人类外周血淋巴细胞培养

四、实验操作步骤
1、器皿清洗消毒（技术员完成）
2、培养基配制（技术员完成） 3、采血接种（教师协助学生完成） 4、培养过程处理（技术员完成） 5、培养68小时后加秋水仙素（技术员完成）
6、收集细胞（学生独立完成）
人体显微形态学实验
人类外周血
淋巴细胞培养
一、实验目的
1、熟悉淋巴细胞培养原理 2、掌握人类外周血淋巴细胞培养技术
二、实验意义
细胞培养在现代医学和生物科学研究中应用广泛，优点是： 1.直接观察活细胞的形态结构和生命活动。用于细胞学、遗传学、 免疫学、实验医学和肿瘤学 等多种学科研究. 2.直接观察细胞的变化可便于摄影。 3.研究细胞种类如低等到高等到人类、胚胎到成体、正常组织到肿 瘤。 4.便于使用各种技术：相差、荧光、电镜、组化、同位素标记等方 法观察和研究细胞状况。 5.是分子生物学和基因工程学的研究对象，也是其主要的组成部分。
6.易于施用物理、化学生物的实验研究。
7.易于提供大量生物性状相似的实验对象,耗资少比较经济。 8.成为生物制品单克隆抗体生产和基因工程等的材料来源。
三、实验原理
健康成年人体内淋巴细胞约有500×109个，其中 约2%在外周血中循环。在通常情况下，它们处 于G0或G1期。植物血球凝集素（PHA）可以刺激 淋巴细胞进行有丝分裂。在相当于人体内环境（温 度、营养条件、生长因子等）中， G0或G1期淋巴细 胞转化为淋巴母细胞，重新进入增殖周期，进行有 丝 分裂。当体外培养至约72小时，大多数细胞处于第3 增殖周期内，此时用有丝分裂Байду номын сангаас断剂处理，可使细 胞 停止在有丝分裂中期。