黄芪中总蒽醌含量的测定
保健食品中总蒽醌的测定
Ⅰ.总蒽醌的测定1 原理蒽醌类化合物在天然药物中以游离状态与苷的形式混合存在，游离态的约占总蒽醌的1/10～1/3，结合态常见的是葡萄糖苷。
结合蒽醌的两相水解溶剂为硫酸氯仿，游离总蒽醌用氢氧化钠、氨水混合碱液萃取，测定波长为510nm。
蒽醌类成分在碱性溶液中能显红色反应，在500～510nm波长处有吸收峰，在一定浓度范围内符合朗伯-比尔定律，含量多少在一定范围内与吸光度成正比。
2 试剂蒸馏水、0.5mol/L硫酸、氯仿、甲醇。
5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液：10%氢氧化钠溶液与4%氢氧化铵溶液等量混合；对照品：1，8-二羟基蒽醌(AR)。
3 仪器分析天平、分光光度计、移液管、容量瓶。
4标准品溶液的制备精密称取1，8-二羟基蒽醌对照品(105℃干燥至恒重)20.0 mg置200mL量瓶中，加甲醇至刻度，振摇，使对照品完全溶解，即得100μg/mL的标准品溶液。
5 标准曲线的制备精密吸取上述标准品溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0mL，分别置50mL量瓶中，在水浴上蒸干，加5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液溶解并稀释至刻度，放置1h，以混合碱液为空白，在510nm波长处测定吸收度，以浓度为横坐标、吸收度为纵坐标制作标准曲线。
6供试液的制备及总蒽醌含量的测定精密称取2g本品，加蒸馏水40mL溶解，0.5mol/L硫酸10mL，加热，水解2h，放冷，过滤，取续滤液15mL，移至分液漏斗中，加氯仿提取3次，（30mL、15mL、15mL），合并氯仿液，摇匀，分取氯仿液20mL，加5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液萃取4次，每次20mL，分取混合碱液置100mL容量瓶中，加混合碱液溶液稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。
以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液为空白对照，在510nm波长处测定吸收度，按以下公式即可得出蒽醌的含量（mg/100g）。
7 结果计算A样×C标×1000X= ×100A标×m样式中：X为试样中总蒽醌的含量，mg/100g；A样为供试品溶液在510nm波长处的吸光度；A标为标准品溶液在510nm波长处的吸光度；C标为标准品的浓度，mg/mL；m样为取样量，g。
【word】浅谈黄芪中主要成分的含量测定方法
浅谈黄芪中主要成分的含量测定方法中国健康月刊2011年第3O卷第9期JChinaHealthMonthly2011,V ol30.No.9月期间收治的ll2例心血管病高危患者,其中男性有62例,女性有5O 例,年龄在40～81岁之间,平均年龄为53.2岁.本组人选的都是高危患者并且都是拟行冠状动脉造影者.高危定义是既往发生过心脑血管疾病如缺血性脑卒中,短暂性脑缺血,冠心病等疾病或者是具有两个以上心血管危险因素.心血管危险因素主要包括吸烟,酗酒,肥胖,糖尿病,高血压,高血脂及年龄在5O以上等因素.人选患者中排除严重心功能不全及其他原因不愿接受检查者.1.2检查方法1.2.1仪器:本组研究中使用的颈动脉检查仪器是由飞利浦公司生产的IE33型超声显像仪.探头频率为7～10MHz.颈动脉检测的指标主要包括几项:搏动指数(PI),收缩期峰值流速(SPV),舒张末期流速(EDV),阻力指数(RI),其中几项指标的关系为Rj:(SPV—EDV)/SPV.1.2.2临床血液生化指标:调查所收治患者的既往心血管发病史,统计发生的次数和数目.