[医学]免疫层析快速诊断技术简介(胶体金)
胶体金免疫层析技术原理
胶体金免疫层析技术原理胶体金免疫层析技术是一种基于胶体金颗粒的分析方法，常用于生物医学领域的分子检测和诊断。
该技术的原理是利用胶体金颗粒与特定抗原或抗体的高度特异性结合能力，通过可视化或仪器测量的方式实现目标分子的定量或定性分析。
胶体金是一种具有特殊光学性质的纳米材料，其颗粒大小一般在10-100纳米之间。
这种材料具有高度的稳定性和生物相容性，并且在可见光范围内具有强烈的吸收和散射光谱特性。
在胶体金免疫层析技术中，胶体金颗粒表面通常被修饰上特定的抗原或抗体。
在分析过程中，样品中的目标分子与胶体金颗粒表面的抗体结合形成复合物。
这种结合通常是由于抗原与抗体之间的特异性配对引起的。
复合物的形成会导致胶体金颗粒的聚集或分散状态发生变化。
胶体金免疫层析技术通常采用纸条或膜作为载体。
样品在载体上流动时，复合物会在特定位置停留，形成可见的信号线。
这个信号线的强度与目标分子的浓度成正比。
通过测量信号线的长度、颜色强度或使用专门的仪器分析，可以确定目标分子的存在与否以及其浓度。
胶体金免疫层析技术具有以下优点：1. 高度特异性：由于抗原与抗体之间的高度特异性结合，胶体金免疫层析技术可以准确地检测目标分子，避免了其他杂质的干扰。
2. 灵敏度高：胶体金颗粒具有强烈的吸收和散射光谱特性，使得该技术能够检测到非常低浓度的目标分子。
3. 快速简便：胶体金免疫层析技术通常只需要几分钟到几小时的时间完成分析，操作简单，不需要复杂的仪器设备。
4. 可视化结果：该技术可以通过肉眼观察或简单的仪器测量获得结果，无需复杂的数据处理。
胶体金免疫层析技术在临床诊断、食品安全监测、环境污染检测等领域具有广泛应用。
例如，在临床诊断中，可以利用该技术检测血液中的肿瘤标志物、病原体和药物残留等；在食品安全监测中，可以检测食品中的致病菌和有害物质；在环境污染检测中，可以检测水体、土壤和大气中的污染物。
胶体金免疫层析技术是一种快速、准确、简便且可视化的分析方法。
胶体金免疫层析技术原理
胶体金免疫层析技术原理介绍胶体金免疫层析技术（Colloidal Gold Immunochromatography Test）是一种常用于快速、便捷地检测生物体内特定分子的方法。
该技术基于免疫层析原理，利用胶体金颗粒作为信号指示剂，实现对目标分子的高灵敏检测。
原理胶体金免疫层析技术主要依赖于抗原-抗体的专一性识别和相互结合。
当胶体金颗粒与特异性抗体结合后，形成颗粒/抗体/抗原复合体。
通过将样品与含有抗原的试剂盒进行反应，可使目标分子与胶体金颗粒上的特异性抗体结合，形成颗粒/抗体/抗原/目标分子复合体。
操作步骤使用胶体金免疫层析技术进行检测通常需要以下步骤：1.样品处理–收集待测样品，并进行必要的前处理，例如离心、稀释等。
–如果样品是固体，需要先进行溶解或悬浊处理。
2.反应溶液的制备–根据试剂盒的说明书，将试剂溶解或稀释到适当的浓度。
3.准备试剂盒–打开试剂盒包装，并将提供的试剂按照指示加入到试剂盒中。
4.加样–使用专用的吸管或滴管，将处理好的样品滴入试剂盒的样品孔中。
5.反应–让样品与试剂盒中的抗体共反应一定时间，通常为几分钟。
6.拍照解读–将试剂盒放置在专门的解读器上，并对结果进行解读。
–解读器会对胶体金颗粒的颜色进行分析和判断，从而得出检测结果。
7.结果判读–根据解读器显示的结果，确定样品中目标分子的存在与否。
–通常，胶体金免疫层析技术结果可分为阴性、阳性或无效，具体判读标准需根据试剂盒说明书确定。
优势和应用领域胶体金免疫层析技术具有以下优势和应用领域：1.快速：检测时间短，通常在几分钟内可以得出结果。
2.简便：操作简单，无需复杂的设备和专业技术人员。
3.准确：具备高灵敏性和特异性，可以有效地识别目标分子。
4.可视化：结果直接显示在试剂盒上，无需显微镜等设备。
5.应用广泛：可以用于临床医学、环境检测、食品安全等多个领域。
局限性和发展趋势胶体金免疫层析技术虽然具有许多优点，但也存在一些局限性：1.灵敏度限制：相比于其他方法，如PCR和ELISA，胶体金免疫层析技术的灵敏度相对较低。
胶体金免疫层析技术
胶体金免疫层析技术胶体金免疫层析技术是一种重要的生物分析技术，它在医学诊断、生物学研究、环境监测等领域有着广泛的应用。
本文将介绍胶体金免疫层析技术的原理、方法、应用及发展前景等方面，以帮助读者深入了解这一技术的重要性和特点。
一、胶体金免疫层析技术的原理胶体金免疫层析技术是一种基于抗原与抗体特异性结合原理的生物分析技术。
