SN 2157-2008-T 进出口动物源性食品中痢菌净残留量检测方法 液相色谱-质谱 质谱法
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／ 犛 犖 犜２ １ ５ ７—２ ０ ０ ８ ５． ５ 超声波发生器 。 ５． ６ 旋转蒸发器 。 。 感量为 ０． ５． ７ 分析天平 ： ０ ０ １ｇ ／ 。 ４０ ０ ０ｒ ｍ ｉ ｎ ５． ８ 高速离心机 ： ５． ９ 漩涡混合器 。 具塞 。 ５． １ ０ 聚四氟乙烯离心管 ： ５ ０ｍ Ｌ， ５ ０ｍ Ｌ、 ２ ５ ０ｍ Ｌ。 ５． １ １ 浓缩瓶 ： ６ 试样制备与保存 ６． １ 试样制备 鸡肝 、 鸡肾 、 鱼肉样品类 ６． １． １ 猪肉 、 ， 将 其 切 成 碎 块 后， 依次用组织捣碎机将样品加工成 从所取全部样品中取出有代表性 样 品 约 １ｋ ｇ 馅状或浆状 。 混匀 ， 均分成两份作为试样 ， 分装入洁净的盛样袋内 ， 密闭 ， 标明标记 。 ６． １． ２ 牛奶类 ， 将其混合或搅拌均匀 ， 均分成两份作为试样 ， 分装入洁净的 盛 样 袋 内 ， 密 取乳及乳制品样品 ２ ０ ０ｇ 闭， 标明标记 。 ６． １． ３ 蜂蜜类 ， 取代表性蜂蜜样品２ 对无结晶的蜂蜜样品将其搅拌均匀 ， 均分成两份作为试样 ， 分装入洁净的 ０ ０ｇ 盛样袋内 ， 密闭 ， 标明标记 ； 对有结晶析出的蜂蜜样品 ， 在密闭情况下 ， 将样品瓶置于不超过６ ０ ℃ 的水浴 中温热 ， 振荡 ， 待样品全部融化后搅匀 ， 迅速冷却至室温 ， 均分成两份作为试样 ， 分装入洁净的盛样袋内 ， 密闭 ， 标明标记 。 在融化时应注意防止水分挥发 。 ６． ２ 试样保存 肌肉组织及器脏组织类 、 水 产 品 类 试 样 于 －１ 乳及乳制品类和蜂蜜类试样于 ８ ℃ 以 下 冷 冻 保 存； ０ ℃ ～４ ℃ 保存 。 在抽样及制样的操作过程中 ， 应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化 。 ７ 测定步骤 ７． １ 提取 鸡肝 、 鸡肾 、 鱼肉样品 ７． １． １ 猪肉 、 （ ） ） 称取 ５ｇ 样品 精确至 ０． 于５ 加入 ５ｇ 硫酸钠 （ 与样品充分混匀 ， 再 ０ １ｇ ０ｍ Ｌ 具塞离心管中 ， ４． ３ ／ ， ） ， 将上层提取液移入 于 ４０ 加入 ２ 高速均质提取 ３ｍ ０ ０ｒ ｍ ｉ ｎ 条件下离心 ３ｍ ｉ ｎ ０ｍ Ｌ 三氯甲烷 （ ｉ ｎ， ４． ２ 残渣用 ２×２ 合并提取液 。 将所得提取液于 ４ ２ ５ ０ｍ Ｌ 浓缩瓶中 ， ０ｍ Ｌ 三氯甲烷重复提取两次 ， ０ ℃ 水浴 ） 减压浓缩至近干 ， 残渣加入 ５ｍ 水溶液 （ 溶解 。 Ｌ 甲醇 ４． ４ 牛奶样品 ７． １． ２ 蜂蜜 、 ） ， 于５ 加入１ 超声波提取１ 加入 精确至 ０． 称取 ５ｇ 样品 （ ０ｍ Ｌ 具 塞 离 心 管 中， ０ｍ Ｌ 水， ０ｍ ｉ ｎ ０ １ｇ ／ 将下层提取液移入浓缩瓶中 。 再加 于 ４０ 振荡提取 ５ｍ ０ ０ｒ ｍ ｉ ｎ 条件下离心 ３ｍ ｉ ｎ， ２ ０ｍ Ｌ三氯甲烷 ， ｉ ｎ， 入２ 重复上述操作两次 ， 合并 提 取 液 。 将 所 得 提 取 液 于 ４ 残 ０ｍ Ｌ 三氯甲烷 ， ０ ℃ 水 浴 减 压 浓 缩 至 近 干， 渣加入 ５ｍ 水溶液溶解 。 Ｌ 甲醇 ７． ２ 净化 ， 分别用 ５ｍ 水预 处 理 ＨＬ 保 持 柱 体 湿 润， 将上述提取液 Ｌ 甲醇 ， ５ｍ Ｌ 甲醇 Ｂ 固相萃取小柱（ ４． ９） ／ 转移至上述柱中 ， 弃去流出液 ， 用１ 以小于 １ｍ ０ｍ Ｌ 甲醇洗脱 ， Ｌ ｍ ｉ ｎ 速度收集全部洗脱液于 ５ ０ｍ Ｌ浓 经０． 供液相 缩 瓶中 ， 于４ ２μ ｍ 滤膜过滤后 ， ０ ℃ 水浴中旋转浓缩至近干 。 用甲醇溶解并定容至１． ０ｍ Ｌ， 色谱 质谱／质谱定量测定和确证 。