检查患者的身体指标包括身高,体重,并测量患者的动脉血压和心率.另外在清晨空腹检查患者的血常规.1.23颈动脉超声检查:颈动脉检查时先纵向检查颈总动脉近心端沿血管的部位,之后在检查颈内动脉和颈外动脉.检查时患者应处于平卧位,而且在颈后垫上一个低枕,头部向后方仰.之后将头部转9O度,进行横向检查.在血管收缩期检查得到的IMT值是最厚的部位,了解内中膜情况,如此评价测量3次,之后取其平均值.对于有斑块的患者要观察其斑块的性状和大小,并准确的测最最大的斑块长度.依照IMT,颈总动脉,颈动脉分叉部和颈内动脉粥样化等情况将所有的患者分为4组,A组是IMT 小于1.0mm者,B组中IMT为1.1～1.5ram之间的患者;C组中长度为小于2cm且颈动脉斑块不大于2个的患者;D组斑块长度大于2cm或者是颈动脉斑块多于2个的患者.1.2.4冠状动脉造影:给患者做常规的股动脉和桡动脉穿刺进行造影检查,分析左右冠状动脉的造影结果.观察患者的造影情况,正常或者狭窄小于5O%者为造影阴性;狭窄大于5O%为造影异常.1.3统计学处理:本组研究中的数据通过SPSS13.0的统计学的软件包进行统计学处理,计量资料用料采用均数±标准差表示,组伺差异进行t检验,计数资料用卡方检验,有显着的统计学差异表示为P<O.05. 2结果4组患者的超声检查中显示c组和D组患者的危险因素和心血管发生数目明显的高于A组患者,D组患者的收缩压高于其他的三组,四组患者的心率,舒张压和BMI情况也存在有统计学差异(P<0.05).四组患者的血液生化指标比较也有显着的统计学差异(P<O.05).表1四组患者的情况比较3讨论心血管患者发生动脉粥样硬化是长期发展而形成的.近年来随着社会压力和生活节奏的加快,心脑血管的发病率也在逐年的升高,成为危害人们健康的重要因素之～,因此临床中对于心脑血管疾病的检查和治疗有重要的意义.有研究表明,经总动脉的IMT与年龄有线性正相关,其随着年龄的增加而增厚,尤其是对于六旬以上的老年人增厚差异较为明显.本组研究中心血管危险因素的判定标准:吸烟指患者在现在或者是以往有过吸烟;肥胖是按照中华医学会在2004年糖尿病分会的代谢综合征的诊断标准;高血压是根据美国JNC7和2003年ESH/ESC欧洲高血压指南标准;糖尿病主要是根据1999年WHO的糖尿病诊断标准.高血脂症的标准是要符合下列条件之一:(1)总胆固醇C)高于5.20mmol/L;(2)低密度脂蛋白胆固醇(LDL—c)高于3.12mmol/L;(3)高密度脂蛋白胆固醇(HDL---e)低于1.04mmol/L;(4)三酰甘油G)高于1.7mmol/L.总之,通过本组对我院心血管患者的分析表明,超声技术可以为临床中诊治提供一定的依据.参考文献【1】富华颖,周长钰,李广平,刘彤,郑成环,尹力.心血管病高危人群颈动脉超声的临床应用fJ1.天津医药,2010,38(8):663—667.【2]陈虞,胡大一,杨进刚.心血管病高危人群臂踝脉搏波速床应用Ⅲ.中国康复理论与实践,2007,13(3):275—278[3】王吉耀,廖二元,胡品津.内科学【M】北京:人民卫生出版社,2005:247.~]NewmanAB,NaydeckBL,NesDG,eta1.Coronaryarterycalcium,carotid arterywallthickness,andcardiovasculardiseaseoutcomesinaduhs70to99yearsol dfJ].AmJCardiol,2008,101(2):186—192.浅谈黄芪中主要成分的含量测定方法崔桂英(安徽淮南卫校附属医院,安徽淮南232007)【摘要】目的本文的研究主要为了对中药黄芪质量评价提~,-q-靠的方法和指导临床合理用药提供依据.方法线性关系考察,精密度试验,供试品溶液稳定性试验和重现性试验.