国内外沙门氏菌检测方法介绍(2)
沙门氏菌的检验过程
沙门氏菌的检验因沙门氏菌是最常见的食源性细菌病原体，因此在本节中重点介绍沙门氏菌的检验。
沙门氏菌是食物传播病原菌中研究最活跃的细菌。
从食品中分离和鉴定沙门氏菌，当前通用的方法学分5个步骤：1.前增菌-第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。
2.选择性增菌-在含选择性抑制剂的促生长培养基中间，样品进一步增菌的一个步骤。
此培养基允许沙门氏菌持续增殖，同时阻止大多数其他细菌的增殖。
3.选择性平板分离-这一步采用固体选择性培养基，抑制非沙门氏菌的生长，提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的识别。
4.生物化学筛选-排除大多数非沙门氏菌。
也提供了沙门氏菌培养物菌属的初步鉴定。
5.血清学技术提供了培养物菌种的鉴定。
这五个步骤代表理想状况。
不过一个有经验的检验员，可能在一个或几个步骤中看出特性和差别。
目前检验食品中的沙门氏菌是按统计学取样方案为基础，25g食品为标准分析单位。
三、从食品中分离沙门氏菌样品的制备下面的方法是以25g样品为检测单位，样品：肉汤为1∶9的比例。
除非另有说明，根据混合程度，加足够的肉汤保持1∶9的比例。
对不需准确称量检测的样品，例如：田鸡腿，可参看特定方法说明。
1、干蛋黄、干蛋白、干全蛋、液奶（去脂牛奶，含2%脂肪牛奶，全脂奶，和脱脂奶）、粉状调制食品（蛋糕，甜饼，炸面圈，饼干和面包）、婴儿食品、口食或软管进食含蛋的食品：检验前的冷冻样品最好不要解冻。
如果冷冻样品必须软化以获取待检测部分，则尽可能迅速的解冻所需部分，使竞争菌数少增加或降低沙门氏菌的可能损伤。
解冻需在45℃以下，有自动调温器自控的水浴锅内不断搅拌进行15min或在2�5℃，18小时内解冻。
无菌操作称取25g样品，放入灭菌带螺旋帽的广口瓶中（500mL）或其他合适的容器内。
非粉状的样品，加入225mL灭菌乳糖肉汤。
如果制品是粉状，加入约15mL灭菌乳糖肉汤，用灭菌玻璃棒，匙或灭菌压舌器搅拌，使成均匀悬液。
沙门氏菌的检验方法
沙门氏菌的检验方法沙门氏菌是一种广泛存在于自然界中的革兰氏阴性杆菌，可引起许多动物和人类的肠道感染。
为了检验沙门氏菌的存在，可以采用以下一些常见的方法：1.培养方法：沙门氏菌是一种需氧的微生物，在富含营养成分的寒凝琼脂或低酸性洗涤剂和生物素的培养基上培养。
常用的培养基如VRB （XLD）琼脂、SS琼脂、MS琼脂等。
培养基可以选择均匀地涂布在平板上，也可以用于液体培养。
2.表型特征：沙门氏菌的菌落通常呈现红色或无色，个别品系可能为粉红色。
如在VRB琼脂上，沙门氏菌会变为红色或橙色。
沙门氏菌也可以产生硫化氢，导致MS琼脂呈现黑色。
3.生化特性：沙门氏菌通常可以进行一些常规的生化测试，如产生气泡的气液反应，碳源利用测试和酸碱指示剂变色等。
这些测试可以帮助进一步确认沙门氏菌的存在。
4.血清学方法：采用沉淀试验或血清凝集试验检测血清中的抗生素，以确定是否感染了沙门氏菌。
这些试验通常利用鸡血清，鸡蛋白和羊血清制备的具有特异性的血清反应。
5. 分子生物学方法：沙门氏菌的检验还可以利用PCR技术进行，通过检测沙门氏菌特异性基因如invA基因的存在来确定沙门氏菌的存在。
6.抗生素敏感性试验：通过对沙门氏菌菌株进行抗生素敏感性测试，可以了解菌株对不同抗生素的抗性情况，为临床使用合适的抗生素提供参考。
除了以上提到的方法，还有其他一些检验方法如酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光PCR等也常被用于沙门氏菌的检验。
这些方法不仅可以准确快速地检测沙门氏菌的存在，还可以区分不同菌株和进行进一步的流行病学分析。
总之，通过上述的方法，可以对沙门氏菌进行有效的检验，从而帮助人们及时判断感染情况并及时采取措施进行治疗和预防。
沙门氏菌检验
实验六食品中沙门氏菌的检验一、概述：1.沙门氏菌的形态特征：革兰氏阴性，两端钝圆的短杆菌，无芽孢，一般无荚膜，周身鞭毛，运动力强，具菌毛。
2.沙门氏菌需氧或兼性，10-42℃都可生长，最适生长温度为37℃，最适pH 为6.8-7.8。
3.沙门氏菌食物中毒的食品主要为动物性食品，特别是畜肉类及其制品，污染肉类食物的几率很高。
冷冻对沙门氏菌无杀灭作用，即使在-25℃低温仍可存活10个月左右。
意义：沙门氏菌是引起食物中毒的重要病原菌。
在世界各国各类细菌性的食物中毒中，沙门氏菌常居前列。
因此，沙门氏菌的检测是各国检验机构对多种进出口食品的必检项目之一。
二、操作步骤：1．前增菌——第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。
2．选择性增菌——在含选择性抑制剂的促生长培养基中间，样品进一步增菌的一个步骤。
此培养基允许沙门氏菌持续增殖，同时阻止大多数其他细菌的增殖。
