3抗体筛选操作步骤

红细胞血型抗体筛选、鉴定操作规程(SOP)

目的:规范红细胞血型抗体筛选、鉴定操作，保证临床用血的安全性及有效性。

职责: 输血科技术人员负责红细胞血型抗体筛选、鉴定。

适用范围: 适用于输血科抗体筛选血标本、疑难血型标本及疑难配血标本。

所需材料和设备:抗球蛋白试剂、筛选细胞、谱细胞、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、普通离心机、血型血清学专用离心机、电热恒温水浴箱、显微镜。

抗体筛选操作步骤

1.取试管三支，分别标记Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ；各加入患者血清2滴，再分别加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号筛选细胞2滴。

2.混匀，37ºC孵育1h。

3.1300g离心15s。

4.轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集结果并记录。若肉眼不见凝集，以显微镜检查。

5.对没有凝集的试管，用盐水充分洗涤3次。

6.最后一次洗涤后，离心去上清，将试管边缘盐水用滤纸吸干。

7.按试剂说明书加最适稀释度抗球蛋白试剂1滴，充分混合。

8.1300g离心15s。轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集反应，记录结果。

抗体鉴定操作步骤

1.抗体筛选阳性，应作抗体鉴定试验已确定其特异性。

2依据谱细胞数量的多少(一般由8—16个单人份的已知血型表型的0型红细胞组成)取相应数目的试管，分别标记序号，各加入患者血清2滴，再分别加入谱细胞2滴。

3.混匀，37ºC孵育1h。

4.1300g离心15s。

5.轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集结果并记录。若肉眼不见凝集，以显微镜检查。

6.对没有凝集的试管，用盐水充分洗涤3次。

7.最后一次洗涤后，离心去上清，将试管边缘盐水用滤纸吸干。

8.按试剂说明书加最适稀释度球蛋白试剂1滴，充分混合。

9.1300g离心15s。轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集反应，记录结果。