结果蒙古黄芪与膜荚黄芪中含有化合物3,1,13,12,5和6的比值为O.50,o.70…111.89,o.59和1.13,化合物13和6的d/X<15%.没有显着性差异;化合物,3,12和5的d/X>15%~有显着性差异.结论膜荚黄芪中的化合物5,3,1均高于蒙古黄芪,蒙古黄芪的化合物12高于膜荚黄芪.【关键词】黄芪主要成分含量测定一中图分类号:R282.5文献标识码:B文章编号:1005—0515(2011)9-333-02中国传统医院强调中药的整体效果,多环节,多靶点,多成分的协同但是结果无法得到纯品.黄芪甲苷粗品进一步用反相硅胶C-18常压色作用才能够使中药机理发生作用.因此,我们从多个黄芪中主要化合物人谱柱分离,60%甲醇洗脱,得到黄芪甲苷纯品13.4mg,HPLC-ELS检测纯手,多方面的对黄芪的质量做出评价.度符合药典标准.运用硅胶柱色谱和活性炭色谱分离手段,从黄芪粉末醇1实验药材,对照品,试剂和仪器提物的正丁醇萃取部分分离出黄芪甲苷的纯品,纯度符合药典标准.分析1.1实验药材及试剂纯甲醇:HCRC国药集团试剂有限公司;分析乙腈:Sigma.蒙古黄芪与膜荚黄芪(购自淮南市药材批发市场),对照品本均来自本1.2仪器实验组从黄芪中分离得到的化合物(1,3,5,6,12和13);从黄芪中分离得HPLC:Waters2695;检测器:uVwaters2996,ELSDwaters2420到的化合物,主要有皂苷类,黄酮类,黄烷类,联苯衍生物,多糖,另外还有2实验条件的选择氨基酸,谷甾醇,胡萝苷等,其中以皂苷类,黄酮类最为重要.影响甲苷色谱柱:SUNFIREC18(5urn4.8*150mm);流动相:甲醇.水一乙腈;流提取率的因素有很多,根据文献用正交试验法对各因素试验结果的影响速:hnl/min.进行分析,顺序为乙醇的体积分数)PH值)乙醇用量,其中乙醇的体积分2.1黄酮(苷)数对黄芪甲苷的提取率有显着性的影响(p<O.05),PH值对黄芪甲苷的提表1梯度洗脱条件取率也有显着性影响(P<O.05),而乙醇用量的影响甚小(P>O.1).另外,与水提法相比,用醇回流提取法的提取率更高,且液体用量更少,便于以后进一步的分离.因此确定最佳提取条件为:乙醇体积分数为60%,乙醇用量6倍于黄芪质量,温度为60’E时.有文献报导,用正丁醇萃取后用氨试液洗涤提取液,弃去氨试液,正丁醇液蒸干,用0.451xm微孑L滤膜滤过,检测器:HPLC.PDAD;检测波长:250nm.2.2皂苷333?中国健康月刊2011年第3O卷第9期JChinaHealthMonthly2011,V o130.No.9表2梯度洗脱条件检测器:ELSD;氮气压力25.0psi,增益100,喷雾加热器级别60%,漂移管温度50℃.3对照品的制备精密称取黄芪甲苷(5)标准品21mg,黄芪皂苷IIO)26mg,紫檀烷型黄酮.3.葡萄糖苷(1)13rag,3’一羟基一5’一甲氧基异黄酮一7—0一D一毗喃葡萄糖苷(3)14mg,7～羟基一4,～甲氧基异黄酮(12)18mg,7,3’一羟基一5’甲氧基异黄酮(13)12mg,分别精确配成O.42mg/ml,1.3rag/rid,0.13u~ml,4.64ug/ml,0.01medml,0.024mg/ml的溶液.摇匀,分别经O.45urn微L滤膜过滤,备用.4供试品的制备分别取蒙古黄芪,膜荚黄芪各20%,分别用1500nil甲醇浸泡过夜回流提取3次(2h,2h,1.5h),得蒙古黄芪粗提物68.27g,膜荚黄芪粗提物48.55g.分别取蒙古黄芪粗提物68.8mg,膜荚黄芪粗提物55.1mg,均配成10rag/ml溶液作为黄酮(苷元)的供试品;分别取蒙古黄芪粗提物5g,膜荚黄芪粗提物59,甲醇溶解,309硅胶柱色谱纯化,二氯甲烷甲醇10:1f200mE)和4:l(400mL)洗脱,4:1部分蒸干后溶于50ml甲醇,作为皂苷的供试品.