食物中甲醛含量的测定

食物中甲醛含量的测定
摘要：目前，食品安全问题成为了社会发展中的重要课题，尤其是食品中的甲醛含量，更是成为了人们关注的焦点，本文结合各位学者的研究成果，探讨了食物中甲醛的几种检测方法，旨在为有关工作提供参考。

关键词：食品甲醛
一、分光光度法
分光光度法具有仪器操作简单方便、相对误差小、灵敏度高、且选择性好等优点，甲醛测定中应用最多的一种方法就是分光光度法。

分光光度法包括蛋白胨法、三元络合间接法、酚试剂比色法、盐酸苯肼法、AMHT法及乙酰丙酮法等，以上六种方法的优缺点如表1-1所示：
表1-1分光光度法测定甲醛含量优缺点对比
方法名称优点缺点
蛋白胨法检出限低，仅为0.02mg/L 反应所需温度相对较高，为100℃
三元络合间接法反应温度低，为40℃高浓度的乙醛和苯酚、硫脲、三乙醇胺对实验有干扰，受本底干扰的影响较大
酚试剂比色法反应可在室温条件下进行酚试剂有一定的毒性
盐酸苯肼法反应可在室温条件下进行显色的温定性相对较差
AMHT法对甲醛的选择性非常好，且受干扰较小检出限较高，灵敏度相对较差
乙酰丙酮法被广泛用于水发产品及米、面制品中甲醛的测定灵敏度较低，且受本底中醛类的影响较大，当乙醛、丙醛、丁醛浓度大5mg/L时，就会对检测结果产生干扰。

二、荧光法
荧光光度法是在室温条件下，甲醛与柠檬酸铵、乙酰丙酮，在pH为5.5～6.5时发生的反应。

采用荧光光度法测定甲醛时，激发波长为465nm，发射波长为508nm。

此方法抗干扰能力强，大量甲醇、乙醇、苯酚、丙酮等对其测定没有影响[1]。

1.仪器与试剂
F97Pro荧光光度计，Proxima流动注射分析，PHS-3C型精密酸度计。

甲醛储备液；100.0 mmol/L的亚硫酸钠溶液；10.0mmol/L的邻苯二甲醛；
1.00mol/L醋酸铵溶液；pH6.6的缓冲溶液
2.方法步骤
2.1静态荧光法
移取pH为6.6的磷酸二氢钠-氢氧化钠缓冲溶液1.50 mL，适量的甲醛标准溶液及0.80mL亚硫酸钠溶液于10mL容量瓶中，放置15 min后，加入0.15mL 的OPA溶液及0.80mL醋酸铵溶液，用水定容。

10 min后在激发波长为320nm，发射波长为390nm进行荧光测定，激发光狭缝为1.5nm，发射光狭缝为10nm[2]。

在最佳条件下，此法测定甲醛的线性范围为0.10-1.60μg/mL，检测限为0.046μg/mL。

2.2流动注射荧光法
实验过程中使用的载液为醋酸铵，移取1.50mL缓冲溶液，适量甲醛标准溶液，0.80mL Na2SO3溶液于10mL容量瓶中，放置15min后，加入0.15mL OPA 溶液，用水定容至刻度。

3.样品的测定
样品经过前处理后，取一定上清液，按上述实验方法分别以静态荧光法和流动注射荧光法对样品中微量甲醛进行测定，其测定的误差分别为0.83%和1.25%.荧光法与流动注射技术结合，建立了流动注射抑制荧光法对甲醛的测定，其测定的线性范围更宽、分析速度更快。

三、液相色谱法
采用HPLC-DAD检测方法测定食品中微量甲醛，方法灵敏、准确、抗干扰能力强。

具体如下：
1.样品提取及衍生
准确称取20.0g样品于100mL烧杯中，加水80mL，用分散机于5000r/min 转速均质成匀浆后，转移到100mL容量瓶，定容，混匀；液体样品：直接移取。

移取10.0mL样液于蒸馏瓶中，加10%（V/V）磷酸2.5mL，蒸馏。

准确收集馏出液至30mL，同时做空白蒸馏。

衍生步骤如下：移取5.00mL提取液于10mL 比色管中，加入5.00mL 0.12%DNPH乙腈溶液，塞紧塞子，于50℃水浴中加热60min，取出后用流水快速冷却至室温。

衍生液经0.45μm滤膜过滤后待测。

2.测定色谱条件
ZORBAX Extend C18（250 mm×4.6mm，5μm）色谱柱；检测波长350nm，参比波长500nm；流动相：乙腈+水（50 + 50）；柱温：30℃；流速：1mL/min；进样量：10μL。

3.结论
实验结果表明，本方法灵敏度高，检出限低，能定量检出食品中低限仅0.1mg/kg的甲醛。

四、气相色谱法
气相色谱法有直接顶空进样及衍生气相色谱法，下面主要介绍一下衍生气相色谱法。

实验操作：取样品馏出液1.0ml，加入0.1ml的2，4-二硝基苯肼（1mg/ml），60℃的水浴锅中加热反应15mi，冷却后加入1ml的环己烷，萃取5min后吸取环己烷层，取1μL待测。

五、结论
综上所述，分光光度法显色时间长、显色反应不稳定，化学发光法选择性较差，色谱法仪器昂贵、操作较繁琐。

荧光光度法操作简便，灵敏度高，选择性好，目前用于测定甲醛的荧光法主要是乙酰丙酮衍生法，该法荧光产物生成较慢，反应需加热，不适合快速测定。

参考文献：
[1]闫树刚.甲醛的快速检测方法之研究[J].中国农学通报，2012，19（3）：122-125
[2]陈众势.离子电极法测定HCHO含量的新方法.金刚石与磨料磨具工程，2009.。