其原理基于胶体金颗粒的特殊性质，当胶体金颗粒与特定的抗体或抗原结合时，会产生颜色变化。
这种颜色变化可以通过裸眼观察或仪器测定来定量分析目标物质的含量，从而实现对目标分子的快速、灵敏、特异性检测。
二、胶体金免疫层析技术的方法1. 样品预处理在进行胶体金免疫层析技术前，需要对样品进行一定的预处理工作，以获得高纯度的检测目标。
这包括样品的收集、提取、稀释、清洁等操作，以确保样品的纯度和稳定性。
2. 抗原抗体结合在胶体金免疫层析技术中，首先将抗原或抗体与胶体金颗粒结合，形成胶体金-抗原或胶体金-抗体复合物。
这一步是整个技术的关键，其特异性结合决定了最终结果的准确性和可靠性。
3. 层析纸制备将样品和复合物应用于层析纸上，经过升温、冷却和其他特殊处理，使复合物在层析纸上呈现出清晰的条带，以便进行后续的观察和分析。
4. 结果分析通过裸眼观察或仪器测定，分析样品中的目标分子的含量，从而得出最终的检测结果。
三、胶体金免疫层析技术的应用1. 医学诊断胶体金免疫层析技术在临床医学中被广泛应用，例如对传染病、肿瘤标志物、生化指标等的快速检测，为疾病的早期诊断和治疗提供了重要的支持。
2. 食品安全该技术可以用于食品中有害物质的检测，如农药残留、重金属污染等，确保食品的安全和健康。
3. 环境监测胶体金免疫层析技术也可以用于环境监测领域，检测水质、土壤质量等环境参数，为环境保护和生态平衡提供数据支持。
四、胶体金免疫层析技术的发展前景随着生物技术和纳米技术的不断发展，胶体金免疫层析技术将得到更广泛的应用和改进。
未来，可以预见该技术在药物筛选、基因检测、个性化医疗等领域将发挥越来越重要的作用。
实验一 免疫层析快速诊断技术(医学免疫学)
人类医学 各 级 医 院 , 血 传染病（乙肝五项,HIV, SARS等）
站,CDC,防疫站,诊 标志物（AFP、肌钙蛋白、粪便血红蛋
断中心；家庭自检；白等）
商检系统；边检口 岸；公安系统.
女性妊娠
HCG(早孕)
毒品（吗啡,K粉,摇头丸,冰毒）
农牧业
畜牧兽医站, 商检 传染病（禽流感,链球菌等） 系统,边检口岸,农 病毒（烟草花叶病毒、犬细小病毒等） 牧类院系和研究所
阳性 阳性
阴性
临床意义：
1、孕妇妊娠1周后，尿中可出现较多HCG，均可 呈阳性（+）反应，达到妊娠早期诊断的目的
2、绒毛膜上皮癌、水泡状胎块和睾丸畸胎瘤患者 的尿中HCG可明显增高，故也可呈阳性（+）反应， 但结合临床可予以鉴别。
注意事项
1. 强阳性尿液中 HCG 含量较多 , 因此质控线可能不出现 或极浅淡 , 而仅在反应区显示淡紫色条带。 2. 应避免试纸条一端插入尿液过深或过浅 , 插入时间过长 或过短也会影响试验结果。
胶体金（Colloidal gold）是氯金酸（HAuCl4） 的水溶胶，氯金酸在还原剂的作用下，聚合
成特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为
一种稳定的胶体状态。
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带 负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling technique） 是 以 胶 体 金 作 为 示 踪 标 记 物 应 用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
实验一
胶体金试纸条检测技术
胶体金试纸条检测技术
【实验目的】
掌握双抗体夹心法测定尿 HCG 的原理、操作方法及结果判定方法。
胶体金法免疫层析法
胶体金法免疫层析法胶体金法免疫层析法是一种常用于生物分析和生化检测的方法。
它通过将胶体金颗粒与特定抗体结合，实现对特定分子的高灵敏度和高选择性检测。
胶体金是一种具有独特光学性质的材料，其颗粒大小一般在10-100纳米之间。
胶体金颗粒具有良好的稳定性和分散性，能够产生明亮的红色光谱吸收峰。
这些特性使得胶体金成为生物分析中理想的探针。
在胶体金法免疫层析法中，首先需要制备与目标分子相应的抗体。
抗体可以通过动物免疫或基因工程技术获得。
接下来，将胶体金颗粒与抗体进行共价结合，形成胶体金-抗体复合物。
这种复合物能够在目标分子存在的条件下发生聚集，从而改变胶体金颗粒的光学性质。
在实际操作中，通常将待测样品与胶体金-抗体复合物混合。
如果待测样品中含有目标分子，那么目标分子将与复合物竞争结合，导致复合物解离。
这种解离会使得胶体金颗粒发生聚集，进而引起红色光谱吸收峰的变化。