3．选择性平板分离——这一步采用固体选择性培养基，抑制非沙门氏菌的生长，提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的识别。
4．生化鉴定——排除大多数非沙门氏菌，提供了沙门氏菌培养物菌属的生理生化鉴定结果。
5．血清学技术——对沙门氏菌属培养物进行血清学分型鉴定，确定菌型。
主要沙门氏菌有2000多个血清型，可先用多价血清鉴定，再用单因子血清鉴定，先有常见菌型的血清鉴定，再用不常见菌型的血清鉴定。
三、实验过程：1.前增菌将样品鸡蛋壳用灭菌棉签查拭蛋壳后，将棉签上部剪掉，下部放入前增菌培养基BPW中，5个棉签放入150mL前增液中，将制备好的预增菌液于37℃培养8-18h。
（样品液变浑浊即可）2.选择性增菌轻轻摇动培养过的样品混合物，移取4mL前增菌液转种于40mL TTB选择性增菌液内，于42 ℃±1 ℃培养18h-24h。
如果菌株生长过慢（TTB 培养基需现配现用，每组制备40ml增菌液，需加入816uL的碘液后再加入前增液）。
微生物检测系列之沙门氏菌检验技巧及详解
微生物检测系列之沙门氏菌检测过程详解及注意事项
严烨
沙门氏菌病是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病之一，其病原沙门氏菌属肠道细 菌科，包括那些引起食物中毒，导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。它们除可感染人外，还 可感染很多动物包括哺乳类、鸟、爬行类、鱼、两栖类及昆虫。人畜感染后可呈无症状带菌 状态，也可表现为有临床症状的致死疾，它可能加重病态或死亡率，或者降低动物的繁殖生 产力。
所以将沙门氏菌检验规定为食品致病性菌种检验中的重要项目，它的检测过程一般包括 样品前增菌、选择性增菌、选择性平板分离划线、初步生化鉴定（确定可疑菌）、生化鉴定、 血清学鉴定及血清学分型（选做）共计 7 个步骤。整个步骤完全完成至少需要 7 天时间。下 面以样品检测示例对整个检测过程进行分析梳理。
沙门氏菌的检测方法及其原理
沙门氏菌的检测方法及其原理
沙门氏菌的检测方法主要有传统培养法、分子生物学方法和免疫学方法。
以下将分别介绍每种方法的原理。
1. 传统培养法：这是一种常用的检测沙门氏菌的方法。
原理是将样本（如食物、病人体液等）接种在含有适宜营养物质的培养基上，利用沙门氏菌的生长特性进行培养。
经过一定时间的孵育，形成典型的沙门氏菌菌落后，可以通过形态特征和生理生化试验进行鉴定。
2. 分子生物学方法：分子生物学方法主要是利用沙门氏菌特异性的基因或DNA序列来检测其存在。
最常用的方法是聚合酶链反应（PCR），其中利用特异性引物扩增含有沙门氏菌特定序列的DNA片段。
扩增后的产品可以通过凝胶电泳进行检测与鉴定。
此外，还有核酸杂交、测序和引物探针技术等方法也可以用于沙门氏菌的检测。
3. 免疫学方法：免疫学方法利用沙门氏菌的抗原与抗体之间特异性反应进行检测。
其中最常用的方法是酶联免疫吸附测定法（ELISA）。
ELISA基于固相试剂酶标板，将沙门氏菌的抗原固定在试剂酶标板上，然后加入特异性抗沙门氏菌的抗体。
经过洗涤步骤，再加入辅助抗体结合酶标记物。
最后加入底物，沙门氏菌存在时可通过颜色变化来判断阳性反应。
这些方法在实验室或食品安全监测中广泛应用，能够高效、准确地检测沙门氏菌的存在。
沙门氏菌鉴定流程
沙门氏菌的检测方式主要包括血常规检查、便常规检查、ELISA法检查等，能够判断疾病的严重程度。
1、血常规检查：感染沙门氏菌时，多数患者的白细胞、中性粒细胞以及嗜酸性粒细胞计数出现偏低的情况，大儿童的白细胞计数通常出现升高的现象，该项结果可以辅助诊断沙门菌病。
2、便常规检查：感染沙门氏菌以后，部分患者可能会出现黏液样变或血便的情况，通过明确患者急性胃肠炎的症状来辅助诊断沙门菌病。
3、ELISA法检查：检测患者血清中沙门菌抗原、抗体是否出现异常的情况，有助于沙门菌感染的诊断。
除此之外，沙门氏菌的检测方式还包括B超检查、肥达试验等，如果自身的病情比较严重，建议应及时到正规医院的感染病科进行检查并治疗，以免延误病情。
沙门氏菌的检测方法
ＧｕｉｄｅｔｏＣｈｉｎｅｓｅＰｏｕｌｔｒｙ２００６年第２３卷第２４期禽业园地近年来，沙门氏菌食物中毒和动物感染沙门氏菌十分严重。
由肠炎沙门氏菌引起人的急性胃肠炎，在世界各国有增加的趋势，已成为国际公共卫生的一个重要课题。
沙门氏菌作为致病菌检测的一项重要指标，在公共卫生、食品卫生、畜牧兽医和出入境检验检疫中均有重要意义。
下面就对沙门氏菌的检测方法进行简单的介绍。
一常规方法从病料中分离培养为基础的常规方法，对这种方法的相关研究较多。
虽然该方法是迄今为止最确实的方法，但由于沙门氏菌常在肠系膜和膜淋巴结中而不在肠腔中出现等原因，故排泄到粪中去的细菌可以是间歇的和低密度的，所以有时必须重复分离并采取大量样品在增菌肉汤中培养。
此外，这种常规方法为确诊而进行的细菌学鉴定需要几人才能报告结果，因此该方法不够简便、准确和快速。
