枸杞黄酮的提取工艺研究

２．５ 结果与讨论
１．２．１ 研究目的及意义
２．５．１ 单因素实验
本课题以宁夏枸杞为研究对象，通过对枸杞总黄酮的测定方法、提取工艺、
１ 乙醇浓度对黄酮得率的影响
主要黄酮的纯化和抗氧化 性 能 进 行 研 究，使 枸 杞 有 望 成 为 黄 酮 新 的 来 源，为 开
根据枸杞黄酮的性质和操作的经济性，本实验采用乙醇作为枸杞黄酮的提
枸杞黄酮的提取工艺研究
吴 啸
【中图分类号】Ｒ２８４．１ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１６７２－３７８３（２０１２）０７－０３７６－０１
【摘要】枸杞隶属于茄科（Ｓｏｌａｎａｃｅａｅ）枸杞族枸杞属 （ＬｙｃｉｅａｅＬ．）植物的果实，是一种驰名中外的名贵中药材。随着枸杞药理研究的深入，新的药理作用不断 被发现。现代医学表明：枸杞具有免疫调节、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗疲劳、降血压、降血糖、补肾、保肝、名目、抗辐射等功效。研究结果如下：采用乙醇回流浸提 法提取枸杞中黄酮类化合物，研究了不同乙醇浓度、提取温度、固液比、提取时间、提取次数对黄酮类化合物的提取效果影响。实验结果表明：最佳的提取工艺条 件为 Ａ１Ｂ３Ｃ３Ｄ３，即：乙醇浓度为 ６０％、固液比为 ２０：１、温度为 ７０℃、提取时间为三小时，在此条件下，黄酮的提取率为 １．０５８％ ．
在单因素试验的基础上，选出影响提取的四个主要冈素，乙醇浓度、提取时
Ｐ成分。此外，还从其中分得玉蜀黍黄素及玉蜀黍黄素二棕榈酸环肽及枸杞素 间、固液比、提取温度，每个因素三个水平安排正交试验，对溶剂回流法提取枸
Ａ～Ｄ、脑甙脂类等。
杞黄酮的工艺进行以硝酸铝显色法测定总黄酮含量。
１．２． 本课题研究目的意义及主要内容
液透析室护士在工作中常会遇到各种问题，如护患矛盾、理论知识贫乏、业务知
２．２．２ 防止锐器损伤，在给病人进行穿刺、输血、留取标本、拔针时动作要
识不熟练、护士职业暴露危险、常超时超量工作等等，本文对血液透析护理操作 敏捷、娴熟、手法得当，在各种操作中要谨慎，以防针头刺伤皮肤。一旦皮肤不
中护士存在的问题进行分析并提出相应得对策，对护士实施有效的护理风险管 慎被刺伤或被患者的血液、体液污染时，要保持镇静，立即采取有效措施，避免
【关键词】：枸杞黄酮、回流提取
１．１ 枸杞概述
照上述条件再提取一次，合并上清液，减压蒸馏，最终定容于 １００ｍｌ容量瓶内 。
１．１．１ 枸杞属植物的介绍
按照 ２．３方法测定黄酮含量。（３）固液比对提取的影响
枸杞子是一味传统常用中药长 ６- １５ｍｍ，直径 ５- ８ｍｍ，表面鲜红或暗红
精确称取 １．０ｇ枸杞粉末六份分别按固液比 ５：１、１０：１、１５：１、２０：１、２５：１、３０：
理 ，让护士要有效地回避护理风险，防范和减少护理纠纷。
或减轻可能造成的不良后果。从近心端向远心端反复挤压受伤部位，使部分血
１． 血液透析护理操作过程中护士的风险
液流出，并用自来水冲洗，而后用 ７５％酒精消毒，上报有关部门，如果患者有乙