分别取蒙古黄芪粗提物1g,膜荚黄芪粗提物1g,溶于1OraL 甲醇中,取lmL稀释至10mL,作为黄酮的供试品.5方法学考察5.1线性关系考察表3线性关系考察表5.2精密度试验取已配好的对照品化合物l,3,5,6,12和13溶液重复进样6次,其中1,3,l2和13每次进10ul,5和6每次进5ul,记录各峰面积,计算RSD 值分别为2.6%,3-8%,O.8%,19%,O.4%和0_3%,表明本实验方法精密度符合要求.5-3供试品溶液稳定性试验取蒙古黄芪和膜荚黄芪的粗提物溶解,分别在O,4,8,12,24,48小时测定,进样40ul,测得蒙古黄芪的RSD值5和6分别为0.263%,O.215%, l,3,12和13分别为0.105%,0.082%,0297%,0.099%;膜英黄芪的RSD 值分别为5和60.395%,1.407%,1,3,12和13分别为O.155%,0.025%, 0.325%,0.101%.结果表明化合物1,3,5,6,12和13在48小时内稳定性良好.5.4重现性试验取蒙古黄芪提取物各6份,按供试品的制备方法平行处理,测定蒙古黄芪中的黄酮化合物1,3,12和l3及皂苷化合物5和6的峰面积,计算RSD为2.2.黄酮的加样回收率:取蒙古黄芪粗提物1.009,分别加30mg,lmg,2.35rag,3mg,甲醇溶解,过滤,蒸干,溶于10Oral色谱甲醇中,微孔过滤,进样lOul.重复6次,取峰面积的平均值,数据如下:表5,化合物3的加样回收率.6样品含量测定蒙古黄芪皂苷的供试品进样40uL测化合物5和6的含量,膜荚黄芪皂苷的供试品进样20uL测化合物5和6的含量.表6黄芪中黄酮的含量表7黄芪中皂苷的含量7讨论论文中分别考察了6种主要成份在蒙古黄芪和膜英黄芪中的含量差异,结果蒙古黄芪与膜荚黄芪中含有化合物3,1,l3,12,5和6的比值为0.50,0.70…111.89,0.59和1.13,化合物l3和6的d/X<I5%,没有显着性差异;化合物,3,12和5的d/X>15%均有显着性差异.由此得出结论,膜荚黄芪中的化合物5,3,l均高于蒙古黄芪,蒙古黄芪的化合物12 高于膜荚黄芪.8结束语黄芪的生物活性的全貌不能够通过单一活性成分的含量所反映出来.本文的研究主要为了对中药黄芪质量评价提供可靠的方法和指导临床合理用药提供依据.我们对黄芪中的主要活性成分进行制备,并以其作为对照品进行多活性组分含量测定.参考文献[1】胡伦香,张建,罗春,傅晓钟9一【2一酰基甲氧基)乙基】腺嘌呤的合成工艺研究,贵阳医学院2008,5,23(5).[2]张云峰,魏东等,大花罗布麻化学成分研究,天然产物研究与开发, 200618.954--957.[3]Agzarn0va,M.A.,Khim.Prir.S0edin.,1986,22,l17:pd. (En91.Trans1.),1986,22,ll5.超声在女性盆腔结核诊断中的应用霍雅清李畅刘晶鑫(吉林省结核病医院,吉林九台130500)【摘要】目的分析超声在女性盆腔结核诊断及鉴别诊断中的应用,为临床提供可靠的依据.方法对40例盆腔结核患者进行跟踪随访,穿刺活检,手术病理对照.研究每个病例声像图特征并进行分类总结.结果超声诊断盆腔结核病理符合率达92.5%左右.结论超声可以判断盆腔结核病变波及的范围,与周围组织及血管的关系,具有G4,I性,无痛性,安全性,可重复性等优点.334?。
总蒽醌检测方法
附录A（规范性附录）标志性成分检验方法1 原理样品经提取分离后，利用羟基蒽醌衍生物与碱液生成红色进行比色。
2 仪器分光光度计，水浴锅。
3 试剂3.1 标准溶液精密称取1，8—羟基蒽醌对照品8mg，加冰乙酸溶解，定容至10.0ml，临用时再加冰乙酸稀释1O倍。
3.2 混合酸溶液 25%盐酸溶液2ml加冰乙酸l8ml。
3.3 混合碱溶液取等体积的10%氢氧化钠溶液和4%的氨溶液混合。