传统的沙门氏菌检测方法的改进内容主要集中在选择性培养基的选择上。
如由于沙门氏菌具有可特异性地分解丙烯乙二醇产酸，使中性红指示剂变红的生化特征，在分离培养基中加入丙烯乙二醇、５－溴－４－氯－３－吲哚－β－Ｄ呋喃半乳糖，可实现对沙门氏菌的分离与鉴定工作同步进行，使沙门氏菌检测所需时间从常规方法的４～６ｄ缩短至２ｄ；采用Ｓａｌｍｏｓｙｓｔ培养基进行增菌后，在Ｒａｍｂａｃｈ培养基上进行分离培养，可实现对沙门氏菌的快速检测，大大减少了检测中所需培养基种类，同时培养过程全部在３７℃下进行，操作简便。
二应用免疫酶标技术目前己有应用ＥＬＩＳＡ对猪沙门氏菌抗体进行检测的报道。
张艳红通过试验确定了快速检测肠炎沙门氏菌的竞争ＥＬＩＳＡ方法（Ｃ－ＥＬＩＳＡ）。
目前正在研制肠炎沙门氏菌特异性单克隆抗体Ｈｇｍ，两株单抗联合使用将会更准确地检测肠炎沙门氏菌。
杨爱萍的试验结果表明单抗直接ＥＬＩＳＡ法灵敏度高，特异性强，可避免人为因素造成的假阴性，且能在短时间内快速筛去大量的阴性样品。
检测时间比传统方法大为缩短，为加快产品流通提供了方便与可能。
沙门氏菌菌检测方法
沙门氏菌菌检测方法
沙门氏菌是一种常见的致病菌，可以引起食物中毒和肠道感染。
为了检测沙门氏菌的存在，可以采取以下方法:
1. 食品样品检测: 可以通过采集食品样品（如肉类、蔬菜、蛋类等）进行检测。
样品收集后，可以使用培养基或PCR等方法进行沙门氏菌的检测。
2. 环境检测: 对于可能被沙门氏菌污染的环境，比如家禽养殖场、食品加工厂等地方，可以采集环境中的样品，进行沙门氏菌的检测。
3. 人体检测: 对于可能感染沙门氏菌的患者，可以通过采集其粪便、尿液等样品，进行沙门氏菌的检测。
这些检测方法可以通过培养分离、PCR、免疫层析法等技术来进行沙门氏菌的检测。
在进行检测时，需要严格遵守实验室操作规范，确保检测结果的准确性和可靠性。
沙门氏菌的检验方法与注意事项
沙门氏菌的检验方法与注意事项在日常微生物检验中，沙门氏菌比较常见，是一种致病性细菌，国家规定在每25g的食品样本中不能检测出沙门氏菌，所以在检验沙门氏菌时，对试剂与培养基有很高的要求，下面本文针对沙门氏菌的检验方式和注意事项作出简单介绍！一、沙门氏菌检测的原因和意义根据相关统计显示，我们国家因细菌性食物中毒的人中，有70%-80%左右的人是通过沙门氏菌造成的。
人体倘若含有过多的大量沙门氏菌的动物性食物，就会造成细菌性感染，以此在毒素的影响下产生食物中毒，造成伤寒、胃肠炎及副伤寒。
而且沙门氏菌的传播途径较多，肉、蛋和其他食物，从加工至销售的整个过程当中都极易引发感染情况，所以准确、有效检验沙门氏菌有重大意义。
二、沙门氏菌的检验（一）前增菌(无选择性)BPW（缓冲蛋白胨水）属于一种比较常见的增菌培养基，不包括任何抑制物质，有助于修复受损的沙门氏菌。
促使受损的沙门氏菌细胞复苏至相对平稳的生理状态。
（二）选择性增菌TTB（四硫磺酸钠煌绿增菌液）内含有硫代硫酸钠，结合四硫磺酸钠，能够对肠道共生菌进行有效抑制，而包含四硫磺酸钠还原酶的细菌，可以在这一培养基当中生长繁殖；煌绿及胆盐能够控制大肠群菌、革兰氏阳性菌的繁殖，而伤寒沙门氏菌依旧可以生长。
SC（亚硒酸盐胱氨酸增菌液）能够对其他和伤寒沙门氏菌进行选择性增菌，其含有的亚硒酸结合蛋白胨内的含硫氨基酸，促使亚硒酸与硫的复合物生产，对细菌硫的代谢产生干扰，进而减少肠球菌、变形杆菌、大肠埃希氏菌的繁殖生长。
（三）分离培养基(选择性)①BS（亚硫酸铋琼脂）内含亚硫酸铋指示剂，可对大肠菌群、革兰氏阳性菌进行抑制，但不会对沙门氏菌的繁殖产生影响；其他沙门氏菌、伤寒杆菌可以借助葡萄糖，还原亚硫酸铋，使其形成硫酸铋，使黑色菌落附近有黑棕色的环，对光可看到金属光泽。
BS的压力和温度不可过高，避免选择性下降，需在使用前配制，放置阴暗处储存，48小时后丧失选择性，储存不合理会造成色浅，表示效果开始减弱，联合TTB、SC使用能够提高检出率。
国家食品沙门氏菌检测（内含简图很有用）
国家⾷品沙门⽒菌检测（内含简图很有⽤）国家⾷品沙门⽒菌检验前⾔沙门⽒菌是肠杆菌科中⼀种重要的⼈畜共患病原菌，⾰兰⽒阴性，是细菌性⾷物中毒的重要致病菌。
⾎清型种类繁多，⽬前全世界已分离出2523 个⾎清型，我国已发现216个[1].。
与⼈类疾病有关的⾎清型主要集中于A~E 群，包括伤寒沙门⽒菌、（甲、⼄、丙型）副伤寒沙门⽒菌、⿏伤寒沙门⽒菌、猪霍乱沙门⽒菌、肠炎沙门⽒菌等，其中以⿏伤寒沙门⽒菌、肠炎沙门⽒菌及猪霍乱沙门⽒菌最为常见。
它不仅能导致鸡⽩痢、鸡伤寒、副伤寒、仔猪副伤寒等动物疾病，还能使⼈类发⽣伤寒、副伤寒、败⾎症、胃肠炎和⾷物中毒[2]。
根据国际惯例, 要求对易受沙门⽒菌污染的⾷品进⾏分类管理, 以使⼤多数⾷物不含沙门⽒菌, 从⽽有效预防沙门⽒菌引发的各种疾病。
20 世纪50 年代以来,国内外学者进⾏了⼤量的研究, 从以传统⽅法为基础发展到以免疫学为基础的或以分⼦⽣物学为基础的快速检测⽅法, 并在实践检验中不断取得新进展。
