实验四鞭毛染色和藻类的观察

实验四：鞭毛染色和藻细胞的 观察
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鞭毛染色
实验书： P76——实验13
银染法观察鞭毛 细菌运动性观察鞭毛
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细菌的特殊结构染色
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目的要求
1、学习并初步掌握鞭毛染色法；观察细 菌鞭毛的形态特征；观察细菌的运动性。
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鞭毛是细菌的运动“器官”，细菌是否具 有鞭毛，以及鞭毛着生的位置和数目是细菌 的一项重要形态特征。
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美蓝染色法
A染液染色8分钟，蒸馏水冲洗30秒， 吸干
美蓝染色6分钟，蒸馏水冲洗20秒 pH2.0HCl冲洗至洗液变蓝 蒸馏水冲洗20秒，吸干、镜检。
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普通变形杆菌(Proteus vulgaris)
美蓝染色结果
银染结果
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改良的Leifson氏染色法
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鞭毛
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．鞭毛染色法：
（1） 制片：
菌种斜面的冷凝水处，取一环菌 → 将载 片倾斜→ 从带有菌液的菌环上滴下一滴 无菌水→让水自然流下,切勿涂抹→自然 风干→ 固定。
（2） 硝酸银染色：
A染液染色3-5分钟→蒸馏水洗→ 再用B 染液冲洗残水→ 然后使B液充满载片→ 微热至冒气，30-60秒→水洗、吸干→ 镜检.
一般是4个细胞的定形群体，有1个蛋白核。 群体细胞是以长轴互相平行排列成1行。色 素体周生，中间两个细胞为纺锤形，两侧
的细胞弯曲为新月状。
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观察要求： 画图 蛋白核 色素体
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柯式并联藻
绿藻门——绿藻纲——绿球藻目——非集结体亚目— —卵囊藻科——并联藻属——柯式并联藻
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直链藻
硅藻门——中心纲——圆筛藻目——圆筛藻 科——直链藻属——变异直链藻
细胞连成链状在同一胶质管中，壳体和细胞 呈圆柱状，色素体呈小圆盘状，多个。细胞 间有沟状的缢入部，为“假环沟”
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观察要求： 画图 色素体 假环沟 壳体
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细胞中常具有大小不等的强反光颗粒，如多磷酸体，多面体 （羧化酶体），蓝藻体（天门冬氨酸和精氨酸聚合体的结晶， 又称结构颗粒），多聚糖体（又称蓝藻淀粉或糖原）等。
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观察要求： 画图 分清色素区和 中心区伪空胞
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栅藻
绿藻门——绿藻纲——绿球藻目——真集结 体亚目——栅藻科——栅藻属——二形栅藻
细胞长纺锤形，直或弯曲两端渐细，色素体周生（围 绕细胞壁）、片状，以叶绿素a和b最多，还有叶黄 素和胡萝卜素，故呈绿色，具有两个蛋白核；贮藏的 营养物质主要为淀粉和油类，形成淀粉粒。细胞内有 1个或多个细胞核。群体聚集在透明的胶被内，细胞 长轴与群体长轴平行
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观察要求： 画图 淀粉粒 胶被 色素体
制片 每一区放一滴菌液,玻片倾斜,让菌液流到小区的另一端,用 滤纸吸去多余的菌液,室温自然干燥. 染色 加染液覆盖菌面,几分钟后,涂另一区确定最佳时间,染料表 面出现金色膜时,直接用水冲洗,染色约10分钟.自然干燥后观察. 菌体鞭毛பைடு நூலகம்色
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实验报告及思考题
1. 绘图表示芽孢、荚膜和鞭毛的染 色结果。
细菌的鞭毛很纤细，所以，除了很少数能 形成鞭毛束的细菌可以用相差显微镜直接观 察到鞭毛束的存在外，一般细菌的鞭毛均不 能用光学显微镜直接观察到，而只能用电子 显微镜观察。
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要用普通光学显微镜观察细菌的鞭 毛，必须用鞭毛染色法。鞭毛染色方 法很多，但其基本原理类似，即在染 色前先用媒染剂处理，让它沉积在鞭 毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行 染色，显微镜观察。
2. 鞭毛的染色与其他染色有何不同， 为什么？
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藻细胞的观察
微囊藻、硅藻和绿藻等藻类是引起太湖 水华的主要藻种。
铜绿微囊藻
栅藻
柯式并联藻
直链藻
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铜绿微囊藻
蓝藻门——蓝藻纲——色球藻目——微囊藻科——微囊藻属—— 铜绿微囊藻
细胞球形，直径在3-7μm，细胞有伪空胞，细胞分为有光合色 素的色质区和中央的无色的中心质区，中心质区有DNA微丝。