通过测量吸收光谱的变化，可以间接检测到目标分子的存在。
胶体金法免疫层析法具有许多优点。
首先，胶体金颗粒具有较大的比表面积和高度的可调控性，因此可以实现高灵敏度的检测。
其次，胶体金颗粒具有良好的生物相容性和稳定性，不易发生聚集或沉淀。
此外，胶体金法免疫层析法操作简便，结果可视化，无需复杂的仪器设备。
胶体金法免疫层析法在生物医学领域得到广泛应用。
例如，在临床诊断中可以用于检测肿瘤标志物、病原微生物和药物残留等。
此外，胶体金法免疫层析法还用于食品安全监测、环境污染检测和生物学研究等领域。
然而，胶体金法免疫层析法也存在一些限制。
首先，胶体金颗粒的稳定性受到环境pH值、离子强度和温度等因素的影响，因此需要严格控制实验条件。
其次，胶体金法免疫层析法对于复杂样品的处理较为困难，可能存在干扰物质造成的误判。
此外，胶体金法免疫层析法的灵敏度受到胶体金颗粒的大小和抗体的亲和力等因素的影响，需要进行优化和改进。
胶体金法免疫层析法是一种重要的生物分析方法。
它通过胶体金颗粒与特定抗体的结合实现对目标分子的高灵敏度和高选择性检测。
胶体金层析法
胶体金层析法
胶体金层析法（Colloidal Gold Lateral Flow Assay）是一种常见的免疫层析检测技术，也被称为“快速测试纸条”或“快速诊断试纸条”。
这种技术被广泛用于医学诊断、食品安全检测、环境监测等领域。
下面是胶体金层析法的基本原理和步骤：
原理：
1.抗原-抗体反应：根据抗原和抗体之间的特异性结合原理，将被检测的分
子（如蛋白质、病毒抗原等）与特异性抗体结合。
2.胶体金标记：抗体或抗原被标记上胶体金颗粒，使其呈现颜色。
3.层析效应：在试纸条上形成的吸附带将试剂中的标记复合物隔离出来，
通过毛细管作用，使其沿着试纸条上的纵向扩散。
步骤：
1.取得待检样本（如血液、尿液、食品提取物等）。
2.将待检样本加入试剂盒中，与试剂中的抗体或抗原相结合。
3.混合物通过毛细管效应在试纸条上扩散。
4.当待检样本中存在目标分子时，会与试纸条上的抗体或抗原结合，形成可
见的标记复合物。
5.标记复合物在试纸条上的特定区域显示出色带，从而进行目标物的定性或
半定量检测。
这种技术具有简单、快速、便携、成本低等优点，在诊断和快速检测中应用广泛。
例如，它被用于临床诊断、药物滥用检测、感染病原体检测（如流感、艾滋病毒等）以及食品安全检测等领域。
胶体金快速免疫诊断技术
胶体金快速免疫诊断技术引言胶体金快速免疫诊断技术（Colloidal Gold Rapid Immunoassay）是一种基于胶体金纳米颗粒的免疫学检测技术。
该技术通过检测样本中的特定抗原或抗体来快速诊断病原体感染或其他疾病。
胶体金快速免疫诊断技术具有操作简便、快速高效、低成本等优势，因此被广泛应用于临床、食品安全、环境监测等多个领域。
胶体金纳米颗粒原理胶体金纳米颗粒是直径在1-100纳米的金颗粒，具有良好的乳浊液形态。
在乳浊液中，胶体金纳米颗粒呈现出红色或紫色，具有明显的可见光吸收峰。
这种特性使得胶体金纳米颗粒在免疫学检测中得到了广泛应用。
在胶体金快速免疫诊断技术中，胶体金纳米颗粒被标记上特定的抗原或抗体，形成胶体金-抗原/抗体复合物。
这些复合物在样本中与待检测物相结合，形成胶体金-抗原/抗体-待检测物复合物。
这个复合物具有较大的体积和很强的自聚集能力，会导致乳浊液的颜色由红色或紫色变成蓝色。
通过观察样品颜色的变化，可以判断是否存在待检测物。
胶体金快速免疫诊断技术的步骤1.样品处理：将待检测样品（如血清、尿液等）加入到试管或测试条中。
2.反应与结合：将标记有特定抗原或抗体的胶体金纳米颗粒滴加到样品中，与待检测物发生特异性反应。
3.结果观察：通过肉眼观察样品颜色的变化，确定是否存在待检测物。
阳性结果通常呈现出蓝色或紫色，阴性结果通常呈现出红色或无明显变化。
4.解读结果：根据胶体金快速免疫诊断试剂盒的说明书，将结果进行解读，判断是否存在待检测物。
胶体金快速免疫诊断技术的应用1.临床诊断：胶体金快速免疫诊断技术在临床上广泛应用于感染性疾病的诊断。
例如，利用胶体金快速免疫诊断技术可以迅速、简便地检测出流感病毒、乙型肝炎病毒、艾滋病毒等。
2.食品安全：胶体金快速免疫诊断技术可以用于食品中有害物质（如微生物、农药残留等）的快速检测。
通过这种技术，食品生产商可以在产品出厂前进行快速检测，确保产品的安全性。
3.环境监测：胶体金快速免疫诊断技术可以应用于环境样品中有害物质（如重金属、有机物污染等）的检测。
胶体金层析
胶体金层析