这些⽅法包括酶联免疫吸附试验法、免疫磁珠法、免疫荧光标记法、噬菌体裂解试验法、核酸探针法等[3]。
本实验采⽤的是传统标准检测⽅法，包括前增菌,选择性增菌,选择性平板分离,⽣化试验,⾎清学分型鉴定五个步骤。
1材料与⽅法1.1设备和材料1.1.1 恒温培养箱：36℃±1℃，42℃±1℃1.1.2 拍击式均质器。
1.1.3 电⼦天平：感量0.1g。
1.1.4 ⽆菌锥型瓶：容量500ml,250ml。
1.1.5 微量移液器及吸头。
1.1.6 ⽆菌培养⽫：直径90mm。
1.1.7 ⽆菌试管：3mm×5mm、10mm×75mm。
1.1.8 ⽆菌⽑细管。
1.1.9 三⾓烧瓶。
1.2培养基和试剂1.2.1缓冲蛋⽩胨⽔（BPW）：称取蛋⽩胨10g，NaCl 5g，Na2HPO4`12H2O 9g，KH2PO41.5g,加蒸馏⽔1L，搅拌加热煮沸⾄完全溶解，分装三瓶，121℃，灭菌20min。
沙门氏菌检验及分析
沙门氏菌检验及分析沙门氏菌是一种常见的致病菌，能引起人体消化系统的疾病，如沙门氏菌食物中毒和肠炎等。
对食品和环境样品中的沙门氏菌进行检验和分析是非常重要的。
沙门氏菌的检验方法主要包括培养法和分子生物学法。
培养法是传统的沙门氏菌检验方法，该方法使用一系列专门的培养基，如XLD（Xylose Lysine Deoxycholate Agar）和SS（Salmonella Shigella Agar）等，以培养和鉴定沙门氏菌菌株。
将样品加入适当的培养基，然后在适当的温度下进行培养。
经过一段时间后，观察培养基上的菌落形态特征，如形状、色素和粘度等，进一步进行鉴定。
还可以使用生化试剂和抗生素敏感性试验来确定菌株的身份。
分子生物学法是一种快速准确的沙门氏菌检验方法，其基于沙门氏菌特有的基因序列，如invA和fliC等。
通过PCR（聚合酶链反应）技术，可以扩增出这些目标序列，并通过相应的检测方法，如凝胶电泳或实时荧光PCR等，进行检测。
这种方法不仅能够快速鉴定沙门氏菌，还可以检测沙门氏菌的数量和种类等重要信息。
沙门氏菌的分析主要涉及其在食品和环境样品中的存在和数量。
对于食品样品，可以通过抽样和分析的方法来确定沙门氏菌的存在情况和数量。
一般来说，可以选择一些高风险的食品，如家禽肉类、蛋制品和生鲜蔬菜等，进行检测。
对于环境样品，主要包括水源、污水、土壤等，可以通过采样和培养法来确定沙门氏菌的存在。
沙门氏菌的分析结果可以提供重要的参考信息，用于评估食品和环境的安全性。
通过分析沙门氏菌的数量和种类等信息，可以判断食品和环境中是否存在潜在的健康风险，并采取相应的措施进行预防和控制。
沙门氏菌临床检测质量控制指标及标准操作程序
沙门氏菌临床检测质量控制指标及标准操作程序1. 引言1.1 概述本文旨在介绍沙门氏菌临床检测质量控制指标及标准操作程序。
沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌，它可以引发沙门氏菌感染，导致人们出现食物中毒等健康问题。
为了确保食品安全和公共卫生，对沙门氏菌进行准确可靠的检测非常关键。
1.2 文章结构本文分为引言、正文、沙门氏菌临床检测质量控制指标、标准操作程序和结论五个部分。
正文将详细介绍沙门氏菌的相关知识，包括其生物学特性、传播途径以及潜在风险。
随后，我们将重点探讨如何进行沙门氏菌的临床检测，并提供相应的质量控制指标和标准操作程序。
1.3 目的本文目的是提供临床实验室从事沙门氏菌检测工作所需的正确操作步骤和相关质量控制指标。
通过遵循标准程序并确保质量控制准则的合规性，临床实验室可以提高检测的准确性和可靠性，从而更好地服务于食品安全和公共卫生领域。
以上是“1. 引言”部分的内容，主要涵盖了概述、文章结构和目的。
通过引言部分的介绍，读者能够对本文要讨论的内容有一个整体的了解，并明确阅读该文的价值所在。
2. 正文沙门氏菌（Salmonella），又称沙门氏埃希菌，是一种常见的致病性细菌。
它可以通过食物、水源以及接触感染等途径传播给人体，引发沙门氏菌肠道感染或伤寒等严重疾病。
因此，对于沙门氏菌的临床检测质量控制非常重要。
在进行沙门氏菌的临床检测时，需要遵循一系列标准操作程序以确保结果的准确和可靠性。
这些操作程序包括但不限于样本采集、处理和分析过程中的相关步骤。
首先，在样本采集时，应该选择合适的标本类型。
一般来说，粪便、血液、尿液等可以作为潜在的沙门氏菌感染标本类型。
采集样本应注意无菌操作，避免污染和交叉感染。
其次，在处理样本前，需要进行适当的预处理。
这包括将样本进行离心分离，并使用合适的缓冲液稀释。
此外，在进行培养前应彻底混匀样品，确保细菌均匀分布。
接下来是沙门氏菌的检测。
传统方法主要是通过进行培养和鉴定来确定有无沙门氏菌的存在。
微生物检验之沙门氏菌的检验
微生物检验之沙门氏菌的检验人沙门氏菌病有四类综合症：沙门氏菌病；伤寒；非伤寒型沙门氏菌败血症和无症状带菌者。
