国内外沙门氏菌检测方法介绍(2)

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AOAC 官方方法 967.25－967.28
食品中的沙门氏菌检测方法
处理样品
35℃ 24±2h
1mL+10mLSC
35℃ 35℃
1mL+10mLTT
24±2h 24±2h（BS 24h&48h）
XLD & HE & BS TSI & LIA
35℃ 24±2h
纯培养物 尿素酶＋ 非沙门氏菌
不纯培养物 MAC or XLD or HE
吲哚＋ & H血清－
尿素酶－ 纯培养物
H抗原，LIA，酚红卫矛醇肉汤，色氨酸肉汤 非沙门氏菌 （KCN，丙二酸盐，吲哚），O抗原 KCN＋ & LIA－
补充生化试验 沙门氏菌
酚红乳糖肉汤，酚红蔗糖肉汤，MR－VP,西蒙氏柠檬酸盐
非沙门氏菌 非沙门氏菌
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ISO 6579:1993(E)
微生物－沙门氏菌检测的通用方法
25g样品 225mL BPW 35℃ or 37℃ 16~20 h 0.1mL+10mL RV 10mL+100mL SC 42℃ 24h 35℃ or 37℃ 24h&48h 酚红煌绿琼脂 （亮绿琼脂） & 第二种选择性平板 phenol red/brilliant green agar 国际标准或实验室方法 35℃ or 37℃ 20~24h 典型菌落（pink red） 无典型菌落再培养18～24h
18h～24h&另外18h～24h
225mL BPW
10mL+100mL TT & SC 煌绿酚红琼脂（亮绿琼脂）&
37±1℃ 20～24h
BS
每个平板选5个菌落
营养琼脂纯化可疑菌落
37±1℃ 18～24h
TSI，尿素酶，赖氨酸脱羧酶，ONPG，VP，吲哚 或商业化快速诊断系统 血清学试验 （O抗原，Vi抗原，H抗原） 报告结果 送参考实验室分型
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加拿大官方食品微生物分析方法
25g样品 脱脂牛奶培养基or煌绿 水溶液 or营养肉汤or缓冲胨水
MFO-21
食品中沙门氏菌的分离和鉴定
35℃ 18~24 h
1mL+9mL SC 1mL+9mL TBG(即TT)
42.5 ℃ 24±2h
35 ℃ 24±2h
BS
&
BGS（煌绿磺胺）
35 ℃ 24±2h & 48 ±2h
pH6.8±0.2 24±2 h 35℃
TT
43±0.2℃ or 35±2.0℃ 24±2h
RV
24±2h 42±0.2℃
BS
&
XLDBiblioteka Baidu
&
HE
24±2h 35℃
TSI & LIA LIA+ LIA－ TSI K/A LIA－ TSI A/A 非沙门氏菌
5种商业生化鉴定系统（API 20E, Enterotube II, Enterobacteriaceae II,MICRO-ID, or Vitek GNI） &O抗原&H抗原 尿素酶，H抗原（多价H抗血清或SpicerEdwards flagellar (H) test ），赖氨酸脱羧酶， 酚红卫矛醇肉汤，色氨酸肉汤（KCN， 丙二酸盐，吲哚），O抗原 酚红乳糖肉汤，酚红蔗糖肉汤，MR－VP,西蒙氏柠檬酸盐
纯培养物
不纯培养物 MAC 纯培养物
TSI &LIA&尿素琼脂 O多价血清，H多价血清
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VIDAS SLM
沙门氏菌在海博公司显色培 养基上的菌落特征（红）
沙门氏菌在CHROMagar 显色培养基上的菌落特（紫）
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TSI（排除A/A H2S－结果 ），靛基质，尿素，KCN，赖氨酸
H2S＋ 靛－ 尿－KCN－ 赖＋（或一项不符） H2S＋ 靛＋ 尿－ KCN－ 赖＋ 甘露醇 山梨醇 沙门氏菌血清学试验 沙门氏菌血清学试验 H2S－ 靛－ 尿－ KCN－ 赖＋/－ ONPG － 沙门氏菌 非沙门氏菌 5
非如左述的各种反应结果
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AOAC沙门氏菌检测方法
AOAC Official Method 967.25 Salmonella in Foods Preparation of Culture Media and Reagents AOAC Official Method 967.26 Salmonella in Processed Foods Detection AOAC Official Method 967.27 Salmonella in Foods Identification AOAC Official Method 967.28 Salmonella in Foods Serological Tests
