分析分支杆菌种间序列 差异,可达到分支杆菌菌种鉴定的目的
56岁女性，反复咳嗽咳黄痰10年。2001年在我 院痰培养鉴定为偶然分枝杆菌
非结核分枝杆菌病的诊治指南
美国胸科协 会1997年
英国胸科协 会1999年
我国中华医学会结 核病学分会2000年
诊断
非结核分枝杆菌感染
同时具备以下两项条件者可诊断为非结核分 枝杆菌感染： (1)非结核分枝杆菌皮试阳性。 (2)缺乏组织、器官受到非结核分枝杆菌侵犯 的依据。
Ⅲ群——不产色菌，如鸟分枝杆菌复合
分
群（M.avium complex，MAC）、溃疡
类
分枝杆菌
Ⅳ群——快生长菌，如偶然分枝杆菌、龟 分枝杆菌、脓肿分枝杆菌
对于临床医生价值有限
➢微生物学家的分类方法
➢分枝杆菌微生物学方面的发展，包括 快速培养技术、DNA探针、高效液体色 谱分析方法
➢同一Runyon分类法下的分枝杆菌可以 导致完全不同的临床疾病
治疗进展1
· 疏水衍生物：利福布丁（Rifabutin,RFB） 等
· 破坏细胞壁：如乙胺丁醇(EMB) · 克服细胞壁通过障碍：如将抗结核药物加
入脂质体 · 多种机制不同的药物联用：如EMB、链霉
素（SM）、利福平（RFP）、环丙沙星 （CIP）等联用
非结核分枝杆菌病分子诊断技术概述
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结核与肺部疾病杂志1)1(年-月第1卷第1期PC;?@A=Q;0J$'/P;0@1)1(R&9*1B&*1
Hale Waihona Puke ,本中检测 BCD$韩国+种可鉴别 DCSG 与 BCD 的试 剂 盒-!(#E%U80";A@CD CS.BCD 实 时 荧 光 FGH试剂盒"以 DCSG 和 BCD 的3Q!##$ 和转录 间区序列!'0>@A089>A80/=A'?@%/Z8=@A"3>Q#为靶基 因,!1#L6B6$#E% DCS.BCD 实时荧光 FGH 试 剂盒"以 DCSG 的 3Q!##$ 以 及 BCD 的 3>Q 和 )C$< 为靶基因,!+#H@892W DCS e BCD 试剂盒" 以 DCSG和 BCD 的3Q!##$ 和3>Q 为靶基因&5'$ 检测标准菌株时"E%U80";A@%L@0@%'8%H@892W 的准 确度分别为())N)O%,3N3O和,3N3O"检测临床菌 株时+种试剂盒的敏感度均大于,5O&5'$E%U80";A@ 检测呼吸道样本时的敏感度和特异度分别为
非结核分枝杆菌的菌种鉴定方法课件
非结核分枝杆菌根据基因型特征可以分为不同的基因型，如Mycobacterium avium complex (MAC)、Mycobacterium ulcerans等。
非结核分枝杆菌的分布情况
自然环境
非结核分枝杆菌广泛分布于自然环境中，如土壤、水源、动 物等。
人类感染
非结核分枝杆菌是导致人类疾病的重要病原体之一，主要引 起肺部感染和淋巴结炎等。
通过药敏试验检测非结核分枝杆菌对不同药物 的敏感程度。
耐药表型特征
研究非结核分枝杆菌耐药表型的特征，如生长 速度、菌落形态等。
耐药性表型与基因型关系
3
探讨非结核分枝杆菌耐药性表型与基因型之间 的关系。
耐药性基因检测
耐药基因筛选
01
通过基因测序技术筛选非结核分枝杆菌的耐药基因。
耐药基因功能与作用机制
非结核分枝杆菌的菌种鉴定 方法课件
2023-11-06
目 录
• 引言 • 非结核分枝杆菌的分类与分布 • 菌种鉴定方法 • 菌种耐药性分析 • 菌种感染的防控策略 • 研究展望与未来发展趋势
01
引言
背景介绍
非结核分枝杆菌（Non-tuberculous Mycobacteria，简称NTM）是一类 在环境中广泛存在的微生物，与结核
非结核分枝杆菌感染防控的未来发展方向
加强感染控制
通过加强医院感染控制 措施，减少患者之间的 传播。
开发新药物
研究新的抗结核药物， 解决非结核分枝杆菌的 耐药性问题。
疫苗研发
加快非结核分枝杆菌疫 苗的研发，提高预防感 染的能力。
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THANKS
非结核分枝杆菌的感染症状
01
02
菌道系列一：非结核分枝杆菌
菌道系列一：非结核分枝杆菌感染性疾病是当今世界严重威胁人类健康的重大疾病。