胶体金层析是一种固相免疫测定技术，广泛应用于生物医学、食品安全、环境监测等领域。
它基于抗原和抗体之间的特异性结合反应，通过检测样品中目标物质的含量，为科研和临床诊断提供可靠依据。
胶体金层析的原理是将抗原或抗体固定在载体上，形成一层薄膜。
样品经过薄膜时，目标物质与薄膜上的抗体或抗原结合，随着流动相的移动，形成可见的彩色带。
根据彩色带的宽度和颜色深浅，可以判断样品中目标物质的含量。
胶体金层析具有较高的灵敏度和特异性，检测范围广泛。
在实际应用中，胶体金层析可用于测定激素、药物、病毒、细菌等生物活性物质。
此外，胶体金层析操作简便、结果快速，适用于现场检测和大规模筛查。
尽管胶体金层析具有很多优点，但也存在一定的局限性。
例如，对于复杂样品的干扰物质去除困难，薄膜的稳定性受环境影响较大等。
为克服这些缺点，研究者们在胶体金层析的基础上发展了多种改进方法，如化学发光免疫层析、荧光免疫层析等。
展望未来，随着科技的进步和市场需求的增长，胶体金层析技术将不断优化和发展。
新型载体、高效检测仪器和智能化分析系统的研究和开发将进一步提高胶体金层析的灵敏度、准确性和可靠性。
胶体金免疫层析竞争法
胶体金免疫层析竞争法1. 背景介绍胶体金免疫层析竞争法（Colloidal Gold Immunochromatographic Assay）是一种常见的免疫层析快速检测方法。
该方法基于免疫学原理，利用胶体金颗粒与样品中的目标分子相互作用，通过色素沉淀形成可见的测试结果。
这种检测方法具有检测快速、操作简单、结果直观等优点，在临床诊断、食品安全监测、环境污染监测等领域得到广泛应用。
2. 原理介绍2.1 免疫学原理免疫学原理是胶体金免疫层析竞争法的基础。
免疫层析法是一种通过抗原-抗体反应实现分离和检测的技术。
在该方法中，通过将抗原（目标分子）与抗体（特异性与抗原结合的蛋白质）结合，形成免疫复合物，从而实现目标分子的检测。
2.2 胶体金颗粒胶体金颗粒是胶体金免疫层析法的关键试剂。
胶体金颗粒具有良好的生物相容性、稳定性和可见性，广泛应用于免疫学和生物医学领域。
胶体金颗粒的颜色通常为红色或紫色，直径一般在10-100纳米之间。
在光学显微镜下观察，胶体金颗粒呈现明显的表面等离子共振吸收峰，即表现为红色。
2.3 竞争反应胶体金免疫层析竞争法通过竞争反应实现目标分子的检测。
竞争反应分为两个步骤：竞争体系构建和检测结果显示。
2.3.1 竞争体系构建竞争体系构建是胶体金免疫层析竞争法的关键步骤。
在这一步骤中，将胶体金颗粒与目标分子结合。
首先，将目标分子与胶体金颗粒中的抗体结合，形成免疫复合物。
然后，将样品中的目标分子与胶体金颗粒中的抗体竞争结合。
当样品中的目标分子存在时，会与胶体金颗粒中的抗体竞争结合，导致免疫复合物的形成减少。
而当样品中的目标分子不存在时，胶体金颗粒中的抗体能与胶体金颗粒自身上的抗原结合，免疫复合物形成量较多。
2.3.2 检测结果显示检测结果显示是胶体金免疫层析竞争法的关键步骤。
在这一步骤中，利用胶体金颗粒的可见性进行结果显示。
当竞争体系构建完成后，将样品滴在测试纸上，胶体金颗粒会经由纸质的吸收作用，沿纸张上升。
免疫层析快速诊断技术简介胶体金课件
BJQ3000:10nl/drop
AJQ3000:1ul/cm 划线精密度 BJQ3000:±1% AJQ3000: ±2%
切条机
仪器参数: 进料宽度：≤100 mm 进料长度：不限,可连续进料切割 切割宽度：≥1 mm, 宽度连续可调 切割宽度设定位数：0.01 mm 切割精度：±0.1 mm 切割速度：230次/分钟, 速度连续可调 切条计数：单次工作和总工作分别计数 刀片: 日本进口, 耐磨高碳钢材料 抗静电装置：建议选配 电源：220VAC 重量：20KG 尺寸：430(L)×330(W)×260(H) mm
这种检测可以以独立的试纸条，也可以 以装在塑料盒中的形式进行。
总的来说，做此项检测至少需要50ul的 液体标本，可在5－30分钟完成。
胶体金纸条的不同种类
层析法技术优势:简单\现场\快速
试纸条组成结构
控制线（C线）
与常规诊断方法相比：
优点 快速：全部检测过程仅需 5-30分钟。
缺点 定量问题
很多厂家都开发了对应的读条仪，大部分都是采用简单的30万 象素数码摄像头做一个拍摄，然后用软件分析。
农兽药残留（磺胺类、瘦肉精等）,大肠杆菌,黄曲霉素 免五疫、层 胶析体快金速纸诊条断应技用术领简域介胶体金
