标本的正确采集
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标本的正确采集、转运与处理
一、标本正确采集与转运的重要性和特殊性:
1、是实验前质量控制的主要内容;
2、主动权在临床科室;
3、占标本全部运行时间的50%,如果处理不好,全面质量管理就是一句空话。
二、病原微生物标本的采集、转送与处理原则:
1、安全性原则:防止实验室感染;
2、采集标本必须戴手套,穿工作服,必要时戴口罩;
3、容器必须不漏,并置入防漏塑料袋中,外侧分隔袋中插申请单;
4、不把带针头的注射器直接送入实验室,除非将针头保护起来;
5、泄漏的标本应要求重送,并高压灭菌就地处理。
三、标本选择和收集的一般要求:
1、选择适当标本,避免常住菌(背景菌)污染;
2、选择获取标本的正确解剖部位;
3、要有适宜的采样技术和设备;
4、厌氧标本很少用拭子,最好床边采集标本,不能冷冻,常温保存;
5、量要足,否则会有假阴性;
6、标本要标记姓名、编号、来源、日期等;
7、容器应不漏,并能提高致病菌生存率。
四、标本转送的一般要求:
1、2h内立即转送;
2、小量厌氧菌标本应15—30min内送检,活检组织在厌氧系统内25℃可存20—24h;
3、对环境敏感的细菌,如志贺氏菌、淋病球菌、脑膜炎奈瑟氏菌、流感嗜血杆菌,对冷敏感,故不要冷冻来自脑脊液、生殖器、眼或内耳标本;
4、标本的长距离转送要包装和标记。
五、用于厌氧菌培养的标本的接受要求:
1、可接受的标本:
用注射器的抽取物、组织、穿刺术的标本、胆汁、血液、骨髓、支气管刷、粪便查梭菌。
2、不可接受的标本:
鼻咽拭子、齿龈拭子、痰和气管抽取物,胃和肠道内容物、肛拭、接近皮肤和粘膜的分泌物、溃疡及粘膜层表面、排出的尿或导尿、外阴拭子、阴道或子宫拭子、前列腺分泌物或精液、粪便或直肠拭子。
六、常见临床微生物标本的采集与接种要求:
1、脓肿标本的采集:
1.1组织或液体标本优于拭子;
1.2开放式脓肿:脓肿深部边缘采样,脓肿壁或基底采样检出率高;
1.3封闭式脓肿:注射器抽吸脓肿壁边的脓液;
1.4涂片检查:脓汁标本在培养的同时均须涂片。
培养基选择:普通血培养瓶、厌氧血培养瓶、血平皿、中国蓝平皿、肉汤管、沙保罗氏真菌平皿。
2、脑脊液标本的采集:
2.1腰穿法采集脑脊液3—5ml打入血培养瓶中或放入无菌试管中,立即送检;
2.2注意保温,不可置冰箱保存,因为会使病原菌死亡,尤其是脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎链球菌及流感嗜血杆菌;
2.3脑脓肿吸出物尚须检测厌氧菌和寄生虫。
培养基选择:普通血培养瓶、厌氧血培养瓶、血平皿、中国蓝平皿、流感嗜血杆菌平皿。
3、穿刺液(胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液)标本的采集:3.1胸(腹)水的标本量为5—10ml,心包液为1—5ml;
3.2抽取后,以无菌操作注入血培养瓶;
3.3涂片检查,这类标本因原部位是无菌的,只要检出细菌即可诊断感染的类型,故直接涂片很重要。
培养基选择:普通血培养瓶、厌氧血培养瓶、血平皿、中国蓝平皿、流感嗜血杆菌平皿、沙保罗氏真菌平皿、罗—琴氏鸡蛋培养基。
4、胆汁标本的采集:
4.1胆汁标本一般以十二指肠引流术采集,所得胆汁分A、B、C 三部分,A液来自总胆管,B液来自胆囊,C液来自肝胆道;
4.2涂片检查,通常取离心后的沉淀物涂片;
4.3胆汁本身有抑菌作用,为提高阳性检出率,胆汁的接种量为肉汤管的1/10—1/20。
培养基选择:普通血培养瓶、厌氧血培养瓶、血平皿、中国蓝平皿、肉汤管、沙保罗氏真菌平皿、SS平皿。
5、尿液标本的采集:
5.1一般原则通常应采集早晨起床后第一次尿液送检。原则上应选择在抗菌药物应用之前采集尿液;
5.2沙门氏菌感染一般在病后2周左右采集尿液培养;
5.3钩端螺旋体感染一般在病后2周左右采集尿液培养;
5.4结核分支杆菌感染患者应停药1—2天后,留取晨尿或24h 尿的沉渣部分10—15ml培养;
5.5女性宜用肥皂水清洗外阴周围,用湿纱布清洁周围,排尿弃去前段尿,留取中段尿10ml左右于无菌容器内;
5.6男性用肥皂水清洗阴茎头,用湿纱布清洁周围,排尿弃去前段尿,取中段尿10ml左右于无菌容器内;
5.7留取尿液标本应立即送检,否则尿中细菌迅速繁殖,使菌落计数不可靠而影响诊断;
5.8无菌导尿管采集尿液,应在排出15ml尿液后收集标本,但导尿有潜在引入尿道菌的危险。
5.9留置导尿管采尿,应先以75%酒精消毒导管口,用无菌注射器收集5—10ml尿,长期留置导尿管患者,应在更换新尿管时留取
尿标本;
5.10尿液应在收集后1h内接种,阴性杆菌菌落计数≥105CFU/ml、阳性球菌菌落计数≥104CFU/ml有意义;
5.11念珠菌尿是异常的,不需定量;
5.12注意事项:
5.12.1尿液标本的采集和培养中最大的问题是污染杂菌,故应严格进行无菌操作;
5.12.2尿液标本采集后应尽快送检,否则会影响细菌检查的正确性;
5.12.3通常应取晨起后第一次尿液送检;
5.12.4多数药物均通过尿液排泄,因此,无论用何种方法采集尿液均宜在用药之前进行;
5.12.5尿液中不得加防腐剂或消毒剂。
培养基选择:血平皿、中国蓝平皿、流感嗜血杆菌平皿、沙保罗氏真菌平皿、L型培养基。
6、粪便标本的采集:
6.1常规培养不主张用肛拭子,自然排便后,挑取有脓血、粘液部位的粪便3—5g盛于无菌的容器内;
6.2直肠拭子法如不易获得粪便时或排便困难的患者及幼儿,可采用直肠拭子方法采集,取出后插入无菌试管内送检;
6.3非肠道传染病住院病人24h≥5次稀便或软便,要考虑艰难梭菌有感染的可能性;