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
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进出口动物源性食品中 痢菌净残留量的检测方法 ／ 液相色谱 质谱 质谱法
犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犿 犲 狌 犻 狀 犱 狅 狓狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊狅 犳犪 狀 犻 犿 犪 犾 狅 狉 犻 犻 狀 狇 犵 —犎 ／ 犳 狅 狉 犻 犿 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狅 狉 狋 犘 犔 犆 犕 犛 犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱 狆 狆
相对离子丰度／％ 允许的最大偏差／％ ０ ＞５ ±２ ０ ０～５ ０ ＞２ ±２ ５ ０～２ ０ ＞１ ±３ ０ ０ ≤１ ±５ ０
７． ４ 空白试验 除不加试样外 ， 按上述相同条件和步骤进行 。 ８ 结果计算和表述 ） 用色谱数据处理机或按式 （ 计算试样中痢菌净残留含量 ， 计算结果需扣除空白值 。 １
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／ 犛 犖 犜２ １ ５ ７—２ ０ ０ ８ ７． ３ 测定 ７． ３． １ 液相色谱条件 ） 或相当者 ； Ｚ Ｏ Ｒ Ｂ ＡＸＳ Ｂ Ｃ ａ １ ５ ０ｍｍ×２． １ｍｍ， ３． ５μ ｍ， 色谱柱 ： １ ８， ） ） ； 甲醇 水（ ｂ ７ ０＋３ ０ 流动相 ： ） ／ ｃ ０． ２ｍ Ｌ ｍ ｉ ｎ； 流速 ： ） ｄ ２ ０ ℃； 柱温 ： ） ｅ １ ０μ Ｌ。 进样量 ： ７． ３． ２ 质谱条件 ） 电喷雾离子源 ； ａ 离子源 ： ） 正离子扫描 ； ｂ 扫描方式 ： ） ； 多反应监测 （ ｃ ＭＲＭ） 检测方式 ： ） ） ： ｄ Ｉ Ｓ ５５ ０ ０Ｖ； 电喷雾电压 （ ） ） ： ； ｅ Ｇ Ｓ １ ３ ０Ｐ ａ 雾化气压力 （ ） ： ； ｆ Ｃ ＵＲ） ２ ５Ｐ ａ 气帘气压力 （ ） ） ： ； Ｇ Ｓ ２ ２ ０Ｐ ａ 辅助气压力 （ ｇ ） ： ｈ Ｔ ＥＭ） ５ ５ ０ ℃； 离子源温度 （ ） 、 定量离子对 、 去簇电压 （ 碰撞气能量 （ 及碰撞室出口电压 （ 见表 １。 ｉ Ｄ Ｐ） Ｃ Ｅ） Ｃ Ｘ Ｐ） 定性离子对 、 表 １ 痢菌净定性离子对 、 定量离子对 、 去簇电压 、 碰撞气能量和碰撞室出口电压
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进出口动物源性食品中 痢wenku.baidu.com净残留量的检测方法 液相色谱 质谱／ 质谱法