3.4 乙醚，AR。
4 测定4.1 标准曲线精密吸取含蒽醌80µg/ml标准液0.00、0.20、0.4O、0.60、0.80、1.00ml于25ml比色管中，加混合碱溶液至刻度，混匀，暗处放置30min。
以混合碱溶液为空白，1cm比色皿在525nm波长处，分别测定吸光度。
4.2 样品测定精密称取0.5g样品置于100ml烧瓶中，加混合酸溶液24ml混匀，在沸水浴中回流15min。
放冷，加乙醚3Oml提取，提取液通过脱脂棉滤入分液漏斗中，继续用乙醚洗涤残渣2次，每次5ml，合并洗脱液。
残渣再加混合酸16ml，在沸水浴中回流15min，放冷，用乙醚2Oml提取，并用乙醚洗涤残渣2次。
每次5ml，合并乙醚液于分液漏斗中。
分别用水3Oml、2Oml振摇洗涤2次，弃去水洗液，乙醚液用混合碱5Oml、2Oml、2Oml提取3次，合并碱提取液，置100ml容量瓶中，加混合碱溶液至刻度，摇匀，取约50ml置100ml锥形瓶中，称重(准确至0.01g)置沸水浴中回流30min，取出，立即冷却至室温，称重，补加10%氨水溶液到原来的重量,混匀，分别测定吸光度。
5 计算A×100×100样品总蒽醌含量（mg/100g）＝m×1000式中：A一样品相当于标准系列的浓度(µg/ml)m一样品取样量(g)6 技术参数相对标准偏差：＜10%回收率：88%～91%参考资料：保健食品中总蒽醌测定方法的研究.公共卫生与预防医学.2006，17（6）。
药典大黄中总蒽醌含量的测定
药典大黄中总蒽醌含量的测定说到大黄，大家都知道它是一味常见的中药，特别是用来治疗便秘，通大肠，简直是“肠道清道夫”。
大黄的药用价值早在古代就被发现了，大家都知道它的功效吧？可是你知道吗？大黄里面有一种重要的成分叫总蒽醌，像个隐藏的“宝藏”，虽然看不见摸不着，但它的作用可不小。
今天，我们就来聊聊，如何测定大黄中这个神秘的总蒽醌含量。
说起测定，听起来可能有点复杂，其实也不难。
总蒽醌的测定是通过化学分析来实现的，简单说，就是通过一系列化学反应，让我们可以量化出大黄中到底含有多少这种成分。
要知道，总蒽醌可不是随便什么成分，它可跟大黄的药效息息相关，直接影响着药物的质量和疗效。
所以，测定它的含量，不仅是为了保证质量，还为了确保使用效果，避免过多或过少的总蒽醌影响疗效。
好啦，不废话，直接进入主题。
大黄中总蒽醌含量的测定，一般是采用紫外分光光度法，这听起来很高大上，实则操作起来并不复杂。
简单来说，就是用紫外光去照射大黄的提取液，看它吸收光的情况。
光吸收的程度，直接就和总蒽醌的含量成正比。
咋一听是不是有点像魔法？但实际上，就是通过测量光的吸收强度，来算出其中含有多少总蒽醌。
我们要从大黄中提取出蒽醌成分。
这个步骤好比是打破大黄的外壳，把里面的精华给提取出来。
我们一般使用的是醇水混合液来进行提取，醇水混合液就是那种既能溶解蒽醌，又能保持成分稳定的液体。
提取液经过滤和浓缩之后，最后我们得到的是一个可以分析的溶液。
使用紫外分光光度计。
这可不是随便什么普通仪器，紫外分光光度计就像一位严格的“守门员”，它能精确测量溶液吸收紫外线的程度。
每种物质吸收光的波长和强度都不一样，所以我们就能通过这些数据，判断大黄中蒽醌的含量是多少。
就像看一张高分考卷，分数的多少一目了然。
在测试过程中，别以为光测总蒽醌就行了。
测定过程中还有很多细节，稍微不注意，结果可能就不准确了。
比如溶液的浓度，要控制得刚刚好，不然光线吸收的效果就会偏差，测出来的结果也就不靠谱了。
大黄蒽醌类成分含量的测定方法
医药化工化 工 设 计 通 讯Pharmaceutical and ChemicalChemical Engineering Design Communications·191·第44卷第10期2018年10月大黄作为传统药材和出口商品之一，蒽醌类衍生物为其发挥作用主要活性物质，用于测定蒽醌类成分含量的方法有很多，但在操作上存在差异，导致测定结果存在很大的偏差。
