实验用培养基配制

实验用培养基配制

1．牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g, 水1000mL, pH7.4～7.6

2.高氏1号培养基(用于放线菌培养) 可溶性淀粉20g , KNO3 1g, NaCl 0.5g, K2HPO4-

·3H2O 0.5g, MgSO4·7H2O 0.5g, FeSO4·7H2O 0.01g, 水1000mL, pH7.4～7.6。配制时注意，可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。

3．马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌）K2HPO4 1g, MgSO4·7H2O 0.5g, 蛋白胨5g, 葡萄糖10g, 1/3000孟加拉红水溶液100mL,水900mL, 自然pH, 121℃湿热灭菌30min. 待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL).

4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养) 马铃薯(去皮)200g, 蔗糖(或葡萄

糖) 20g, 水1000mL, 配制方法如下: 将马铃署去皮,切成约2cm2的小块,放入1500mL的烧杯中煮沸

30min, 注意用玻棒搅拌以防糊底, 然后用双层纱布过滤, 取其滤液加糖,再补足至1000mL, 自然pH. 霉菌用蔗糖, 酵母菌用葡萄糖.

5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养) 蔗糖

30g, NaNO3 2g, K2HPO4 1g, MgSO4·7H2O 0.5g, KCl 0.5g, FeSO4·7H2O 0.1g, 水1000mL, pH7.0～7.2

6.Hayflik培养基(用于支原体培养) 牛心消化液(或浸出液)1000mL,蛋白胨10g, NaCl 5g, 琼

脂15g, pH7.8～8.0, 分装每瓶70mL, 121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL, 15醋酸铊水溶液2.5mL, 青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL, 以上混合后倾注平板. 注意:醋酸铊是极毒的药品,需特别注意安全操作.

7．麦氏(McCLary)培养基(醋酸钠培养基) 葡萄糖0.1g, KCl 0.18g，酵母膏0.25g，醋酸钠0.82g, 琼脂l.5g，蒸馏水l00mL。溶解后分装试管，1l5℃湿热灭菌15min。

8．葡萄糖蛋白胨水培养基(用于V.P．反应和甲基红试验) 蛋白胨0.5g，葡萄糖0.5g，K2HPO4 0.2g，水100mL, pH7.2, 1l5℃湿热灭菌20min。

9．蛋白胨水培养基(用于吲哚试验) 蛋白胨10g, NaCl 5g, 水1000mL，pH7.2～7.4, 121℃湿热灭菌20min。

10．糖发酵培养基(用于细菌糖发酵试验) 蛋白胨0.2g, NaCl 0.5g, K2HPO4 0.02g，水100mL，溴麝香草酚蓝(1%水溶液) 0.3mL，糖类lg。分别称取蛋白胨和NaCl溶于热水中，调pH至7.4，再加入溴麝香草酚蓝(先用少量95%乙醇溶解后，再加水配成1%水溶液)，加入糖类，分装试管，装量4～5cm高，并倒放入一杜氏小管(管口向下，管内充满培养液)。115℃湿热灭菌20min。灭菌时注意适当延长煮沸时间，尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡。常用的糖类，如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖等(后两种糖的用量常加大为1.5%)。

11.RCM培养基(强化梭菌培养基)(用于厌氧菌培养) 酵母膏3g，牛肉膏l0g，蛋白

胨10g，可溶性淀粉lg，葡萄糖5g, 半胱氨酸盐酸盐0.5g，NaCl 3g，NaAc 3g, 水l000mL, pH8.5，刃天青3mg/L, l2l℃湿热灭菌30min。

12.TYA培养基(用于厌氧菌培养) 葡萄糖40g，牛肉膏2g，酵母膏2g，胰蛋白胨

(bacto-typetone)6g，醋酸铵3g, KH2PO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.2g，FeSO4·7H2O 0.01g，水

1000mL, pH6.5, 121℃湿热灭菌30min。

13．玉米醪培养基(用于厌氧菌培养) 玉米粉65g，自来水1000mL，混匀，煮10min成糊状，自然pH, 121℃湿热灭菌30min。

14．中性红培养基(用于厌氧菌培养) 葡萄糖40g，胰蛋白胨6g，酵母膏2g，牛肉膏2g，醋酸铵3g， KH2PO4 5g，中性红0.2g, MgSO4·7H2O 0.2g，FeSO4·7H2O 0.01g, 水1000ml, pH6.2, 121℃湿热灭菌30min。