快廉速价：全单部个检测测试过条程成仅本需极低5-30分钟。 2可在0单非mm份 临/检床dro测检p：测）对中标，本样既本能可成能批是检由测土，壤又、可粉单尘份、检植测物，或可者立食刻品拿制到备结的果微，量不溶必液等。待。 A传很J染多Q3病 厂0（家00乙都: 0肝开. 五发项了对,H应IV,的S读AR条S仪等，）大部分都是采用简单的30万象素数码摄像头做一个拍摄，然后用软件分析。 传这BIO染种D病 检O（测T 乙可X肝以YZ五以30项独50立,H点的IV膜,试S喷纸AR金条S机，等也）可以以装在塑料盒中的形式进行。 五B刀八IO、片D胶 : O日体T本金X进纸Y口Z条3,0应判耐50用读磨点领方高膜域法碳喷钢金材机料 传目农刀染前兽片病 涉 药 : 日（足残本乙该留进肝领（口五域磺, 项的胺耐科类,磨H研、I高V,机瘦碳S构肉A钢R很精材S多等料等，））从,大中肠科杆院菌到,黄C曲DC霉，素细数来也有三五十家。 可 5免 刀 廉 农-5单疫片价兽m份层:：药m日检 析 单 残本测 法 个 留进： 检 测 （口对 测 试 磺, 标 原 条 胺耐本 理 成 类磨既 分 本 、高能类极瘦碳成 介 低 肉钢批 绍 精材检 等料测 ），,大又肠可杆单菌份,黄检曲测霉，素可立刻拿到结果，不必等待。 六最（可标环、小竞单志保胶 喷 争 份 物 监体量反检（测金应测A部F纸）：门P、条对,研肌检标究钙测本机蛋原既构白理能、成粪批便检血测红，蛋又白可等单）份检测，可立刻拿到结果，不必等待。 然B目进廉这J后前料价种Q3打 ， 长 ： 检0开国度单测00分内：个可:1析能不测以0n软点限试以l/d件出条独,r可o，来成立p连将的本续该厂极试进灰家低纸料度有条切图，4割0象也多导可家入以，以自装动在分塑析料出盒灵中敏的度形，式本进底行情。况。 这A然快简食J种后速便品Q3检 打 ： 安0测开全不00可分部需检:1以析检其测ul/以软测它中cm独件过任心立，程何,各的将仅仪监试该需器管纸灰设部5-条度备3门0，图分也象操钟可导作。以入也以，极装自其在动简塑分单料析，盒出无中灵需的敏专形度业式，人进本员行底，。情携况带。方便，可随时随地进行。 八划免总仪、线疫的器胶 精 层 来 参体密析说数金度法，纸检做条测此判原项读理检方分测法类至介少绍需要50ul的液体标本，可在5－30分钟完成。
胶体金免疫层析法原理
胶体金免疫层析法原理
胶体金免疫层析法是一种常用于生物分析和临床诊断的技术。
它基于抗原-抗体反应原理，利用胶体金粒子和抗体之间的相互作用来实现分离和检测目标分子。
胶体金是一种纳米级粒子，其表面具有特定的化学官能团，可以与抗体分子发生化学结合。
在胶体金免疫层析法中，首先将目标分子与抗体反应，形成抗原-抗体复合物。
然后将这个复合物与含有胶体金粒子的试剂混合，使胶体金粒子与抗原-抗体复合物结合。
混合物经过一段时间后，被加入到一根特定宽度和长度的试纸条上，试纸条上通常具有特定的孔洞或线条，用于控制混合物的流动。
胶体金粒子在试纸条上移动的速度受到复合物的大小和电荷的影响。
当复合物较大且带有负电荷时，胶体金粒子与复合物结合，导致复合物无法通过试纸孔洞或线条，停留在原位置。
这样，通过观察试纸条上形成的颜色条带的位置，可以确定是否存在目标分子。
通常，出现颜色条带表示目标分子的存在，而无颜色条带表示目标分子的缺失。
胶体金免疫层析法具有快速、便携和易于操作的特点，可以在不需要复杂设备和实验室条件的情况下进行分析。
因此，它广泛应用于临床诊断、食品安全检测、环境监测等领域。
[医学]胶体金免疫层析技术
![[医学]胶体金免疫层析技术](https://img.taocdn.com/s3/m/8c232dc719e8b8f67c1cb9d7.png)
◊ 在其后的20年中，免疫层析产品得到了快速 的发展：
项目 早孕检测 毒品检测 疾病检测
所占百分比 90%以上 80-90% 30-40%
◊ 快速，定性 10分钟以内就可得到检测结果。
◊ 无需设备 一根检测条就能完成检测
◊ 准确、灵敏 灵敏度可以达到10-9数量级
◊ 应用范围不断扩大
疾病诊断，食品安全，药物检测，DNA检测
1978年geoghega发现了胶体金标记物在光镜水平的应用
+ 胶体金结构：
胶体金颗粒由一个基础金核 （原子金Au）及包围在外的双 离子层构成，紧连在金核表面 的是内层负离子（AuC12－）， 外层离子层H+则分散在胶体间 溶液中，以维持胶体金游离于 溶胶间的悬液状态。
∆染色—不同粒径，不同颜色
出现了全新的免疫学理论 从分子水平对免疫系统进行研究
抗原抗体——钥匙和锁的 关系
抗体能够特异性的结合 抗原的活性位点。
