仪器分析色谱法PPT课件

1、色谱相关术语
❖ 关于色谱峰 ❖ 关于保留值 ❖ 关于分配平衡
关于色谱峰的术语
o
0
o'
tM A'
标准偏差σ
半峰宽 E
G
峰
A
峰高
2F H
W h/2
C I t 'R tR
D
W
J
B
峰宽
色谱流出曲线
峰面 积
基线
❖ 峰底宽、半峰宽及标准偏差三者的
关系为：Y=4σ，Y1/2=2.354σ
❖ 拖尾峰 ❖ 伸舌峰 ❖ 鬼峰、假峰 ❖ 畸峰 ❖ 基线漂移 ❖ 基线噪声 ❖ 谱带扩张
——色谱柱分离效能的度量。
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关于分配平衡的术语
❖ 分配系数K（distribution coefficient ）
每毫升固定相上溶解（或吸附）溶质的量
K
每毫升流动相上溶质的量
cs cm
❖ 分配比k
又称为容量因子、容量比、分配容量，是
指在一定温度和压力下，平衡状态时组分
在固定相中的量与在流动相中的量之比值。
❖ 将色谱法用于分析中，则称为色谱分析。
因此色谱分析是一种分离、分析法。
2、色谱法分离原理
❖ 当流动相中所携带的混合物流过固定相 时，就会和固定相发生作用(力的作用)。 由于混合物中各组分在性质和结构上有 差异，与固定相发生作用的大小也有差 异。因此在同一推动力作用下，不同组 分在固定相中的滞留时间有长有短，从 而按先后不同的次序从固定相中流出。
1、什么是色谱法？
茨维特的实验
茨维特：俄国植物学家，主要从事植物 色素的研究工作，在1906 年发表的 文章中，首次提出了色谱的概念。
茨维特的实验
石油醚
碳酸钙
什么是色谱法？
❖ Chromatography
❖ 色谱法是一种分离方法。
特 点 ： 有 两 相 ， 一 是 固 定 相 （ stationary phase），一是流动相（mobile phase），两 相作相向运动。
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什么是液相色谱法？
❖ 以液体为流动相的色谱法
❖ Liquid Chromatography，简称LC
❖ 应用范围： 用于分离分析高沸点、热不稳定、
离子型的样品。
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其他分类方式
按固定相使用的形式可分为 ❖ 柱色谱（column chromatography）
将固定相装在色谱柱内 ❖ 纸色谱（Paper Chromatography）
色谱分析法
Chromatography
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前言
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第一章 色谱法引论
一、概述
问题1：什么是色谱法？ 问题2：为什么色谱法能将混合物分开？ 问题3：色谱法的分类？ 问题4：各种色谱法的应用范围？
VS k
2、色谱分析法动力学理论
❖ 研究理论的目的 解决色谱峰的分离问题
Chromatography，SFC)
什么是气相色谱法？
❖ 以气体为流动相的色谱法
❖ Gas Chromatogaphy，简称GC
❖ 按固定相状态的不同可分为： 气固色谱 (GSC) 气液色谱 (GLC)
❖ 应用范围：
用于分离分析易汽化（在-190℃-500℃ 范围内有0.2-10mmHg的蒸气压的）稳定、 不易分解、不易反应的样品，特别适合用 于同系物、同分异构体的分离。
Identificat1ion2 o3f4Gi5ns6en7 g,8A9merica ginseng and Notoginseng
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二、色谱法基本理论
❖ 拟解决的问题
色谱相关术语 色谱法理论的概况 色谱中的动力学理论 色谱分离情况的评价方法 影响色谱分离的主要因素及条件选择
（从理论的角度加以判断）
3. 色谱分析仪器的基本流程
流动相输 送系统
进样装置
色谱柱
检测器
数据记录 与处理
❖ 流动相携带进样装置引入的混合试样进入色谱柱
❖ 混合试样在色谱柱中进行分离
❖ 各组分依次进入检测器检测
❖ 检测响应信号导入计算机
❖ 得到色谱图
例如：气相色谱仪 （动画）
DAD1 C, Sig=270,16 Ref=360,100 (HUPING\DSLS-A21.D) mAU
是衡量柱子对组分保留能力的重要参数。
k ms mm
k K VS VM
tR' t0
tR’：组分在固定相中停留的时间，和组分在固定相中的质量ms成正比 t0：组分在流动相中停留的时间，和组分在流动相中的质量mm成正比
❖ 相比β： 色谱柱内固定相和流动相体积之比 是柱型及结构的重要特征。
VM K
用滤纸做固定相或固定相载体的 色谱
❖ 薄层色谱（Thin Lay Chromatography） 固定相均匀涂在玻璃板或塑料板上
应用举例
TLC
Bands 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Description Pseudoginsenoside F11 American Ginseng Ginsenoside Rg1 Ginsenoside Rf Ginseng Ginsenoside Rc Ginsenoside Rb1 Notoginseng Notoginsenoside R1
关于保留值的术语
❖ 死时间（t0，tM）：无保留组分出峰时间 ❖ 保留时间（tR）：
❖ 调整保留时间（t’R）： tR' tR t0
❖ 死体积（V0，VM）： V0 t0 Fc
❖ 保留体积（VR）： VR tRFc
❖ 调整保留体积（V’R）：
V R ' tR ' F c(tRt0)Fc
❖ 相对保留值（ri,s）r：i,s
tR' i tR' s
VR' i VR' s
—— 相对保留值又称为选择性因子（） —— 在气相色谱中，相对保留值的大小仅与固定相种
类和柱温有关。 —— 在液相色谱中，相对保留值的大小不仅与固定相
种类和柱温有关，还与流动相种类及配比有关。
色谱流出曲线的作用：
✓ 色谱峰数 = 样品中单组分的最少个数； ✓ 色谱保留值——定性依据； ✓ 色谱峰高或面积——定量依据； ✓ 色谱保留值和区域宽度
100
80
60
40
20
0 0
5
10
15
20
25
30
8
35
min
4、色谱法的分类
按流动相状态的不同，可分为以下三类：
气相色谱法 (Gas Chromatography, GC) 液相色谱法 (Liquid Chromatography，LC) 超临界流体色谱 (Supercritical Fluid