1 实验部分1.1 实验仪器与药品实验仪器主要为紫外分光光度计和电子天平；实验药品包括：1，8-二羟基蒽醌、大黄酚、大黄素、光茎大黄。
1.2 显色剂制备用甲醇将醋酸镁溶解，制备显色剂，即醋酸镁甲醇，浓度为0.6%，将其摇晃均匀后备用。
1.3 标准曲线制备用甲醇将1，8-二羟基蒽醌充分溶解，然后定容到25mL ，制备标准液，1，8-二羟基蒽醌的用量为10.7mg 。
分别取20μL 、40μL 、80μL 、160μL 、200μL 、300μL 和400μL 标准液，将其放置到10mL 容量瓶当中，用显色剂将其定容到刻度，摇晃均匀后对其吸收度进行测定，并用一组显色剂作为空白对照。
测定结果为：浓度为0.855mg/mL 时，吸收度为0.033；浓度为1.711mg/mL 时，吸收度为0.070；浓度为3.423mg/mL 时，吸收度为0.145；浓度为6.847mg/mL 时，吸收度为0.292；浓度为8.561mg/mL 时，吸收度为0.370；浓度为12.841mg/mL 时，吸收度为0.561；浓度为17.121mg/mL 时，吸收度为0.700；浓度为25.682mg/mL 时，吸收度为1.100。
1.4 稳定性考察分别取160μL 和300μL 标准液，将其放置到10mL 容量瓶当中，用显色剂将其定容到10mL 。
然后放到室内灯光条件下，对其吸收度进行测定。
2 大黄蒽醌类成分含量测定方法2.1 蒽醌类成分提取与含量测定2.1.1 游离蒽醌借助热氯仿回流进行直接提取，其提取率较高。
荧光分光光度法测大黄中总蒽醌的含量
荧光分光光度法测大黄中总蒽醌的含量贾宝秀;李玉琴;冀海伟【摘要】目的建立一种快速、简单、灵敏度高,测定大黄中总蒽醌的含量的荧光分光光度法.方法于10.0 ml比色管中加入一定量的1,8-二羟基蒽醌标准溶液,pH值为3.60的NaAc-HAc缓冲溶液2.0 ml,有机溶剂乙腈2.0 ml,最后定容至10.0 ml;同时做空白对照,在最大激发波长为440 nm,最大发射波长为521 nm处测定一系列溶液的荧光强度.结果荧光强度与蒽醌的含量在0.0091～15.0 μg/ml范围内呈良好的线性关系.用于大黄中总蒽醌的含量测定,结果令人满意.结论荧光分光光度法成功用于大黄中总蒽醌的含量测定.【期刊名称】《泰山医学院学报》【年(卷),期】2008(029)001【总页数】5页(P36-40)【关键词】荧光分光光度法;大黄;蒽醌【作者】贾宝秀;李玉琴;冀海伟【作者单位】泰山医学院,山东,泰安,271016;泰山医学院,山东,泰安,271016;泰山医学院,山东,泰安,271016【正文语种】中文【中图分类】TQ460.7大黄为多年生高大草本，根茎肥厚。
茎直立，瘦果三棱形，为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.、唐古特大黄Rheum tanguticum Ma xim. ex Balf.或药用大黄Rheum officinale Baill.的干燥根及根茎。
秋末茎叶枯萎或次春发芽前采挖，除去细根，刮去外皮，切瓣或段，绳穿成串干燥或直接干燥。
现已从大黄中分离到蒽醌、二蒽酮、苯丁酮、鞣质、萘、色酮等不同种类的80种化合物，大体上分为蒽醌类、多糖类、鞣质。
其中蒽醌类化合物包括大黄素等游离型蒽醌，大黄素苷等结合型蒽醌，番泻苷等双蒽醌类成分[1]。
大黄的化学成分较复杂，其主要成分为蒽醌类衍生物[2]。
有效成分的量的多少，与提取方法有很大关系，大黄中有效成分的提取方法主要有溶剂提取法、超声提取法、超临界萃取法和微波辅助流动萃取法，还有明胶沉淀法[3]、醇调pH法[4-5]、聚酰胺法[6-7]、大孔树脂分离纯化法[8]等。
黄芪含量测定实验报告