１．１ 感染血源性疾病的危险
肝、丙肝或艾滋病，护士要跟 踪 检 查 和 预 防 性 用 药。 如 果 血 液 或 体 液 不 慎 溅 入
的职业性健康问题［３］。据报道，针刺伤约占锐器损伤的 ６６．６％。因护士使用针 或者塑料围裙，戴手套、护目镜。床单、被套一人一用一换，传染病人与普通病
毛嘉艳
【中图分类号】Ｒ５５２ 【文献标识码】Ｃ 【文章编号】１６７２－３７８３（２０１２）０７－０２３７－０１
【关键词】：血液净化 护士 风险管理
风险管理（ＲｉｓｋＭａｎａｇｅｍｅｎｔ，ＲＭ）是一个管理程序，是对现有和潜在的医疗 培训和继续教育，经常参加学术交流，开展持续性质量改进活动，不断增强护理
６
６０
３
６０
１５
０．７９
式中：Ｍ为原料的质量，ｇ。 ２．４ 溶剂回流提取法 （一） 单因素实验 （１）乙醇浓度对提取的影响
７
７０
１
８０
１５
８
７０
２
６０
２０
９
７０
３
７０
１０
０．７４ ０．９０ ０．８３
精确称取 １．０ｇ枸杞粉末六份分别加入到 ２０ｍｌ乙醇中，体积分数分别为 ４０
Ｋ１
０．６３
０．６８
０．７６
表二
２．３ 黄酮含量的测定方法
因素
温度
时间 乙醇浓度 固液比 总黄酮得率
用移液管精确移取样液 １．０ｍｌ于 １０ｍｌ容量瓶中，６０％乙醇至 ５ｍｌ于 １０ｍｌ
１
５０
１
６０
１０
容量瓶中，加 ５％硝酸钠 ０．３ｍｌ，摇匀，放置 ６ｍｉｎ，加 １０％硝酸铝 ０．３ｍｌ，摇匀，放
２
５０
２
７０
１５
置 ６ｍｉｎ，加 ５％氢氧化钠 ４ｍｌ，加蒸馏水至刻度，摇匀，放置 １５ｍｉｎ，于 ５１０ｎｍ波长
光，稍耐阴，喜干燥凉爽天气，较耐寒，适应性强，耐干旱、耐碱性土壤，喜疏松排 于 １００ｍｌ容量瓶内 。按照 ２．３方法测定黄酮含量。
水良好的沙质土壤。
（４）时间对提取的影响
１．１．２ 枸杞的功效、药理药效作用
精确称取 １．０ｇ枸杞粉末 ４份，各加入 ２０ｍｌ６０％的乙醇中，分别于 ７０℃恒温
枸杞是历史悠久、药食同源、驰名中外的名贵中药材。中医学认为，枸杞性 水浴中加热，提取 １ｈ、２ｈ、３ｈ、４ｈ，抽滤，在 ４８００ｒ/ ｍｉｎ的转速下离心 １５分钟，照
风险的识别、评价和处理，以减少医疗风险事件的发生及风险事件对患者和医 人员的法律意识，增强防范护理风险的意识，提高护士防范和化解护理风险的
院的危害及经济损失［１］。护理风险始终贯穿在操作、处置、配合抢救等各环节 意识和能力。
和过程中，有时即使是极为简单或看似微不足道的临床活动都带有风险。在医
２．２ 加强自我防护知识的宣教，做好个人防护
针刺伤是护士最常见的职业事故，其危害不仅限于刺伤本身，且刺伤后存 眼睛，须立即用大量清水冲洗。
在发生经血液 －体液传播疾病的危险性。在血液净化中心，护士常常要为患者
２．２．３ 严格消毒隔离制度 每次操作应严格执行手消毒规范，按 ６步洗
进行穿刺、注射、输血等操作，因此，针刺伤成为血液净化中心护士的一个严重 手法认真洗手，工作中执行标准预防，在进行接触血液等操作时必须穿隔离衣
９５％）适合提取苷元，６０％左右的醇适合提取苷类。随着乙醇浓度的增加，提取 量亦随之增加，当乙醇浓度达到 ６０％时，黄酮类化合物提取量最高考虑到经济 性，因此选用 ６０％为提取液浓度。
