酶标仪软件操作步骤
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酶标仪软件操作步骤
一、软件运行前的连接
酶标仪插上电源,和电脑连接好后,打开电脑和酶标仪开关,酶标仪至少稳定15min后开始读数,效果比较好。注意,当酶标仪处于power on 的状态时,不要手动打开酶标板室和比色皿室的门,以免紫外辐射的伤害或者仪器的损伤。
二、软件的运行
1.打开桌面快捷方式SkanIt RE for MSS
2.4.2运行软件,出现Log on To SkanIt software的界面。
name默认为“admin”, password为空
3.点OK进入SkanIt software 2.
4.2界面,New session-新建任务程序,Open session-打开已有程序。
4.在界面上方的setting中选择Instrument,出现Instrument setting的界面,在Instrument中选中Multiskan spectrum on COMⅠ,Themo Electron。点击右侧的setup,在serial number中输入1500-850,然后点击OK。再点击Default instrument右边的connect,即可设定好连接。然后点击close关闭窗口。
三.New session操作
1.新建任务程序:
→点击new session进入protocol options界面,在session name中输入新的程序名称
→点击next进入plate layout options界面,在select plate template 中选择所需模板类型(一般96孔板选择use default,比色皿选择cuvette,其他的可以选择相应的类型)
→输入plate layout name(系统默认的与session name相同)
→点击next进入Definition done界面,在select location中选择任务程序所要保存的目的文件夹(该界面可进行新建,重命名及删除文件夹操作)→点击finish完成新建,进入SkanIt software 2.4.2程序操作主界面(主要有三大块: platelayout用于模板区域选择,protocol用于程序编辑,results 用于数据处理)。
layout对模板区域进行选取
→点击wizard进入选取模板区域操作界面fill wizard(任务类型type有:blank空白,calibrator标准蛋白,control对照,empty空白,unkown一般为样品)。
→在右边模板中选取开始点位置,即红圆点所在位置。
→选取方向,在Filling order中可通过箭头设定。
→对于blank,在 replicates中填写好重复数,选择好开始位点和方向,点击Add可完成。
→对于calibrator,在calibrators 中填写标准蛋白的个数,在replicates中填写好重复数,选择好开始位点和方向。如有浓度梯度,可选择Generate series进行设置。
例如,取7个浓度蛋白做标准曲线,稀释倍数分别为20,40,80,160,320,640,1320,每个浓度重复两次,则在 calibrators 中填写7,在 replicates 中填写2,选择好开始位点和方向。然后选中Generate series,出现conventions 的界面,在Initial value中填写20,在operators中选择Multiply,step by 中填写2,点击ok。
→对于control,操作基本和calibrators相似。
→对于Empty操作基本和blank相似。
→对于unknown,填写好 replicates, unknowns并选择好开始位点和方向,点击Add即可完成。
→第一块板填满后,有时会自动进入第二块板的编辑,注意看Fill wizard 的模板下方的current plate,如果显示为2/2,则可以直接关掉窗口,模板区域即可编好。
标注:对于单一型任务可先选取全模板【即在 unkown选项中设为模板最大孔数】,然后对不要的区域进行删除。
对于非blank和empty型任务,若有浓度差,可勾选generate series,然后进行设定:series为有规则的浓度差,multiple values为不规则的浓度差。有规则的可通过运算公式,系统直接算出,无规则的通过键盘输入,点击add 进行添加。
3.编辑程序
→选好所用模板区域后,点击protocol进入程序编辑界面。
→在protocol properties所属框内的execution order选项中选中数据读取路径(共有四种,第一种一般为常用路径,一次读四个孔)。
→在Settle delay选项中设定读数时间间隔。一般比色皿不需要读书时间间隔,设置为零即可,对于测量板而言,由于板在移动过程中液体表面共振波的影响,需要稳定一段时间,一般设置为5s in a 6-well plate,300ms in a 96-well plate,<20ms in a 384-well plate。
→在steps所属框内空白处或选中程序单击鼠标右键得到应用程序子菜单。
→在子菜单中选取你所要运行的程序(如常用的程序有photometric,photometric-scanning,Incubate和shake等),并在该程序的选项中设定你所需的参数。一般测蛋白含量选择photometric,在wavelength中设置好波长即可。
→所有程序编写好后,在session中点击save保存好模板程序,不保存将无法运行上面所设的模板程序。
4.测读数据
→在Execution所属框内点击connect链接机器,链接过程中会出现机器状态列表窗口,无异常后点Close关闭。
→在Execution所属框内点击run plate out弹出酶标板载板,把酶标板底部擦干后放上去后,确保平稳后点击run plate in,等酶标板进去。
→在Execution所属框内点击Execute session按钮运行所设程序,弹出Run name窗口,点击Ok确认运行。接着会出现读数窗口,不要关闭读数窗口,读数完毕后窗口会自动消失,并弹出酶标板载板。
注:以前,无法进行人工读板,这是因为机器序列号的设置不对,要仔细查看机器上的机器序列号,将正确的序列号填入操作软件中的设置中。
5.数据分析及保存
→仪器读数完毕后,系统自动进入Results操作界面,在Result界面所属框中,可对所得数据进行分析。
→在Result所属框中,单击要分析数据的程序,如测蛋白一般选择的