细菌实验室检查项目

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细菌室常规检测项目:

一形态学检查(Morphological Examination)

(一)各种染色

1革兰染色(Gram stain):将细菌分为革兰阳性菌如葡萄球菌属,链球菌属等;革兰阴性菌如大肠埃希菌沙门菌,志贺菌等。

2抗酸染色(Acid-fast stain):通过染色将细菌分为两大类:抗酸性细菌和非抗酸性细菌,抗酸性细菌种类较少,如结核分枝杆菌,麻风分枝杆菌等。正常:未见。抗酸染色,找到红色分枝杆菌,及报告“找见抗酸分枝杆菌”,量可以用加号表示:

++++ 每个视野>10根

+++ 每个视野发现1~10根

++ 100个视野发现10~99根

+ 300个视野发现3~9根

±300个视野发现1~2根

3异染颗粒染色(Metachromatic granula stain):用于检查棒状杆菌。

4墨汁染色(Indian ink negative staining):用背景着色,而细菌本身不着色的染色方法,用于脑脊液中查找新生隐球菌。正常:未见。

5鞭毛染色(Flagella stain):鞭毛的数目和位置随细菌种类而不同,可分为周毛菌、单毛菌、双毛菌和丛毛菌,是细菌分类和鉴定的重要依据。如霍乱弧菌是单鞭毛菌。

6荚膜染色(Capsules stain):荚膜是细菌壁外一层粘液性多聚物,赋予致病菌的侵袭力。染色将荚膜染成与菌体不同颜色,可作为细菌鉴定的依据。如肺炎链球菌。

(二)涂片检测(smear)

1便球杆比检查( stool cocus/bacillus):即革兰阳性球菌与革兰阴性杆菌之比。

正常值:便球杆比:1:3

临床意义:健康人肠道内寄居着大量厌氧菌和小部分需氧菌。除人乳喂养的婴儿肠道内以革兰阳性球菌为主外,其余人均以革兰阴性杆菌占绝对优势。在肠道发生致病菌如沙门、志贺、弧菌感染时往往由于使用抗生素而是革兰阴性杆菌受到抑制,此时球菌/杆菌比值有可能变大。若比值显著增大,常提示肠道菌群紊乱或发生二重感染。

2标本真菌涂片(fungi):经革兰染色如发现革兰阳性卵圆形芽生孢子或假菌丝,可初步报告为:找到真菌孢子和菌丝。

正常值:未见真菌。

3痰涂片检查(sputum smear):

临床意义:目的确定标本是否适合做细菌培养,初步判定是否有致病菌存在。首先应确定标本是否为来自下呼吸道的痰,其标准为革兰染色WBC>25/LPF(低倍视野),上皮细胞<10/LPF。有些细菌可做初步判断:

1) 肺炎链球菌:革兰染色为阳性球菌,成双或短链状排列

2) 结核分枝杆菌:抗酸染色,找到红色分枝杆菌,及报告“找见抗酸分枝杆菌”,量可以用加号表示:

++++ 每个视野>10根

+++ 每个视野发现1~10根

++ 100个视野发现10~99根

+ 300个视野发现3~9根

±300个视野发现1~2根

3) 真菌:经革兰染色如发现革兰阳性卵圆形芽生孢子或假菌丝,可初步报告为:找到真菌孢子和菌丝。

4) 放线菌及奴卡菌:革兰染色后,插件中央部分菌丝为革兰阳性,而四周放射的末梢菌丝为革兰阴性,切部分菌株有抗酸性。可报告:找见疑似放线菌或奴卡菌。

4淋球菌涂片检查(Neisseria gonorrhoeae)

临床意义:标本:男性以灭菌盐水清洗尿道口,取尿道脓性分泌物涂片;女性尿道炎患者清洗尿道口后从阴道后壁从后向前方压迫尿道使分泌物排出,涂片。子宫颈炎患者先用灭菌盐水清洗宫颈口和阴道壁,再用阴道窥镜压迫子宫阴道部使分泌物排出。涂片革兰染色后镜检,中性粒细胞内有革兰氏阴性双球菌具有诊断价值。报告结果:“中性粒细胞内(或/和)外见到革兰阴性双球菌”。正常:未见。二细菌分离培养(Isolation and Culture of bacteria)

1血培养(blood culture):临床意义:正常人体的血液是无菌的,当人体局部感染向全身播散和出现全身感染时,血液中可出现细菌,依据程度不同称为菌血症或败血症.菌血症往往需要以多次血培养证实,如表皮葡萄球菌,即可是致病菌,也是较常见的污染菌.

正常:无菌生长。最终阴性报告时间为7天。亚急性心内膜炎患者标本如5~6天无菌生长,应继续培养至2周方可报告阴性结果。布鲁氏菌培养第3周做出最终阴性报告。厌氧菌培养应在第2周做出最终阴性报告。真菌血症应在第3周做出最终阴性报告。结核血培养应在第6周做出最终阴性报

告。

2尿液培养(urine culture):临床意义:正常人体膀胱中的尿液是无菌的,用膀胱穿刺取出的尿液应是无菌的。当尿液经尿道排出体外,受到尿道中细菌的污染而混有细菌。取经尿道排出的中断尿,细菌数不会超过104-5ml,因而,以此界限作为诊断泌尿道系感染的依据。

尿液培养反映肾脏、尿道、前列腺等的炎症变化,帮助临床选择有效抗菌药物。正常48小时仍无菌生长可做最终阴性报告。24小时如有细菌生长即做细菌鉴定及药敏。

3痰培养:(sputum culture):临床意义:痰中的病原菌不少属于机会致病菌,与正常菌群同在,在报告时应做说明。对于机会致病菌,一般仅当其数量超过正常菌群时才可报告鉴定结果及药敏试验结果。

检出致病菌时,除报告该菌的鉴定名称外,还需同时报告正常菌群情况。通常以报告甲型链球菌和奈瑟氏菌作为正常菌群存在的指标。

如:甲型链球菌+

奈瑟氏菌+

肺炎克雷伯氏菌2+

此报告表明肺炎克雷伯氏菌在数量上多于正常菌群,诊断为病原菌。未检出致病菌时,应报告“正常菌群”。

4咽拭子培养(pharynx swab culture):临床意义:鼻、咽部的细菌感染病原菌源于口腔,口腔中既有需氧菌,也有厌氧菌。同痰培养一样,病原菌不少属于机会致病菌,与正常菌群同在,要正确区分。未检出致病菌时,应报告“正常菌群”。

5穿刺液标本(包括胸腹水、关节液、心包液)的培养(Serous Cavity Effusion culture):临床意义:正常的穿刺液是无菌的,有感染的情况下,只要检出细菌,通常都可视为是病原菌。正常:无菌生长。6粪便培养(stool culture):临床意义:一方面从肠道大量细菌中找出致病菌,对肠道疾病进行病原学诊断并通过药敏试验为临床提供合适的用药;另一方面可对肠道菌群进行监测,在疾病治疗中预防菌群紊乱。正常:未检出致病菌。

7脑脊液培养(CSF culture):临床意义:正常人体脑脊液是无菌的。

当人体患有脑脊髓膜炎时,在脑脊髓液中可以出现病原菌。常见的病原菌有细菌、真菌和结核菌等。正常:无菌生长。

8化脓及创伤感染标本的培养(Purulent Secretion Culture): 临床意义

组织或器官的化脓性感染,其病原菌的来源可以分为两类

内源性:感染源是炎症局部周围的器官中的正常菌群(常在菌群),由于损伤等因素造成常在菌群进入无菌

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