基因工程指按人们意愿设计，通过改造基因 或基因组而改变生物的遗传特性，从而获 得新的品种货或产品。
意义：可以稳定的获得人类所要的蛋白。
◊ 20世纪90年代初，第一个免疫层析产品诞 生——用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测 定。
粒径 2～5nm 10～20nm 30～80nm
颜色 橙色的 酒红色 紫红色
∆ 胶体的特性—充分的溶解性，良好的流动性
∆吸附能力—在不改变蛋白性质的情况下，稳 定迅速的吸附蛋白
+ 胶体金在电镜水平的应用 + 胶体金在光镜水平的应用 + 胶体金在流式细胞仪中的应用 + 免疫印迹技术
什么叫硝酸纤维素膜？ 以硝酸纤维素为基质，经过匀浆，滚筒铺膜，
是机体识别“自身”与“非己”抗原，对 自身抗原形成天然免疫耐受，对“非己” 抗原产生排斥作用的一种生理功能。正常 情况下，这种生理功能对机体有益，可产 生抗感染、抗肿瘤等维持机体生理平衡和 稳定的免疫保护作用
免疫层析胶体金法
免疫层析胶体金法免疫层析胶体金法是一种常用的生物分析技术，主要用于检测生物样本中的抗原或抗体。
该方法结合了免疫学原理和胶体金纳米颗粒的特性，具有高灵敏度、高特异性和简单快速等优点。
免疫层析胶体金法的原理是基于抗原与抗体之间的特异性反应。
首先，在胶体金纳米颗粒表面修饰上适当的抗体或抗原，使其能够与待测的抗原或抗体发生特异性结合。
然后，将待测样品添加到一片特定的膜上，膜上固定有与胶体金固定结合的另一种抗体或抗原。
当样品中存在与胶体金修饰的抗原或抗体相结合的待测物时，会形成胶体金-待测物-固定抗体或抗原的复合物。
这些复合物会在免疫层析膜上移动并沉积在特定位置，形成可视的条纹或斑块。
免疫层析胶体金法具有许多优点。
首先，它具有快速的分析速度，通常花费不到半个小时就能得到结果。
其次，该方法不需要复杂的仪器设备，只需简单的样品处理和可见观察，因此可以广泛应用于基础研究和临床诊断等领域。
此外，免疫层析胶体金法具有较高的灵敏度和特异性，能够检测到低浓度的抗原或抗体。
同时，该方法还能同时检测多个待测物，提高了检测的效率。
免疫层析胶体金法在许多领域得到了广泛的应用。
在医学诊断方面，它可以用于检测多种疾病的标志物，如传染病、肿瘤、心脏病等。
在食品安全领域，免疫层析胶体金法可以用于快速检测食品中的残留农药、毒素以及转基因成分。
在环境监测方面，该方法可以用于检测水体、土壤和空气中的污染物，如重金属、农药等有害物质。
此外，免疫层析胶体金法还可应用于生物制药、疫苗研发等领域。
然而，免疫层析胶体金法也存在一些局限性和挑战。
首先，其灵敏度和特异性受抗体或抗原的质量影响较大，需要高质量的抗体或抗原来提高检测的准确性。
其次，该方法只能实现定性或半定量的分析，不能得到精确的定量结果。
此外，免疫层析胶体金法对待测样品的复杂性有一定的限制，如含有干扰物质或高浓度的待测物。
因此，在实际应用中需要综合考虑这些因素。
综上所述，免疫层析胶体金法是一种高灵敏度、高特异性和简单快速的生物分析技术。
实验六 胶体金免疫层析技术
原理：利用胶体金 颗粒与抗体或抗原 结合形成免疫复合 物通过层析技术进 行分离和检测。
胶体金颗粒具有高 灵敏度、高稳定性 和易于观察的特点 。
应用领域：广泛应 用于医学、生物技 术、食品检测等领 域。
历史和发展
1971年胶体金免疫层析技术首 次被提出
1980年代胶体金免疫层析技术 开始应用于临床诊断
05
胶体金免疫层析技术的应用案例
在医学诊断中的应用
快速检测：用于 快速检测传染病、 肿瘤标志物等
定量检测：用于 定量检测激素、 药物浓度等
早期诊断：用于 早期诊断某些疾 病如阿尔茨海默 病等
疾病监测：用于 监测疾病进展和 治疗效果如糖尿 病等
在食品安全检测中的应用
检测食品中的农药残留
检测食品中的重金属含量
准备实验材 料：胶体金 免疫层析试 纸条、样本、
缓冲液等
样本处理： 将样本进行 稀释、离心
等处理
加样：将样 本加入到试 纸条的加样
孔中
孵育：将试 纸条放入孵 育器中设定 合适的温度
和时间
观察结果： 在孵育结束 后观察试纸 条上的颜色 变化判断结
果
数据分析： 根据实验结 果进行数据 分析和报告
撰写
实验结果分析
稳定性好：胶体金颗粒不易氧化 稳定性好
技术局限性
灵敏度较低：胶体金免疫层析技 术灵敏度较低难以检测到低浓度 的抗原或抗体。
检测时间较长：胶体金免疫层析 技术检测时间较长需要等待一定 时间才能得到结果。
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பைடு நூலகம்