１ 范围 本标准规定了进出口动物源性食品中痢菌净残留量的测定 液相色谱 质谱／质谱法 。 本标准适用于猪肉 、 鸡肝 、 鸡肾 、 鱼肉 、 牛奶 、 蜂蜜中痢菌净的测定和确证 。 ２ 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其随后所有 的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本标准 ， 然而 ， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本标准 。 ／ ／ Ｇ Ｂ Ｔ６ ６ ８ ２—２ ０ ０ ８， Ｉ Ｓ Ｏ３ ６ ９ ６： １ ９ ８ ７， ＭＯ Ｄ） Ｇ Ｂ Ｔ６ ６ ８ ２ 分析实验室用水规格和实验方法 （ ３ 方法提要 试样中残留的痢菌净用三氯甲烷均质或超声波提取 ， 提取液经浓缩 ， 用液 ＨＬ Ｂ 固相萃取小柱净化 ， 相色谱 质谱／质谱法测定和确证 ， 外标法定量 。 ４ 试剂与材料 ／ 除另有规定外 ， 所用试剂均为分析纯 ， 水为 Ｇ Ｂ Ｔ６ ６ ８ ２ 规定的一级水 。 色谱纯 。 ４． １ 甲醇 ： 色谱纯 。 ４． ２ 三氯甲烷 ： 经６ 贮于密封容器中备用 。 ５ ０ ℃ 灼烧 ４ｈ， ４． ３ 无水硫酸钠 ： 。 水（ 体积比 ） ４． ４ 甲醇 １＋１， ， ： 分子式 ： 纯度大于等于 ９ Ｍ ｅ ｕ ｉ ｎ ｄ ｏ ｘ Ｃ ４． ５ 痢菌净标准物质 （ ７％ 。 ｑ １ １Ｈ １ ０Ｎ ２Ｏ ３） ） ， ／ 准确称取适量的标准物质 （ 用甲醇 （ 配制成浓度为 １０ ０ ０μ ４． ６ 标准储备液的配制 ： ４． ５ ４． １） ｍ Ｌ的 ｇ 标准储备液 ， 避光 －１ ８ ℃ 保存 。 ） ， 准确移取一定体积的标准储备液 （ 用甲醇 （ 稀释成适当浓度的 ４． ７ 标准中间工作液的配制 ： ４． ６ ４． １） 标准中间工作液 ， 避光 －１ ８ ℃ 保存 。 ） ， 准确移取一定体积的标准中间工作液 （ 可根据需要用空白样品提取 ４． ８ 基质标准工作液的配制 ： ４． ７ 液稀释成适当浓度的标准工作液 ， 当天配制 。 ， 或相当者 。 ４． ９ 固相萃取小柱 ： Ｗ ａ ｔ ｅ ｒ ｓｏ ａ ｓ ｉ ｓＨＬ Ｂ 固相萃取小柱 ， ５ ０ ０ｍ ６ｍ Ｌ， ｇ 有机系 ， ４． １ ０ 微孔滤膜 ： ０． ２ ０μ ｍ。 ５ 仪器和设备 ） 。 配有电喷雾离子源 （ ５． １ 液相色谱串联四极杆质谱仪 ： Ｅ Ｓ Ｉ ５． ２ 固相萃取装置 。 ５． ３ 组织捣碎机 。 ５． ４ 均质器 。
痢菌净
７． ３． ３ 定量测定 根据样液中被测痢菌净药物含量 ， 选定浓度相近的基质标准 工 作 液 。 基 质 标 准 工 作 液 和 待 测 样 液 中痢菌净药物的响应值均应在仪器检测的线性范围内 。 对标准溶液与样液等体积分组分时段参插进样 ， 标 测定 。 外标法定量 。 在上述液相色谱 质谱／质谱条件下 ， 痢菌 净 标 准 物 质 的 保 留 时 间 约 为 ２． ３ｍ ｉ ｎ 准溶液的选择性离子流图参见附录 Ａ 中图 Ａ． １。 ７． ３． ４ 定性测定 对基质标准工作液及样液按上述规定的条件进行测定时 ， 如果样 液 与 基 质 标 准 工 作 液 的 选 择 离 子 图中 ， 在相同保留时间有峰出现 ， 所有选择离子均应出现 。 则根据定性选择离子对的种类及其相对丰度 比对其进行阳性确证 。 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差见表 ２。 表 ２ 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
名称 定性离子对 ／ ｍ ｚ ／ ２ １ ９． ２ １ ４ ３． ２ ／ ２ １ ９． ２ １ ５ ９． ９ ／ ２ １ ９． ２ １ ８ ５． ０ 定量离子对 ／ ｍ ｚ 去簇电压 （ ／ Ｄ Ｐ） Ｖ 碰撞气能量 （ ／ Ｃ Ｅ） Ｖ ２ ９ ／ ２ １ ９． ２ １ ４ ３． ２ ７ ０ ２ ０ ２ ６ １ ０ 碰撞室出口电压 （ ／ Ｖ Ｃ Ｘ Ｐ）