15．CaCO3明胶麦芽汁培养基(用于厌氧菌培养) 麦芽汁(6波美)1000mL，水1000mL，CaCO310g, 明胶10g，pH6.8, 121℃湿热灭菌30min。

16．BCG牛乳培养基(用于乳酸发酵)(A)溶液：脱脂乳粉100g，水500mL，加入1.6%溴甲酚绿(B.C.G)乙醇溶液1mL，80℃灭菌

20min。(B)溶液：酵母膏10g，水500mL，琼脂20g,pH6.8,121℃湿热灭菌20min。以无菌操作趁热将(A)、(B)溶液混合均匀后倒平板。

17．乳酸菌培养基(用于乳酸发酵) 牛肉膏5g，酵母膏5g，蛋白胨10g，葡萄糖10g，乳糖

5g, NaCl 5g，水1000mL, pH6.8, 121℃湿热灭菌20min。

18．酒精发酵培养基(用于酒精发酵) 蔗糖10g, MgSO4·7H2O 0.5g, NH4NO3 0.5g, 20%豆芽汁2mL, KH2PO4 0.5g，水100mL，自然pH。

19.柯索夫培养基(用于钩端螺旋体培养) 优质蛋白胨

0.4g, NaCl 0.7g, KCl 0.02g, Na HCO3 0.01g，CaCl 0.02g, KH2PO4 0.09g, NaH 2PO4 0.48g, 蒸馏水

500 mL，无菌兔血清40mL。制法：除兔血清外的其余各成分混合，加热溶解，调pH至7.2, 121℃湿热灭菌20min，待冷却后，加入无菌兔血清，制成8%血清溶液，然后分装试管（5～10mL/管）, 56℃水浴灭活lh后备用。

20．豆芽汁培养基黄豆芽500g，加水1000mL，煮沸lh，过滤后补足水分，121℃湿热灭菌后存放备用，此即为50%的豆芽汁，

用于细菌培养：10%豆芽汁200mL，葡萄糖(或蔗糖)50g，水800mL, pH7.2～7.4。

用于霉菌或酵母菌培养：10%豆芽汁200mL，糖50g，水800mL，自然pH。霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。

21．LB(Luria—Bertani)培养基(细菌培养，常在分子生物学中应用) 双蒸馏水

950mL，胰蛋白胨l0g, NaCl l0g，酵母提取物(bacto- yeast extract)5g，用lmol/L NaOH (约l mL) 调节pH 值至7.0，加双蒸馏水至总体积为1L，121℃湿热灭菌30min。

含氨苄青霉素LB培养基:待LB培养基灭菌后冷至50℃左右加入抗生素，至终浓度为80～100mg/L。

22．复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基) (用于水体中大肠菌群测定)蛋白胨10g，牛肉浸膏5g，酵母浸膏5g，琼脂20g，乳糖10g, K2HPO4 0.5g，无水亚硫酸钠5g, 5%碱性复红乙醇溶液20mL，蒸馏水1000mL。

制作过程：先将蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏和琼脂加入到900mL水中，加热溶解，再加入K2PO4，溶解后补充水至l000mL，调pH至7.2～7.4。随后加入乳糖，混匀溶解后，于115℃湿热灭菌20min。再称取亚硫酸钠至一无菌空试管中，用少许无菌水使其溶解，在水浴中煮沸10min后，立即滴加于20mL 5%碱性复红乙醇溶液中，直至深红色转变为淡粉红色为止。将此混合液全部加入到上述已灭菌的并仍保持融化状态的培养基中，混匀后立即倒平板，待凝固后存放冰箱备用，若颜色由淡红变为深红，则不能再用。

23．乳糖蛋白胨半固体培养基(用于水体中大肠菌群测定) 蛋白胨10g，牛肉浸膏5g，酵母膏5g，乳糖10g，琼脂5g，蒸馏水1000mL，pH7.2～7.4，分装试管(l0mL/管), 115℃湿热灭菌20min。

24．乳糖蛋白胨培养液(用于多管发酵法检测水体中大肠菌群)蛋白胨10g，牛肉膏3g，乳