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特异性较差：胶体金免疫层析技 术特异性较差容易发生交叉反应 导致假阳性结果。
1990年代胶体金免疫层析技 术逐渐成熟广泛应用于传染病、 肿瘤等疾病的检测
胶体金快速免疫诊断技术
2 分光光度计扫描吸收峰时光波长来估计金颗粒的大小
3 电镜可见精确测定金颗粒的大小
免疫胶体金的制备
胶体金在弱碱环境下带负电荷;可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固 的结合;由于这种结合是静电结合;所以不影响蛋白质的生物特性
颜色与颗粒的关系 最佳标记颗粒大小40nm
1％柠檬酸三钠ml 0 30 0 45 0 70 1 00 1 50 2 00 金溶胶颜色 蓝灰 紫灰 紫红 红 橙红 橙 吸收峰nm 220 240 535 525 522 518
径粒nm 147 97 5 71 5 40 24 5 15
胶体金的鉴定
切条\包装
切条
演示:BIODOT CM4000切条机
包装
质量控制
1 特异性 用30份阴性参考血清进行检测;结果不得出现假 阳性；
2 敏感性 用30份阳性包括强阳性 中阳性 弱阳性参考血清 进行检测;假阴性率不得超过3份;并用已知抗体效价血清系 列稀释测试其最小检出量
3 精密度 观察批间 批内差异;CV%应不高于10% 4 稳定性检测 37℃放置3天;鉴定指标应达到以上标准
廉价：单个测试条成本极低
可单份检测：对标本既能成批检测;又可单份检测;可立刻拿 到结果;不必等待
稳定性好：金标试剂稳定;可长期保存
检测标本种类多：既可用于查血;又可用于检尿或唾液;因而 适合各种检查
技术应用
类别 人类医学
农牧业 环境 食品安全
应用领域
检测的物质
各级医院;血站;CDC;防疫 站;诊断中心；家庭自检； 商检系统；边检口岸；公 安系统
胶体金法免疫层析法
胶体金法免疫层析法胶体金法免疫层析法是一种现代生物医学研究中常用的实验技术，它具有简单、快速、灵敏和特异性高的特点。
下面将详细介绍这一技术的原理、实验步骤以及在医学研究中的应用。
胶体金法免疫层析法原理简单易懂，利用胶体金颗粒的特殊性质与生物分子相互作用，实现对特定生物分子的检测。
胶体金颗粒表面覆有一层稳定的染色剂，当与目标生物分子结合后，会发生凝集现象，形成可见的颜色变化。
这种颜色变化与样品中目标分子的含量成正比，从而可以定量检测目标物质的浓度。
这种特性使得胶体金法免疫层析法成为医学研究中常用的无标记检测技术。
在实验中，胶体金法免疫层析法通常包含以下步骤：制备胶体金溶液、制备抗体与胶体金的复合物、准备免疫层析纸条和进行样品检测。
首先，制备胶体金溶液是实验的关键步骤之一。
胶体金溶液是由金纳米颗粒悬浮于溶液中形成的，具有特定的粒径和稳定性。
制备胶体金溶液需要精确控制金纳米颗粒的粒径和浓度，遵循特定的实验条件。
接下来，制备抗体与胶体金的复合物。
这一步骤是为了将目标分子的抗体与胶体金颗粒结合，形成一种稳定的复合物。
复合物的制备需要考虑抗体的浓度、胶体金的浓度以及反应时间等参数，以保证复合物的稳定性和活性。
准备免疫层析纸条是实验中的重要步骤之一。
免疫层析纸条是一种特殊的纸条，具有高吸附性和分离性。
在纸条上，可以固定目标分子的抗体，并与胶体金复合物相互作用。
纸条的制备需要准备特定尺寸的纸条，将抗体吸附于纸条上，并进行固定，确保纸条的功能和稳定性。
最后，进行样品检测。
将待测样品滴加在准备好的免疫层析纸条上，允许样品与固定的抗体发生反应。
当样品中存在目标分子时，胶体金和目标分子的抗体会结合并形成可见的颜色变化。
利用专业的检测设备或者目视检测，可以定量检测样品中目标分子的含量。
胶体金法免疫层析法在医学研究中具有广泛的应用。
例如，它可以用于检测临床样品中的蛋白质标记物，如肿瘤标志物，用于早期癌症的诊断和监测。
此外，该技术还可以用于检测传染病病原体，如流感病毒和结核杆菌，为疾病的诊断和流行病学调查提供重要的信息。
胶体金免疫层析技术简介胶体金免疫层析技术原理
保护层
玻璃纤维
纸
GICT
猪痢疾
胶体金试剂条实验操作
•样品制备：
•组织样品处理：按常规方法取病变组织器官制成1：2（W/V ）组织悬液，反复冻融3次后，离心，上清液即为待
测样品。
•肛拭子处理：按常规方法处理即可。
•实验步骤：
•将密封袋打开，取出试纸条。
•取40ul 待检样本加在试纸条/板的•加样区，在加样区滴加1滴稀释液。