２ ０ ０ ８ ０ ９ ０ ４ 发布
２ ０ ０ ９ ０ ３ １ ６ 实施
中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局
发 布
／ 犛 犖 犜２ １ ５ ７—２ ０ ０ ８
前 言
本标准的附录 Ａ 为资料性附录 。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 。 本标准起草单位 ： 中 华 人 民 共 和 国 吉 林 出 入 境 检 验 检 疫 局、 中华人民共和国重庆出入境检验检 疫局 。 本标准主要起草人 ： 张代辉 、 牟峻 、 荣会 、 王国民 、 韩大川 、 王明泰 。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准 。
犡＝
犃 ×犮×犞 犃ｓ × 犿
…………………………（ １）
３
／ 犛 犖 犜２ １ ５ ７—２ ０ ０ ８ 式中 ： — — 试样中痢菌净残留量 ， ／ ） ； 单位为毫克每千克 （ 犡— ｍ ｋ ｇ ｇ — — 样液中痢菌净的峰面积 ； 犃— — — 基质标准工作液中痢菌净的浓度 ， ／ ； 单位为微克每毫升 （ 犮— ｍ Ｌ） ｇ μ — — 样液最终定容体积 ， ； 单位为毫升 （ ｍ Ｌ） 犞— — — 基质标准工作液中痢菌净的峰面积 ； 犃ｓ— — — 最终样液代表的试样质量 ， ） 。 单位为克 （ 犿— ｇ ９ 测定低限和回收率 ９． １ 测定低限 （ 犔 犗 犙） ／ 。 本方法的测定低限为 ０． ０ １ ０ｍ ｋ ｇ ｇ ９． ２ 回收率 ／ ／ 回收率的实验数据见表 ３。 在 ０． ｋ ｋ ０ ４ ０ｍ ０ １ ０ｍ ～０． ｇ ｇ ｇ 添加浓度范围内 ， ｇ 表 ３ 不同添加浓度回收率数据
／ 犛 犖 犜２ １ ５ ７—２ ０ ０ ８ ５． ５ 超声波发生器 。 ５． ６ 旋转蒸发器 。 。 感量为 ０． ５． ７ 分析天平 ： ０ ０ １ｇ ／ 。 ４０ ０ ０ｒ ｍ ｉ ｎ ５． ８ 高速离心机 ： ５． ９ 漩涡混合器 。 具塞 。 ５． １ ０ 聚四氟乙烯离心管 ： ５ ０ｍ Ｌ， ５ ０ｍ Ｌ、 ２ ５ ０ｍ Ｌ。 ５． １ １ 浓缩瓶 ： ６ 试样制备与保存 ６． １ 试样制备 鸡肝 、 鸡肾 、 鱼肉样品类 ６． １． １ 猪肉 、 ， 将 其 切 成 碎 块 后， 依次用组织捣碎机将样品加工成 从所取全部样品中取出有代表性 样 品 约 １ｋ ｇ 馅状或浆状 。 混匀 ， 均分成两份作为试样 ， 分装入洁净的盛样袋内 ， 密闭 ， 标明标记 。 ６． １． ２ 牛奶类 ， 将其混合或搅拌均匀 ， 均分成两份作为试样 ， 分装入洁净的 盛 样 袋 内 ， 密 取乳及乳制品样品 ２ ０ ０ｇ 闭， 标明标记 。 ６． １． ３ 蜂蜜类 ， 取代表性蜂蜜样品２ 对无结晶的蜂蜜样品将其搅拌均匀 ， 均分成两份作为试样 ， 分装入洁净的 ０ ０ｇ 盛样袋内 ， 密闭 ， 标明标记 ； 对有结晶析出的蜂蜜样品 ， 在密闭情况下 ， 将样品瓶置于不超过６ ０ ℃ 的水浴 中温热 ， 振荡 ， 待样品全部融化后搅匀 ， 迅速冷却至室温 ， 均分成两份作为试样 ， 分装入洁净的盛样袋内 ， 密闭 ， 标明标记 。 在融化时应注意防止水分挥发 。 ６． ２ 试样保存 肌肉组织及器脏组织类 、 水 产 品 类 试 样 于 －１ 乳及乳制品类和蜂蜜类试样于 ８ ℃ 以 下 冷 冻 保 存； ０ ℃ ～４ ℃ 保存 。 