基于NGS的宏基因组学检测（metagenomic NGS, mNGS）对病原体的覆盖极其全面，不需要微生物培养，不需要根据经验进行预设，可以检测耐药突变和毒力基因，为急危重症和未明原因感染的临床诊治提供了全新的思路和解决方案。
前不久宝藤医学为大家分享了PPmeta®-感染宏基因组检测案例，详细介绍了mNGS在感染性疾病中的应用；为了让大家更好的了解临床病原微生物知识，宝藤医学特开设《菌道系列》专栏，和大家一起说感染话菌道。
非结核分枝杆菌(nolq-tuberculous Mycobacteria，NTM)可引起身体各部位的疾病，但以肺部感染最为常见，约占NTM感染的90%，其他相对较常见的受累部位包括淋巴结、皮肤软组织、骨以及全身播散性病变，但也有中枢神经系统、角膜和耳部感染的个案报道。
一细菌特点非结核分枝杆菌(nolq-tuberculous Mycobacteria，NTM)，是指除结核分枝杆菌复合群(mycobacterium tuberculosis complex，MTC)和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。
NTM的细菌学特点与结核分枝杆菌(MTB)类似，属于需氧菌，细胞壁富含脂质使其具备抗酸染色的特点，NTM在环境中普遍存在，以土壤和水中最为常见，水源性NTM与人类感染的关系最为密切。
二流行病学我国尚缺乏全国性数据，现有的关于NTM的流行病学研究结果显示，我国NTM感染呈现南方多于北方、气候温和地区多于气候寒冷地区、沿海地区多于内陆地区的特点，如以东部沿海地区报道为例，山东为1.37%，江苏为3.37%，上海为5.9%，福建为10.2%，广东为19.3%。
三不同部位感染NTM情况肺部NTM感染最常见的菌种包括MAC、脓肿分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌和蟾蜍分枝杆菌。
NTM 引起的肺外感染以淋巴结炎最为常见，尤其是6个月至2岁的儿童，最常见的致病菌为MAC，其次为瘰疬分枝杆菌和玛尔摩分枝杆菌；NTM引起的骨关节病变较为罕见，且MAC、苏尔加、偶然、蟾蜍、海等分枝杆菌可能较为常见。
非结核分枝杆菌感染的实验室检测
非结核分枝杆菌感染的实验室检测非结核分枝杆菌（NTM）普遍存在于环境中，种类繁多，是条件致病菌，在标本采集过程或者实验室操作过程中易导致污染，易误诊为结核病。
随着检测方法的改进和医生意识的增强等因素，NTM感染诊断率明显增加，但实验室鉴定到种较为困难，目前有多种检测方法，各有优缺点。
在SIFIC2023“全国感控与耐药感染”联合大会上，同济大学附属上海市肺科医院检验科的余方友教授详细介绍了NTM感染的实验室检测方法。
一、NTM概述非结核分枝杆菌（non-tuberculous Mycobacteria，NTM）系指除结核分枝杆菌复合群和麻风分枝杆菌以外的一大类分枝杆菌的总称。
其中大部分为寄生菌，仅少部分对人体致病，属条件致病菌。
（一）NTM的特点1.NTM普遍存在于环境中，由于其细胞壁具有较强的疏水性，能天然耐受多种消毒剂、抗生素以及重金属，使其常生存于饮水系统中。
2.NTM可以在很多物体表面形成生物膜，从而使其能够抵御外界不利因素，帮助其在自然界或者物体表面长期存活。
3.已经发现的NTM超过190余种，仅少部分与人类致病相关，分疾病来源与非疾病来源。
4.标本采集过程或者实验室操作过程中导致污染，应严格避免。
（二）NTM的分类1.根据NTM生长速度及产色情况分类（1）光产色分枝杆菌，如堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌、猿分枝杆菌等；（2）暗产色分枝杆菌，如瘰疬分枝杆菌、戈登分枝杆菌和苏尔加分枝杆菌；（3）分枝杆菌如偶发分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、龟分枝杆菌、耻垢分枝杆菌。
2.根据生长速度分类（1）快速生长型分枝杆菌：在固体培养基上培养7天或小于7天，可以获得肉眼可见菌落的NTM。
包括脓肿分枝杆菌复合群、龟分枝杆菌、偶发分枝杆菌、耻垢分枝杆菌。
（2）慢生长型分枝杆菌：需要大于7天才能在固体培养基上获得肉眼可见菌落的NTM，包括堪萨斯分枝杆菌、鸟-胞分枝杆菌复合群、海分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌。
二、NTM病与病原体（一）NTM的病原学特征1.条件致病菌，易误诊为结核病。