沙门氏菌胃肠炎是由除伤寒沙门氏菌外任何一型沙门氏菌而所致，通常表现为轻度，持久性腹泻。
伤寒实际上是由伤寒沙门氏菌所致。
未接受过治疗的病人致死率可超过10%，而对经过适当医疗的病人其致死率低于1%，幸存者可变成慢性无症状沙门氏菌携带者。
这些无症状携带者不显示发病症状仍能将微生物传染给其他人(传统的例子就是玛丽伤寒)。
非伤寒型沙门氏菌败血症可由各型沙门氏菌感染所致，能影响所有器官，有时还引起死亡。
幸存者可变成慢性无症状沙门氏菌携带者。
一、致病性沙门氏菌胃肠炎，潜伏期一般6-72小时，主要症状为恶心、呕吐、腹绞痛、腹泻、发热寒颤头痛。
病程一般1-2天或更长。
感染剂量为15-20个菌，死亡率达1-4%。
最易感群体是年幼儿童、虚弱者、年长老人、免疫缺陷者等。
污染源主要是人和家畜的粪便，沙门氏菌常存在于动物中，特别是禽类和猪。
在许多环境中也有存在。
从水，土壤，昆虫中，从工厂和厨房设施的表面和动物粪便中已发现该类细菌。
它们可以存在于多类食品中，包括生肉，禽，奶制品和蛋，鱼，虾和田鸡腿，酵母，椰子，酱油和沙拉调料，蛋糕粉，奶油夹心甜点，顶端配料，干明胶，花生露，橙汁，可可和巧克力。
沙门氏菌属也是嗜温性细菌，在中等温度，中性pH，低盐和高水活度条件下生长最佳。
生长最低水活度为0.94。
兼性厌氧，对中等加热敏感。
同样，该菌属能适应酸性环境。
通过卫生以防止二次污染；蒸煮；巴氏消毒等控制。
正常家庭烹调，个人卫生可以防止煮熟食品的二次污染，以及控制时间和温度一般都能充分防止沙门氏菌病的发生。
二、检验因沙门氏菌是最常见的食源性细菌病原体，因此在本节中重点介绍沙门氏菌的检验。
沙门氏菌是食物传播病原菌中研究最活跃的细菌。
从食品中分离和鉴定沙门氏菌，当前通用的方法学分5个步骤：1.前增菌-第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。
沙门氏菌检验方法及检验结果
沙门氏菌检验方法及检验结果发布时间：2022-09-16T08:48:36.490Z 来源：《医师在线》2022年5月10期作者：贾敏[导读]沙门氏菌检验方法及检验结果贾敏（四川省射洪市疾病预防控制中心?四川遂宁629200）【摘要】目的：研究分析沙门氏菌检验方法及检验结果。
方法：本次研究选取我单位的送检样本展开分析，样本的送检时间在2020年4月-2021年12月，本次研究的样本量为80份，将其分为观察组（予以血清学鉴定和全面生化反应检验）和对照组（予以常规检验），分组方法为随机数字表法，单组样本量一致，均为40份。
对比分析两组的检验结果。
结果：从两组的检验有效率方面进行分析，观察组和对照组存在着明显差异，检验有效率分别为95.00%和75.00%，观察组明显更高，差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论：在沙门氏菌的检验中，采用血清学鉴定和全面生化反应检验的效果更加明显，检验的有效率明显提高，这对临床疾病的治疗提供了可靠的参考依据，值得临床推广。
【关键词】沙门氏菌；检验方法；检验结果沙门氏菌属于食源性致病菌，这种类型的病菌能够专门针对人和动物致病，其主要是寄生在人和动物的肠道内，而且沙门氏菌在大自然中极为常见，一旦受到病菌感染，患者常会表现出恶心、呕吐、腹泻等症状，尤其对于身体素质较差的老人和儿童，在感染后病情会更加严重，严重威胁着人们的身体健康[1]。
因此，对于沙门氏菌采取有效的检验措施，尽早确定疾病接受对应的治疗，这对患者的身体康复有着重要帮助。
目前，临床对于沙门氏菌有着多种检验方案，常用的检验方法有氧化氢酶检验法，全面生化反应检验和血清学鉴定，这些检验方法在检验结果上存在着一定的差异性[2]。
鉴于此，本次研究选取我单位的80份送检样本展开分析，分别采取常规检验和血清学鉴定以及全面生化反应检验，对检验结果展开分析，现将具体内容阐述如下。
1.资料与方法1.1一般资料选取我单位在2020年4月-2021年12月期间送检的80份样本展开分析，按照随机数字表法分为观察组和对照组，每组均有40份。
沙门氏菌检测标准、方法及实验关键点
．检验沙门氏菌的原因和意义：据统计我国细菌性食物中毒中70%～80%是由沙门氏菌引起的，人一旦摄入含有大量沙门氏菌(105～(106个/g)的动物性产品，就会引起细菌性感染，进而在毒素作用下发生食物中毒导致胃肠炎、伤寒和副伤寒且沙门氏菌的传播媒介众多，肉、蛋以及食品从加工到出售的过程中都十分容易发生污染。
因此对沙门氏菌的检验事关重大。
二、检测及鉴定：沙门氏菌的检测要在二级生物安全实验室及二级生物安全柜(在负压情况下防止致病微生物气溶胶飘离实验室对实验人员及环境造成污染)中进行。
沙门氏菌典型菌落形态：生化鉴定显示：API20E 生化鉴定是根据快速酶促反应及代谢产物的检测技术发展的一种细菌编码鉴定法，广泛应用于临床、食品中革兰氏阴性杆菌的快速鉴定。