在抽样及制样的操作过程中 ， 应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化 。 ７ 测定步骤 ７． １ 提取 鸡肝 、 鸡肾 、 鱼肉样品 ７． １． １ 猪肉 、 （ ） ） 称取 ５ｇ 样品 精确至 ０． 于５ 加入 ５ｇ 硫酸钠 （ 与样品充分混匀 ， 再 ０ １ｇ ０ｍ Ｌ 具塞离心管中 ， ４． ３ ／ ， ） ， 将上层提取液移入 于 ４０ 加入 ２ 高速均质提取 ３ｍ ０ ０ｒ ｍ ｉ ｎ 条件下离心 ３ｍ ｉ ｎ ０ｍ Ｌ 三氯甲烷 （ ｉ ｎ， ４． ２ 残渣用 ２×２ 合并提取液 。 将所得提取液于 ４ ２ ５ ０ｍ Ｌ 浓缩瓶中 ， ０ｍ Ｌ 三氯甲烷重复提取两次 ， ０ ℃ 水浴 ） 减压浓缩至近干 ， 残渣加入 ５ｍ 水溶液 （ 溶解 。 Ｌ 甲醇 ４． ４ 牛奶样品 ７． １． ２ 蜂蜜 、 ） ， 于５ 加入１ 超声波提取１ 加入 精确至 ０． 称取 ５ｇ 样品 （ ０ｍ Ｌ 具 塞 离 心 管 中， ０ｍ Ｌ 水， ０ｍ ｉ ｎ ０ １ｇ ／ 将下层提取液移入浓缩瓶中 。 再加 于 ４０ 振荡提取 ５ｍ ０ ０ｒ ｍ ｉ ｎ 条件下离心 ３ｍ ｉ ｎ， ２ ０ｍ Ｌ三氯甲烷 ， ｉ ｎ， 入２ 重复上述操作两次 ， 合并 提 取 液 。 将 所 得 提 取 液 于 ４ 残 ０ｍ Ｌ 三氯甲烷 ， ０ ℃ 水 浴 减 压 浓 缩 至 近 干， 渣加入 ５ｍ 水溶液溶解 。 Ｌ 甲醇 ７． ２ 净化 ， 分别用 ５ｍ 水预 处 理 ＨＬ 保 持 柱 体 湿 润， 将上述提取液 Ｌ 甲醇 ， ５ｍ Ｌ 甲醇 Ｂ 固相萃取小柱（ ４． ９） ／ 转移至上述柱中 ， 弃去流出液 ， 用１ 以小于 １ｍ ０ｍ Ｌ 甲醇洗脱 ， Ｌ ｍ ｉ ｎ 速度收集全部洗脱液于 ５ ０ｍ Ｌ浓 经０． 供液相 缩 瓶中 ， 于４ ２μ ｍ 滤膜过滤后 ， ０ ℃ 水浴中旋转浓缩至近干 。 用甲醇溶解并定容至１． ０ｍ Ｌ， 色谱 质谱／质谱定量测定和确证 。
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进出口动物源性食品中 痢菌净残留量的检测方法 ／ 液相色谱 质谱 质谱法
犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犿 犲 狌 犻 狀 犱 狅 狓狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊狅 犳犪 狀 犻 犿 犪 犾 狅 狉 犻 犻 狀 狇 犵 —犎 ／ 犳 狅 狉 犻 犿 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狅 狉 狋 犘 犔 犆 犕 犛 犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱 狆 狆
相对离子丰度／％ 允许的最大偏差／％ ０ ＞５ ±２ ０ ０～５ ０ ＞２ ±２ ５ ０～２ ０ ＞１ ±３ ０ ０ ≤１ ±５ ０
７． ４ 空白试验 除不加试样外 ， 按上述相同条件和步骤进行 。 ８ 结果计算和表述 ） 用色谱数据处理机或按式 （ 计算试样中痢菌净残留含量 ， 计算结果需扣除空白值 。 １