•
30分钟内观察并记录试验结果。
•结果判断：
•阳性结果：观察窗T 、C 线均出现一条紫红色条带。
•阴性结果：观察窗仅C 线出现一条紫红色条带。
•无效结果：观察窗未出现紫红色条带。
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检测原理
免疫检测的原理就是使用一种分析物— 要么是抗原要么是抗体—探测和捕获与其 对应的另外一半。
免疫层析法检测原理分类介绍 （双抗体夹心）
（以HCG检测为例）
免疫层析法检测原理分类介绍 （竞争反应）
（以吗啡检测为例）
相关仪器设备
业 边检口岸,农牧类院系和
研究所
病毒（烟草花叶病毒、犬细小病毒等）
环境 环保监测部门,研究机构 有害物质超标
食 品 食品安全检测中心,各监 农兽药残留（磺胺类、瘦肉精等）,大肠杆菌,黄曲霉素 安全 管部门
胶体金纸条生产厂商
目前，国内能点出来的厂家有40多家 北京蓝十字 杭州艾康等
上海科华 厦门新创 北京万泰
AJQ3000: 0.5-5mm 最小喷量
BJQ3000:10nl/drop
AJQ3000:1ul/cm 划线精密度 BJQ3000:±1% AJQ3000: ±2%
切条机
仪器参数: 进料宽度：≤100 mm 进料长度：不限,可连续进料切割 切割宽度：≥1 mm, 宽度连续可调 切割宽度设定位数：0.01 mm 切割精度：±0.1 mm 切割速度：230次/分钟, 速度连续可调 切条计数：单次工作和总工作分别计数 刀片: 日本进口, 耐磨高碳钢材料 抗静电装置：建议选配 电源：220VAC 重量：20KG 尺寸：430(L)×330(W)×260(H) mm
免疫层析快速诊断技 术简介(胶体金)
一、胶体金纸条总述
二、胶体金纸条种类 三、胶体金纸条结构 四、胶体金纸条优缺点 五、胶体金纸条应用领域 六、胶体金纸条检测原理 七、胶体金纸条相关仪器设备 八、胶体金纸条判读方法
什么是快速检测？
快速检测是一种廉价的、一次性的、基 于膜的检测方法，它能提供分析物存在于 液体样品的视觉证据。
胶体金结果判读方法：
1.色卡法
将反应好的试纸条T线颜色与制作的色卡比较，看颜色属于那一 个档次，则在数据记录时候填写该档次标识。最后做灵敏度比较。 2.图形扫描法
将反应好的试纸条放在扫描仪器内，选择灰度扫描，获得灰度线 条图象。然后打开分析软件，将该灰度图象导入，自动分析出灵敏 度，本底情况。 3.读条仪法
这种检测可以以独立的试纸条，也可以 以装在塑料盒中的形式进行。
总的来说，做此项检测至少需要50ul的 液体法技术优势:简单\现场\快速
试纸条组成结构
控制线（C线）
与常规诊断方法相比：
优点 快速：全部检测过程仅需 5-30分钟。
缺点 定量问题
很多厂家都开发了对应的读条仪，大部分都是采用简单的30万 象素数码摄像头做一个拍摄，然后用软件分析。
谢 谢！
简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，无需专 灵敏度问题 业人员，携带方便，可随时随地进行。
廉价：单个测试条成本极低
可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立 刻拿到结果，不必等待。
稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。
检测标本种类多：在临床检测中，样品可能有尿、血液、 血清、唾液或其他体液。在非临床检测中，样本可能是由 土壤、粉尘、植物或者食品制备的微量溶液。
BIODOT XYZ3050 点膜喷金机
仪器参数 仪器尺寸为： 430mmx410mmX360mm 平台大小: 450mmX70mm 平台移动速度: 0-330mm/sec X、Y、Z轴移动误差: <50um 定位精度: ±10um in 1 axis;±25um in 2 axis 喷点方式 BJQ3000: 非接触喷点 AJQ3000: 非接触喷点 划线宽度 BJQ3000:0.50mm/line （喷点0.20mm/drop）
应用领域
类别 应用领域
检测的物质
人类 医学
各级医院,血站,CDC,防 疫站,诊断中心；家庭自 检；商检系统；边检口 岸；公安系统.
传染病（乙肝五项,HIV, SARS等） 标志物（AFP、肌钙蛋白、粪便血红蛋白等） 女性妊娠（hCG(早孕),LH,FSH)
毒品（吗啡,K粉,摇头丸,冰毒）
农 牧 畜牧兽医站, 商检系统, 传染病（禽流感,兽瘟疫等）