限值要求：参考CAC、ICMSF、欧盟、澳大利亚和新西兰、美国、加拿大、香港、台湾等国际组织、国家和地区的即食食品中沙门氏菌限量标准及规定，《GB29921-2013食品中致病菌限量》按照二级采样方案对所有11类食品设置沙门氏菌限量规定，具体为n=5，c=0，m=0（即在被检的5份样品中，不允许任一样品检出沙门氏菌）。
三、沙门氏菌传统检测方法的关键控制点1、样品处理尽可能缩短解冻时间，使竟争菌群生长最少，并减小对沙门氏菌的损伤致病菌取样一定要均匀并具有代表性（蛋黄蛋清混匀取样）。
2、培养基及培养方面（1）没有一种培养基可疑准确无误的筛选出沙门氏菌，必须选择多种选择性培养基同时筛选，只能说显色培养基综合选择性更强。
（2）试剂和培养基的配置一定要严格按照说明书配置，是否需要高压灭菌，添加剂用量及培养基保存条件。
（3）有1%沙门氏菌乳糖发酵阳性，为了避免漏检乳糖阳性菌必须选择不依赖乳糖的培养基，目前BS 培养基认为是最适合的。
（4）BS培养基是分离沙门氏菌的高效培养基，特别适用于伤寒类的沙门氏菌，不是所有的选择性培养基都能有效分离出伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌，BS是分离伤寒类沙门氏菌的首选培养基。
简述沙门氏菌快速检测的方法
别， 以及鉴 定 。 体 的操作 步 骤为 ： 具 取试 料 ２ ｇ 加入 ５，
装 有 ２ ５ ｌ 冲 蛋 白胨 水 的 ５ ０ ｌ的广 口瓶 中 ， ２ｍ 缓 ０ｍ 于 ３ ｃ培 养 １ ￣ ０ 。取 所 获得 的预 增菌 培养 物 ０ １ ｌ ７Ｉ ＝ ６ ２ｈ ．ｍ ，
沙 门 氏菌属 是 一 群 寄生 于 人 和动 物 肠 道 内 的无
芽 孢 直 杆 菌 ， 兰 氏 阴 性 ， 化 特性 和 抗 原 结 构 相 革 生
似 ， 性 厌 氧 。除 极 少 数 外 ， 常 都 以 周 身 鞭 毛 运 兼 通
动 。绝 大 多 数发 酵 葡 萄糖 产 酸 产气 ， 也偶 尔 有 不 产 酸 不 产 气 的 ， 三 糖 铁 琼 脂 上 常 产 生 硫 化 氢 ， 般 在 一 利用 枸 橼 酸盐 。除 亚利 桑那 沙 门 氏菌 外 ， 部 分 沙 大 门氏 菌都 不发 酵 乳 糖 【 通 常 不 利 用 杨 苷 、 醇 、 ｌ 】 ， 肌 蔗 糖 、 金盏 花 醇 和棉 子糖 ， 不 产 生 Ｏ 甲基 葡 萄 糖 侧 也 ｔ 一 苷 。不 产吲 哚 ， 分解 尿素 ， 不 甲基红 试验 阳性 ， Ｖ 但 Ｐ
分离 与鉴 定工 作 同步 进行 ，使 沙 门 氏菌检 测所 需 时 间从 常 规 方法 的 ４ ６ ～ ｄ缩 短 至 ２ ； ｄ 采用 Ｓ ｌ ｓｓ 培 ａ ｙｔ ｍｏ
养基 进 行增 菌 后 ， Ｒ ｍ ａｈ培 养 基 上进 行 分 离培 在 ａ ｂｃ 养 ， 用 于对 沙 门 氏菌 的快 速 检测 ， 大减 少 了检测 可 大
２ 对 传 统 的 沙 门 氏茵 检 测 方 法 的 改进
由于 检测 沙 门 氏菌 的传 统 培养 基选 择性 和 特异 性 不 能达 到今 人满 意 的效果 ，沙 门 氏菌在饲 料 中 的
沙门氏菌血清学鉴定方法
沙门氏菌血清学鉴定方法
1. 血清凝集试验，这是一种常见的血清学鉴定方法，通过将患者的血清与沙门氏菌的抗原混合，观察是否发生凝集反应来确定是否感染了沙门氏菌。
凝集反应的出现表明患者体内存在与沙门氏菌抗原相对应的抗体，从而可以进行诊断。
2. 血清中的抗体浓度测定，通过测定患者血清中特定抗体的浓度来判断是否感染了沙门氏菌。
通常，感染后，患者体内会产生特定的抗体以应对沙门氏菌的感染，因此可以通过测定血清中特定抗体的浓度来进行诊断。
3. 补体结合试验，这是一种常用的血清学鉴定方法，通过观察患者血清中的抗体是否能与沙门氏菌的抗原结合，从而激活补体系统，引起溶解反应，来确定是否感染了沙门氏菌。
总的来说，沙门氏菌的血清学鉴定方法是通过检测患者血清中的特定抗体来确定是否感染了该细菌。
这些方法需要在专业实验室条件下进行，并且需要严格的操作和解读，以确保诊断的准确性。
同时，血清学鉴定方法通常需要与其他临床症状和实验室检测结果相结合，才能最终确定患者是否感染了沙门氏菌。
沙门氏菌检测操作步骤
沙门氏菌检测操作步骤沙门氏菌是一种常见的细菌，其存在于许多环境中，包括食物、水源和动物体内。
由于沙门氏菌可能引起严重的食物中毒症状，因此对其进行检测和控制非常重要。
在本文中，我将介绍沙门氏菌检测的操作步骤，以帮助您了解如何进行有效的沙门氏菌检测。
1. 选择适当的检测方法在进行沙门氏菌检测之前，首先需要选择适当的检测方法。
常见的检测方法包括传统培养法、分子生物学方法和免疫学方法。
传统培养法需要将样品在富含营养物的培养基上培养并观察有无沙门氏菌生长。
分子生物学方法利用PCR技术检测沙门氏菌的DNA，而免疫学方法则使用抗体来检测沙门氏菌的存在。
根据您的需求和实验条件，选择合适的检测方法非常重要。
2. 样品采集在进行沙门氏菌检测之前，需要采集样品。
这些样品可以是食物、水源、表面物体或动物组织。
确保在采集样品之前，正确消毒采样工具以避免任何污染。