２． 温度对黄酮得率的影响 随着提取温度的升高，枸杞黄酮的提取量亦随之增加，当温度升到 ７０℃时， 提取量最高；而当温度 再 升 高 时，提 取 量 变 化 不 大。 因 此，随 着 提 取 温 度 的 升 高，黄酮提取量增加。考虑到经济的合理性，实验采用温度在 ７０℃进行。 固液比对提取量的影响 随着液同比的增人，提 取 量 逐 渐 增 大，当 液 固 比 一 定 程 度 时，再 增 大 同 液 比，提取量趋于稳定，即 ～定比例的溶剂已将有效成分基本溶出。因此，选取最 适液同比为 ２０：ｌ。 ４． 时间对提取量的影响 随着提取次数的增加，枸杞 黄 酮 的 提 取 量 有 所 增 加，但 增 加 的 幅 度 警 减 缓 的趋势，当提取次数达 ３次时已基本上将枸杞黄酮提取完全，考虑到在工业化条 件下，增加提取次数不但增加溶剂消耗，而且造成能源浪费，并且给后续浓缩带 来困难，因此一般取次数 ３次即可 ２．５．２ 正交实验 在以上单因素试验的基础上，对影响枸杞黄酮提取量的因素：乙醇浓度、温 度、时间、固液比进行四因素 三 水 平 正 交 试 验，同 时 对 试 验 结 果 进 行 极 差 分 析， 结果如表二所示。
发利用我国的枸杞黄酮资源提供科学依据。
取液。另外乙醇可以回收，重复使用，降低了操作费用。高浓度的பைடு நூலகம்（９０％ －－
１．２．２ 研究的主要内容 采用溶剂回流提取法通过乙 醇 浓 度，温 度，固 液 比，时 间，提 取 次 数 对 黄 酮 提取的影响，通过正交试验优化枸杞黄酮提取工艺。 ２．１ 枸杞黄酮提取工艺研究 常用的提取溶剂为 甲 醇、含 水 乙 醇 和 丙 酮 等，由 于 乙 醇 毒 性 低，易 回 收 利 用，所以在大量提取时，一般 采 用 一 定 浓 度 的 工 业 乙 醇 进 行 提 取。 本 实 验 采 用 溶剂回流提取枸杞黄酮，通过正交实验得出枸杞黄酮提取的最佳提取工艺 ２．２． 实验材料与方法 ２．２．１． 实验材料 ２．２．１ 材料与试剂 原料：宁夏枸杞 试剂：芦丁标准品；无 水 乙 醇；、ＮａＮ０２、Ａ１（Ｎ０３）３、ＮａＯＨ、石 油 醚 均 为 分 析 纯各一瓶；９５％乙醇 ３瓶，实验用水均为二重蒸馏水； ２．２．２ 仪器与设备 ＨＺＳ．Ｈ型超级水浴恒温振荡器 哈尔滨市东联电子技术开发有限 公司 ⅦＧ．５０ｘ５５型远红外快速恒温干燥箱 上海跃进医疗器械厂 ＡＬ２０４电子天平 梅特勒．托利多仪器（上海）有限公司 ＴＤ５－Ａ型离心沉淀 上海安亭科学仪器厂 ＲＥ．５２ＡＡ型旋转蒸发 上海亚荣生化仪器厂 ＳＰ．７５２型紫外可见分光光度 上海光谱仪器有限公司 ＳＨＺ－ＩＩＩ循环水真空泵 郑州长城科工贸有限公司
压、补肾、保肝、明目、养颜、健脑、排毒、保护生殖系统、抗辐射损伤十六项功能。 分钟，合并上清液，减压蒸馏，最终定容于 １００ｍｌ的容量瓶。按照 ２．３方法测定
１．１．３ 枸杞中有效成分的研究
黄酮含量。
宁夏枸杞的化学成分主要为黄酮、多糖（ＬＢＰ）、甜菜碱、类胡萝卜素及类胡
（二） 正交试验优化提取工艺
