第九章细胞系(株)的建立
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第九章 细胞系(株)的 建立与鉴定
一、基本百度文库念
细胞系 细胞株
二、建立细胞系(株)的档案
建立细胞系或细胞株应对如下几方面加以说明:
1.培养细胞的来源 对拟建立的细胞系(株)应交代细胞供体所属物 种及供体的年龄、性别、取材的器官或组织。如是肿 瘤组织、应说明临床诊断结果、组织来源和病例号等。
2.细胞生物学特征
大影响。
美 国 典 型 培 养 物 保 藏 中 心 ( Amercian
Type Culture Collection,ATCC ) 是 现 今 最
大的细胞库。
ATCC网址:http://www.atcc.org/
ATCC接纳细胞必须检测的项目如下:
1.培养简历
2.培养液 3.冻存液 4.细胞活力 5.细胞形态类型
6.核型
7.无污染检验
8.物种检测
9.免疫检测 同时提供细胞系(株)建立者和检测者的 姓名。
中国国家专利局委托武汉大学建立的中 国典型培养物保藏中心( China Center Type Culture Collection,CCTCC ) 保 藏 了 十 几 个
国家的专利培养物 1000 多株,非专利培养物
检定细胞系的纯度包括鉴定除主类细胞 外还含有哪类细胞及其所占比例多少。
2.细胞系的稳定性
细胞连续培养过程中主要指标有无明显变 异。使用稳定的细胞系能保证实验结果的准 确性、重复性。
3.细胞学特征
观察细胞系的形态和表达特征的数据及
其与来源细胞的差异。
4.微生物污染检查
有无病毒、细菌、真菌、支原体等污染。
对所培养细胞的生物学性状予以说明。
3.培养条件和方法
说明所使用的培养基血清,使用浓度、 并说明细胞生存的适宜温度、 CO2 浓度、 PH 值
等条件。有些细胞生长还需添加的一定附加
成分。
三、细胞系的鉴定
拟建立的细胞系或细胞株、除说明培养细 胞的来源外,还要对其进行一系列的鉴定。
1.检定细胞系的纯度
5.染色体稳定性
包括检查染色体数、染色体分组、染色
体分带以及有无标记染色体等内容。
6.有无细胞系(株)交叉污染
包括用同工酶谱和抗原抗体反应等鉴定
细胞系(株)的细胞特异性。
四、细胞系(株)的保藏
生物学家普遍认为,一个国家或地区拥有培
养物的种类、数量和质量及对培养物的研究、
开发和利用,将对科学和经济的发展产生重
3000 多株,其中包括各类微生物菌种、动、
植物细胞系、病毒、单细胞藻类和质粒等。
• CCTCC E-mail:yingtlu@whu.edu.cn hyyang@whu.edu.cn
中科院细胞库是中科院典型培养物保藏
委员会成员库之一。
网址:http://www.cell.ac.cn/cellbank/
一、基本百度文库念
细胞系 细胞株
二、建立细胞系(株)的档案
建立细胞系或细胞株应对如下几方面加以说明:
1.培养细胞的来源 对拟建立的细胞系(株)应交代细胞供体所属物 种及供体的年龄、性别、取材的器官或组织。如是肿 瘤组织、应说明临床诊断结果、组织来源和病例号等。
2.细胞生物学特征
大影响。
美 国 典 型 培 养 物 保 藏 中 心 ( Amercian
Type Culture Collection,ATCC ) 是 现 今 最
大的细胞库。
ATCC网址:http://www.atcc.org/
ATCC接纳细胞必须检测的项目如下:
1.培养简历
2.培养液 3.冻存液 4.细胞活力 5.细胞形态类型
6.核型
7.无污染检验
8.物种检测
9.免疫检测 同时提供细胞系(株)建立者和检测者的 姓名。
中国国家专利局委托武汉大学建立的中 国典型培养物保藏中心( China Center Type Culture Collection,CCTCC ) 保 藏 了 十 几 个
国家的专利培养物 1000 多株,非专利培养物
检定细胞系的纯度包括鉴定除主类细胞 外还含有哪类细胞及其所占比例多少。
2.细胞系的稳定性
细胞连续培养过程中主要指标有无明显变 异。使用稳定的细胞系能保证实验结果的准 确性、重复性。
3.细胞学特征
观察细胞系的形态和表达特征的数据及
其与来源细胞的差异。
4.微生物污染检查
有无病毒、细菌、真菌、支原体等污染。
对所培养细胞的生物学性状予以说明。
3.培养条件和方法
说明所使用的培养基血清,使用浓度、 并说明细胞生存的适宜温度、 CO2 浓度、 PH 值
等条件。有些细胞生长还需添加的一定附加
成分。
三、细胞系的鉴定
拟建立的细胞系或细胞株、除说明培养细 胞的来源外,还要对其进行一系列的鉴定。
1.检定细胞系的纯度
5.染色体稳定性
包括检查染色体数、染色体分组、染色
体分带以及有无标记染色体等内容。
6.有无细胞系(株)交叉污染
包括用同工酶谱和抗原抗体反应等鉴定
细胞系(株)的细胞特异性。
四、细胞系(株)的保藏
生物学家普遍认为,一个国家或地区拥有培
养物的种类、数量和质量及对培养物的研究、
开发和利用,将对科学和经济的发展产生重
3000 多株,其中包括各类微生物菌种、动、
植物细胞系、病毒、单细胞藻类和质粒等。
• CCTCC E-mail:yingtlu@whu.edu.cn hyyang@whu.edu.cn
中科院细胞库是中科院典型培养物保藏
委员会成员库之一。
网址:http://www.cell.ac.cn/cellbank/