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／ 犛 犖 犜２ １ ５ ７—２ ０ ０ ８ ７． ３ 测定 ７． ３． １ 液相色谱条件 ） 或相当者 ； Ｚ Ｏ Ｒ Ｂ ＡＸＳ Ｂ Ｃ ａ １ ５ ０ｍｍ×２． １ｍｍ， ３． ５μ ｍ， 色谱柱 ： １ ８， ） ） ； 甲醇 水（ ｂ ７ ０＋３ ０ 流动相 ： ） ／ ｃ ０． ２ｍ Ｌ ｍ ｉ ｎ； 流速 ： ） ｄ ２ ０ ℃； 柱温 ： ） ｅ １ ０μ Ｌ。 进样量 ： ７． ３． ２ 质谱条件 ） 电喷雾离子源 ； ａ 离子源 ： ） 正离子扫描 ； ｂ 扫描方式 ： ） ； 多反应监测 （ ｃ ＭＲＭ） 检测方式 ： ） ） ： ｄ Ｉ Ｓ ５５ ０ ０Ｖ； 电喷雾电压 （ ） ） ： ； ｅ Ｇ Ｓ １ ３ ０Ｐ ａ 雾化气压力 （ ） ： ； ｆ Ｃ ＵＲ） ２ ５Ｐ ａ 气帘气压力 （ ） ） ： ； Ｇ Ｓ ２ ２ ０Ｐ ａ 辅助气压力 （ ｇ ） ： ｈ Ｔ ＥＭ） ５ ５ ０ ℃； 离子源温度 （ ） 、 定量离子对 、 去簇电压 （ 碰撞气能量 （ 及碰撞室出口电压 （ 见表 １。 ｉ Ｄ Ｐ） Ｃ Ｅ） Ｃ Ｘ Ｐ） 定性离子对 、 表 １ 痢菌净定性离子对 、 定量离子对 、 去簇电压 、 碰撞气能量和碰撞室出口电压
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进出口动物源性食品中 痢wenku.baidu.com净残留量的检测方法 液相色谱 质谱／ 质谱法
１ 范围 本标准规定了进出口动物源性食品中痢菌净残留量的测定 液相色谱 质谱／质谱法 。 本标准适用于猪肉 、 鸡肝 、 鸡肾 、 鱼肉 、 牛奶 、 蜂蜜中痢菌净的测定和确证 。 ２ 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其随后所有 的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本标准 ， 然而 ， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本标准 。 ／ ／ Ｇ Ｂ Ｔ６ ６ ８ ２—２ ０ ０ ８， Ｉ Ｓ Ｏ３ ６ ９ ６： １ ９ ８ ７， ＭＯ Ｄ） Ｇ Ｂ Ｔ６ ６ ８ ２ 分析实验室用水规格和实验方法 （ ３ 方法提要 试样中残留的痢菌净用三氯甲烷均质或超声波提取 ， 提取液经浓缩 ， 用液 ＨＬ Ｂ 固相萃取小柱净化 ， 相色谱 质谱／质谱法测定和确证 ， 外标法定量 。 ４ 试剂与材料 ／ 除另有规定外 ， 所用试剂均为分析纯 ， 水为 Ｇ Ｂ Ｔ６ ６ ８ ２ 规定的一级水 。 色谱纯 。 ４． １ 甲醇 ： 色谱纯 。 ４． ２ 三氯甲烷 ： 经６ 贮于密封容器中备用 。 ５ ０ ℃ 灼烧 ４ｈ， ４． ３ 无水硫酸钠 ： 。 水（ 体积比 ） ４． ４ 甲醇 １＋１， ， ： 分子式 ： 纯度大于等于 ９ Ｍ ｅ ｕ ｉ ｎ ｄ ｏ ｘ Ｃ ４． ５ 痢菌净标准物质 （ ７％ 。 ｑ １ １Ｈ １ ０Ｎ ２Ｏ ３） ） ， ／ 准确称取适量的标准物质 （ 用甲醇 （ 配制成浓度为 １０ ０ ０μ ４． ６ 标准储备液的配制 ： ４． ５ ４． １） ｍ Ｌ的 ｇ 标准储备液 ， 避光 －１ ８ ℃ 保存 。 ） ， 准确移取一定体积的标准储备液 （ 用甲醇 （ 稀释成适当浓度的 ４． ７ 标准中间工作液的配制 ： ４． ６ ４． １） 标准中间工作液 ， 避光 －１ ８ ℃ 保存 。 ） ， 准确移取一定体积的标准中间工作液 （ 可根据需要用空白样品提取 ４． ８ 基质标准工作液的配制 ： ４． ７ 液稀释成适当浓度的标准工作液 ， 当天配制 。 ， 或相当者 。 ４． ９ 固相萃取小柱 ： Ｗ ａ ｔ ｅ ｒ ｓｏ ａ ｓ ｉ ｓＨＬ Ｂ 固相萃取小柱 ， ５ ０ ０ｍ ６ｍ Ｌ， ｇ 有机系 ， ４． １ ０ 微孔滤膜 ： ０． ２ ０μ ｍ。 ５ 仪器和设备 ） 。 配有电喷雾离子源 （ ５． １ 液相色谱串联四极杆质谱仪 ： Ｅ Ｓ Ｉ ５． ２ 固相萃取装置 。 ５． ３ 组织捣碎机 。 ５． ４ 均质器 。