萝卜素酯、维生素 Ｃ、、莨菪亭、多种氨基酸及微量元素 Ｋ、Ｎａ、Ｃａ、Ｍｇ、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｍｎ、
疗、治疗和护理活动中都会有风险；人为或系统因素也会增加风险；病人的行为
２．２．１ 为防接触到血液、操作时应带手套。据研究表明，如果一个被血液
也是构成医疗风险的主要因素［２］。血液透析护理工作是高风险、高科技、劳动 污染的钢针刺破一层乳胶手套或聚乙烯手套，医务人员接触的血量比未带手套
强度大的科室，对护理人员要求较临床高，而患者对医护人员的要求也高。血 时可减少 ５０％以上［４］。
Ｒ
０．１９
精确称取 １．０ｇ枸杞粉末六份分别加入到 ２０ｍｌ６０%乙醇中，于 ２０、３０、４０、 （下转第 ２３７页）
０．７６ ０．０８
０．７０ ０．０６
０．７０ ０．０６
５０、６０、７０、８０℃恒温水浴加热 ２ｈ，抽滤，在 ４８００ｒ/ ｍｉｎ的转速下离心 １５分钟，
— ３７６—
万方数据
血液透析护理操作过程中护士的风险管理
０．７２
%、５０%、６０%、７０%、８０%、９０%，于 ５０℃恒温水域加热 ２ｈ，，抽滤，在 ４８００ｒ/
Ｋ２
０．７３
０．７４
０．７３
０．７６
ｍｉｎ的转速下离心 １５分钟，照上述条件再提取一次，合并上清液，减压蒸馏，最
Ｋ３
０．８２
终定容于 １００ｍｌ容量瓶内 。按照 ２．３方法测定黄酮含量。 （２）温度对提取的影响
色，质柔软，气微、味甜、微酸。枸杞分布全国各地，主产宁夏、甘肃、青海、新疆、 １（ｍｌ／ｇ）加入到 ６０%乙醇中，于 ７０℃恒温水浴加热 ２ｈ，抽滤，在 ４８００ｒ/ ｍｉｎ的
河北、山东、江苏、浙江、江西、湖北、四川、云南、福建等地。枸杞生态习性为喜 转速下离心 １５分钟，照上述条件再提取一次，合并上清液，减压蒸馏，最终定容
下测定吸光度。根据标准曲线计算出样液中黄酮含量。代入公式计算黄酮式
３
５０
３
８０
２０
中：Ｍｎ为供试液中黄酮类化合物的质量，ｇ；Ｃ为供试液中黄酮类化合物的浓度，
４
６０
１
７０
２０
０．５８ ０．６４ ０．６６ ０．７２
（ｇ／Ｌ）；Ｖ为供试液总体积，Ｌ；
５
６０
２
８０
１０
０．６９
黄酮含量（％）＝（Ｍｎ／Ｍ）×１００％ 公式（２．１）
随着枸杞药理研究的深人进行，新的药理作用不断被发现。现代医学研究
精确称取 １．０９枸杞粉末 ４份，各加入 ２０ｍｌ６０％的乙醇中，分别于 ７０℃恒温
证明：柯杞有免疫调节、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗疲劳、降血脂、降血糖降血 水浴中加热 ３ｈ，提取 １次、２次、３次、４次，抽滤，在 ４８００ｒ／ｍｉｎ的转速下离心 １５
平、味甘、微苦、无毒，具有滋补肝肺、益精明目、强健筋骨的功效。枸杞的果、 上述条件再提取一次，合并上清液，减压蒸馏，最终定容于 １００ｍｌ容量瓶内 。按
叶、苗、根都可入药，皆有滋补作用。果实滋补肝肾，叶以止渴、消烦、解毒见长， 照 ２．３方法测定黄酮含量。
根（地骨皮）有清热，凉血、降压的功效。
（５）提取次数对提取的影响