确保将样品收集到干净、密封的容器中，以避免污染和交叉感染。
3. 样品准备收集样品后，需要进行适当的样品准备以便于后续的沙门氏菌检测。
对于食物样品，可以使用均匀悬浮液方法将样品与适当的缓冲液混合均匀。
对于水样或表面物体样品，可以使用封闭的容器直接收集样品。
对于动物组织样品，需要先将样品进行处理，如挤压、切割或研磨，以获得足够的样品量进行检测。
4. 样品分析根据选择的检测方法，进行相应的样品分析。
如果使用传统培养法，可以将样品转移到含有适当培养基的培养皿中，并进行孵育。
培养过程中，需要注意培养皿的环境条件，如温度、pH值和氧气含量。
如果使用分子生物学方法，可以提取样品中的DNA，并使用PCR技术进行检测。
如果使用免疫学方法，可以使用特定的抗体与样品中的沙门氏菌结合，然后观察是否发生免疫反应。
5. 结果解读根据样品分析的结果，进行结果解读。
对于传统培养法，可以观察培养皿中是否有沙门氏菌的典型形态或颜色变化。
对于分子生物学方法，可以通过PCR扩增的产物的大小和带状图样来判断是否存在沙门氏菌的DNA。
沙门氏菌几种检测方法简介与比较
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1
2
3
国内外沙门氏菌检测方法（传统方法）
国家标准GB 4789.4-2003 食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验 行业标准SN 0170-92 出口食品沙门氏菌属（包括亚利桑那菌）检验方法 FDA （Food & Drug Administration） 细菌学分析手册（BAM） 第5章 沙门氏菌属 AOAC (Association of Official Analytical Chemists) 官方方法 967.25-967.28 FSIS （FOOD SAFETY AND INSPECTION SERVICE） 微生物实验室手册 第4.02章 肉、禽和蛋品中沙门氏菌的分离和鉴定 ISO 6579:1993(E) 微生物－沙门氏菌检测的通用方法 ISO 6785-1985(E) 牛奶和奶制品-沙门氏菌的检测 加拿大官方食品微生物分析方法 食品中沙门氏菌的分离和鉴定手册
BGS
&
DMLIA
TSI & LIA
血清学试验
or
XLT4
35± 1℃ 18~24h & 48h
商业生化试剂盒或自动鉴定系统 or 传统生化鉴定（AOAC Official Method 967.27 or "Edwards and Ewing's Identification of Enterobacteriaceae"） 报告结果
检验检疫行业标准 出口食品沙门氏菌属（包括亚利桑那菌）检验方法 SN 0170－92
肉类、蛋品
前增菌 直接选择性增菌
缓冲胨水（BPW）
37 ℃ 4h or 20～24h
亚硒酸盐胱氨酸（SC） 四硫磺酸盐煌绿（TTB）
37 ℃ 24± 2h
四硫磺酸盐煌绿（TTB） 亚硒酸盐胱氨酸（SC）
42 ℃ 20 ± 2h
18h～24h&另外18h～24h
225mL BPW
10mL+100mL TT & SC 煌绿酚红琼脂（亮绿琼脂）&
37±1℃ 20～24h
BS
每个平板选5个菌落
营养琼脂纯化可疑菌落
37±1℃ 18～24h
TSI，尿素酶，赖氨酸脱羧酶，ONPG，VP，吲哚 或商业化快速诊断系统 血清学试验 （O抗原，Vi抗原，H抗原） 报告结果 送参考实验室分型
每个平板选5个菌落
营养琼脂纯化可疑菌落 35℃ or 37℃ 18~24h TSI，尿素酶，赖氨酸脱羧酶，ONPG，VP，吲哚 血清学试验 （O抗原，Vi抗原，H抗原） 报告结果 送参考实验室分型
12
牛奶和奶制品-沙门氏菌的检测
25mL/g牛奶和奶制品
牛奶
ISO 6785-1985(E)
225mL煌绿溶液 225mL TT & SC
纯培养物
不纯培养物 MAC 纯培养物
TSI &LIA&尿素琼脂 O多价血清，H多价血清
14
VIDAS SLM
沙门氏菌在海博公司显色培 养基上的菌落特征（红）
沙门氏菌在CHROMagar 显色培养基上的菌落特（紫）
15
16
4
中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB 4789.4-2003
冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品
前增菌法 25g＋BPW225mL
36 ℃ ± 1 ℃ 一般4h，干蛋品18h～24h
鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品
直接增菌法 25g＋灭菌生理盐水25mL 检样匀液25mL ＋SC100mL
吲哚＋ & H血清－
尿素酶－ 纯培养物
H抗原，LIA，酚红卫矛醇肉汤，色氨酸肉汤 非沙门氏菌 （KCN，丙二酸盐，吲哚），O抗原 KCN＋ & LIA－