痢菌净
７． ３． ３ 定量测定 根据样液中被测痢菌净药物含量 ， 选定浓度相近的基质标准 工 作 液 。 基 质 标 准 工 作 液 和 待 测 样 液 中痢菌净药物的响应值均应在仪器检测的线性范围内 。 对标准溶液与样液等体积分组分时段参插进样 ， 标 测定 。 外标法定量 。 在上述液相色谱 质谱／质谱条件下 ， 痢菌 净 标 准 物 质 的 保 留 时 间 约 为 ２． ３ｍ ｉ ｎ 准溶液的选择性离子流图参见附录 Ａ 中图 Ａ． １。 ７． ３． ４ 定性测定 对基质标准工作液及样液按上述规定的条件进行测定时 ， 如果样 液 与 基 质 标 准 工 作 液 的 选 择 离 子 图中 ， 在相同保留时间有峰出现 ， 所有选择离子均应出现 。 则根据定性选择离子对的种类及其相对丰度 比对其进行阳性确证 。 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差见表 ２。 表 ２ 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
名称 定性离子对 ／ ｍ ｚ ／ ２ １ ９． ２ １ ４ ３． ２ ／ ２ １ ９． ２ １ ５ ９． ９ ／ ２ １ ９． ２ １ ８ ５． ０ 定量离子对 ／ ｍ ｚ 去簇电压 （ ／ Ｄ Ｐ） Ｖ 碰撞气能量 （ ／ Ｃ Ｅ） Ｖ ２ ９ ／ ２ １ ９． ２ １ ４ ３． ２ ７ ０ ２ ０ ２ ６ １ ０ 碰撞室出口电压 （ ／ Ｖ Ｃ Ｘ Ｐ）
２ ０ ０ ８ ０ ９ ０ ４ 发布
２ ０ ０ ９ ０ ３ １ ６ 实施
中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局
发 布
／ 犛 犖 犜２ １ ５ ７—２ ０ ０ ８
前 言
本标准的附录 Ａ 为资料性附录 。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 。 本标准起草单位 ： 中 华 人 民 共 和 国 吉 林 出 入 境 检 验 检 疫 局、 中华人民共和国重庆出入境检验检 疫局 。 本标准主要起草人 ： 张代辉 、 牟峻 、 荣会 、 王国民 、 韩大川 、 王明泰 。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准 。
犡＝
犃 ×犮×犞 犃ｓ × 犿
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／ 犛 犖 犜２ １ ５ ７—２ ０ ０ ８ 式中 ： — — 试样中痢菌净残留量 ， ／ ） ； 单位为毫克每千克 （ 犡— ｍ ｋ ｇ ｇ — — 样液中痢菌净的峰面积 ； 犃— — — 基质标准工作液中痢菌净的浓度 ， ／ ； 单位为微克每毫升 （ 犮— ｍ Ｌ） ｇ μ — — 样液最终定容体积 ， ； 单位为毫升 （ ｍ Ｌ） 犞— — — 基质标准工作液中痢菌净的峰面积 ； 犃ｓ— — — 最终样液代表的试样质量 ， ） 。 单位为克 （ 犿— ｇ ９ 测定低限和回收率 ９． １ 测定低限 （ 犔 犗 犙） ／ 。 本方法的测定低限为 ０． ０ １ ０ｍ ｋ ｇ ｇ ９． ２ 回收率 ／ ／ 回收率的实验数据见表 ３。 在 ０． ｋ ｋ ０ ４ ０ｍ ０ １ ０ｍ ～０． ｇ ｇ ｇ 添加浓度范围内 ， ｇ 表 ３ 不同添加浓度回收率数据