检验检疫行业标准 出口食品沙门氏菌属（包括亚利桑那菌）检验方法 SN 0170－92
肉类、蛋品
前增菌 直接选择性增菌
缓冲胨水（BPW）
37 ℃ 4h or 20～24h
亚硒酸盐胱氨酸（SC） 四硫磺酸盐煌绿（TTB）
37 ℃ 24± 2h
四硫磺酸盐煌绿（TTB） 亚硒酸盐胱氨酸（SC）
42 ℃ 20 ± 2h
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中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB 4789.4-2003
冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品
前增菌法 25g＋BPW225mL
36 ℃ ± 1 ℃ 一般4h，干蛋品18h～24h
鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品
直接增菌法 25g＋灭菌生理盐水25mL 检样匀液25mL ＋SC100mL
BS
TSI
&
DHL
37 ℃
(亚利桑那菌琼脂)
24～48h
& 赖氨酸脱羧酶
37 ℃ 24～48h
TSI
37 ℃
& 尿素酶
24～48h
生化试验
结果判定
血清学试验 （“O”抗原，“Vi”抗原）
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细菌学分析手册 （BAM） 第五章 沙门氏菌属
样品（20类）25g 225mL 乳糖肉汤（LB）or 胰酪胨大豆肉汤（ TSB）or 煌绿溶液 （BG）or 通用前增菌肉汤（UPB）or营养肉汤（NB）or 再造脱脂奶粉 or 四硫酸盐煌绿（TT）
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
10mL＋MM （或TTB）100mL
42 ℃ 18h～24h
10mL＋SC100mL
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
检样匀液25mL ＋MM （或TTB）100mL
42 ℃ 18h～24h
BS
36 ℃ ± 1 ℃ 40h～48h
DHL（或HE、WS、SS）
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
&
沙门氏菌
非沙门氏菌
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USDA/FSIS MLG 4.02
肉、禽和蛋品中沙门氏菌的分离和鉴定
样品
BPW or BPW（含结晶紫） 0.5 ± 0.05mL ＋10mL TT
42± 0.5℃ 22~24h 35±1℃ 20±24h
0.1 ± 0.02mL
＋10mL mRV
42± 0.5℃ 22~24h
BGS
&
DMLIA
TSI & LIA
血清学试验
or
XLT4
35± 1℃ 18~24h & 48h
商业生化试剂盒或自动鉴定系统 or 传统生化鉴定（AOAC Official Method 967.27 or "Edwards and Ewing's Identification of Enterobacteriaceae"） 报告结果
国内外沙门氏菌检测方法介绍 （二）
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国内外沙门氏菌检测方法（传统方法）
国家标准GB 4789.4-2003 食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验 行业标准SN 0170-92 出口食品沙门氏菌属（包括亚利桑那菌）检验方法 FDA （Food & Drug Administration） 细菌学分析手册（BAM） 第5章 沙门氏菌属 AOAC (Association of Official Analytical Chemists) 官方方法 967.25-967.28 FSIS （FOOD SAFETY AND INSPECTION SERVICE） 微生物实验室手册 第4.02章 肉、禽和蛋品中沙门氏菌的分离和鉴定 ISO 6579:1993(E) 微生物－沙门氏菌检测的通用方法 ISO 6785-1985(E) 牛奶和奶制品-沙门氏菌的检测 加拿大官方食品微生物分析方法 食品中沙门氏菌的分离和鉴定手册
每个平板选5个菌落
营养琼脂纯化可疑菌落 35℃ or 37℃ 18~24h TSI，尿素酶，赖氨酸脱羧酶，ONPG，VP，吲哚 血清学试验 （O抗原，Vi抗原，H抗原） 报告结果 送参考实验室分型
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牛奶和奶制品-沙门氏菌的检测
25mL/g牛奶和奶制品
牛奶
ISO 6785-1985(E)
225mL煌绿溶液 225mL TT & SC