补充生化试验 沙门氏菌
酚红乳糖肉汤，酚红蔗糖肉汤，MR－VP,西蒙氏柠檬酸盐
非沙门氏菌 非沙门氏菌
11
ISO 6579:1993(E)
微生物－沙门氏菌检测的通用方法
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
10mL＋MM （或TTB）100mL
42 ℃ 18h～24h
10mL＋SC100mL
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
检样匀液25mL ＋MM （或TTB）100mL
42 ℃ 18h～24h
BS
36 ℃ ± 1 ℃ 40h～48h
DHL（或HE、WS、SS）
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
&
沙门氏菌
非沙门氏菌
7
USDA/FSIS MLG 4.02
肉、禽和蛋品中沙门氏菌的分离和鉴定
样品
BPW or BPW（含结晶紫） 0.5 ± 0.05mL ＋10mL TT
42± 0.5℃ 22~24h 35±1℃ 20mRV
42± 0.5℃ 22~24h
10
AOAC 官方方法 967.25－967.28
食品中的沙门氏菌检测方法
处理样品
35℃ 24±2h
1mL+10mLSC
35℃ 35℃
1mL+10mLTT
24±2h 24±2h（BS 24h&48h）
XLD & HE & BS TSI & LIA
35℃ 24±2h
纯培养物 尿素酶＋ 非沙门氏菌
不纯培养物 MAC or XLD or HE
8
9
AOAC沙门氏菌检测方法
AOAC Official Method 967.25 Salmonella in Foods Preparation of Culture Media and Reagents AOAC Official Method 967.26 Salmonella in Processed Foods Detection AOAC Official Method 967.27 Salmonella in Foods Identification AOAC Official Method 967.28 Salmonella in Foods Serological Tests
BS
TSI
&
DHL
37 ℃
(亚利桑那菌琼脂)
24～48h
& 赖氨酸脱羧酶
37 ℃ 24～48h
TSI
37 ℃
& 尿素酶
24～48h
生化试验
结果判定
血清学试验 （“O”抗原，“Vi”抗原）
6
细菌学分析手册 （BAM） 第五章 沙门氏菌属
样品（20类）25g 225mL 乳糖肉汤（LB）or 胰酪胨大豆肉汤（ TSB）or 煌绿溶液 （BG）or 通用前增菌肉汤（UPB）or营养肉汤（NB）or 再造脱脂奶粉 or 四硫酸盐煌绿（TT）
13
加拿大官方食品微生物分析方法
25g样品 脱脂牛奶培养基or煌绿 水溶液 or营养肉汤or缓冲胨水
MFO-21
食品中沙门氏菌的分离和鉴定
35℃ 18~24 h
1mL+9mL SC 1mL+9mL TBG(即TT)
42.5 ℃ 24±2h
35 ℃ 24±2h
BS
&
BGS（煌绿磺胺）
35 ℃ 24±2h & 48 ±2h
25g样品 225mL BPW 35℃ or 37℃ 16~20 h 0.1mL+10mL RV 10mL+100mL SC 42℃ 24h 35℃ or 37℃ 24h&48h 酚红煌绿琼脂 （亮绿琼脂） & 第二种选择性平板 phenol red/brilliant green agar 国际标准或实验室方法 35℃ or 37℃ 20~24h 典型菌落（pink red） 无典型菌落再培养18～24h
pH6.8±0.2 24±2 h 35℃
TT
43±0.2℃ or 35±2.0℃ 24±2h
RV
24±2h 42±0.2℃
BS
&
XLD
&
HE
24±2h 35℃
TSI & LIA LIA+ LIA－ TSI K/A LIA－ TSI A/A 非沙门氏菌
5种商业生化鉴定系统（API 20E, Enterotube II, Enterobacteriaceae II,MICRO-ID, or Vitek GNI） &O抗原&H抗原 尿素酶，H抗原（多价H抗血清或SpicerEdwards flagellar (H) test ），赖氨酸脱羧酶， 酚红卫矛醇肉汤，色氨酸肉汤（KCN， 丙二酸盐，吲哚），O抗原 酚红乳糖肉汤，酚红蔗糖肉汤，MR－VP,西蒙氏柠檬酸盐
TSI（排除A/A H2S－结果 ），靛基质，尿素，KCN，赖氨酸
H2S＋ 靛－ 尿－KCN－ 赖＋（或一项不符） H2S＋ 靛＋ 尿－ KCN－ 赖＋ 甘露醇 山梨醇 沙门氏菌血清学试验 沙门氏菌血清学试验 H2S－ 靛－ 尿－ KCN－ 赖＋/－ ONPG － 沙门氏菌 非沙门氏菌 5
非如左述的各种反应结果