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对激活后的SCNT胚胎进行显微注射
统计一段时间后的胚胎发 育率,对SCNT胚胎细胞数 和囊胚凋亡率进行统计分 析,定量PCR分析三组胚胎 发育相关和凋亡相关基因 的相对表达水平,与 control-NT, NONtargeting-NT及IVF胚胎比 较。
分析对早期 胚胎不同时 期总体甲基 化水平的影 响
1 研究背景 2 研究目标 3 研究内容 4 技术路线 5 资源及需求
1 研究背景
• 体细胞核移植技术依然存在着很多问题。研究普遍认为体细胞核在卵 母细胞质中不完全的表观遗传重编程是引起这些问题的一个重要原因。 组蛋白甲基化是一种发生在组蛋白精氨酸和赖氨酸残基上的共价修饰, 由组蛋白甲基转移酶(HMT)催化。其中对赖氨酸甲基化修饰的研究 较为广泛,而关于精氨酸甲基化结合蛋白的研究却较少。本研究目的 通过对蛋白精氨酸甲基转移酶(CARM1)在牛卵母细胞重编程及核移 植早期胚胎发育中作用的研究,揭示组蛋白精氨酸甲基化修饰在表观 遗传调控中的作用机制。
实验成功条件
资金支持 专家指导
实验能力
仪器场所 知识储备
团队协作
源自文库 谢谢!
队员能力
• 本团队队员大学期间均无任何挂科经历 • 半数以上成员通过英语六级 • 项目主持人曾主持过本实验室的自主实验
项目 • 大二成员均具有保研资格,其中两人计划
在本实验室直博 • 小组成员均拥有较好的实验技术和文献搜
集能力,具备合格知识基础
预算需求
• 8200元实验经费,超出限额部分由实验室 基金补充。
2 研究目标 • (1)研究CARM1通过干扰抑制表达,对核移植早
期胚胎发育以及胚胎质量的影响。 • (2)研究CARM1干扰对早期胚胎不同时期总体甲
基化水平及H3R17,H3R26位点甲基化的影响。 • (3)通过以上研究分析,揭示组蛋白精氨酸甲基
化修饰在表观遗传调控中的作用机制。
3 研究内容
对H3R17, H3R26位点进 行甲基化染色, 研究其对特定 位点甲基化修 饰的影响
统计结果,数据分析
科创平台
• 本项目将在西北农林科技大学农业部动物 生物技术重点开放实验室完成。本实验室 承担多项国家重大科研项目,具有进行胚 胎体外操作、细胞体外培养、基因表达检 测以及载体构建的实验平台,完成本项目 的一切实验设备条件具备。实验室也可以 为本项目提供一定资金支持与技术指导。
• (1)设计合成SiRNA-CARM1片段,优化干扰条件 。
• (2)研究CARM1基因干扰对早期胚胎发育的影。 • (3)研究CARM1基因干扰对胚胎甲基化水平影响
及对H3R17,H3R26位点甲基化的影响。
4 技术路线
合成SiRNA-CARM1
显微注射牛胎儿成纤维细胞检测 干扰效率,寻找合适的注射剂量
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