一、实验目的1. 掌握黄芪中有效成分的提取方法。
2. 学习并掌握高效液相色谱法（HPLC）测定黄芪中黄芪甲苷含量的原理和方法。
3. 通过实验，了解黄芪的质量控制方法。
二、实验原理黄芪为豆科植物Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.的干燥根，具有补气固表、利水消肿、托毒生肌的功效。
黄芪甲苷（Astragaloside IV）是黄芪中的主要有效成分，具有显著的抗炎、抗氧化、免疫调节等作用。
本实验采用高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
三、实验材料与仪器1. 试剂：黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品检定所提供），甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水。
2. 仪器：高效液相色谱仪、超声波清洗器、电子天平、旋转蒸发仪、离心机、恒温水浴锅等。
四、实验方法1. 样品前处理（1）样品制备：准确称取黄芪粉末0.1g，置于10ml容量瓶中，加入甲醇溶液（80%）5ml，超声提取30min，取出，冷却至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液。
（2）对照品溶液制备：准确称取黄芪甲苷对照品10mg，置于10ml容量瓶中，加入甲醇溶液（80%）溶解并定容至刻度，摇匀，过滤，作为对照品溶液。
2. 色谱条件（1）色谱柱：C18柱（4.6mm×250mm，5μm）；（2）流动相：甲醇-水（80：20）；（3）流速：1.0ml/min；（4）检测波长：210nm；（5）柱温：30℃。
3. 实验步骤（1）将高效液相色谱仪开启，预热至色谱柱平衡；（2）将供试品溶液和对照品溶液分别进样，记录色谱图；（3）根据峰面积计算供试品中黄芪甲苷的含量。
五、结果与分析1. 色谱图供试品溶液和对照品溶液的色谱图如图1所示。
从图中可以看出，供试品溶液中黄芪甲苷峰与对照品峰保留时间一致，且峰形良好。
2. 结果计算根据色谱图，计算供试品中黄芪甲苷的含量为0.082mg/g。
3. 讨论本实验采用高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷的含量，结果表明，本方法操作简便、准确可靠，适用于黄芪的质量控制。
大黄及制剂中蒽醌类成分含量测定的研究近况-药学实践杂志
大黄及制剂中蒽醌类成分含量测定的研究近况
向征兵 摘要 谢怀龙 ( 解放军第 533 医院药剂科 昆明 650224)
本文总结了以往关于大黄及制剂中蒽醌类成分含量测定方法的研究状况 , 主要包括比色法 、
薄层色谱法 、 高效液相色谱法、 毛细管电泳色谱法 。其中, 毛细管电泳色谱法是一种新兴的分析方 法, 已广泛应用于各个方面。 关键词 大黄; 蒽醌类; 含量测定 中蒽醌类成分的含量 , 实验表明 , 该法干扰少 , 加样 回收 率 为 94 98% , RSD 为 2 989% 。因 此 , 此法也用于中药制剂的测定。 张志荣等 曾用硫酸水解、 溶剂多次萃取 的方法, 测定制剂牛黄解毒片和三黄片中蒽醌 衍生物的含量。样品用硫酸水解 , 氯仿多次提 取 , 加 5% 碳酸氢钠溶液萃取, 最后加显色剂测 定。测 得样 品平均 回收 率为 96 97% ( n = 9, RSD = 3 11% ) 。本文 采用标准比色法 测定样 品含量 , 只需在测定时制备随行对照液, 免去了 制作标准曲线的步骤 , 且制备好的样品比色液 可随时测量 , 不受时间限制。 以上测定是以 5% 氢氧化钠 - 2% 氢氧化 氨 ( 1 1) 的混合液为显色剂, 因其稳定性差 , 不 同时 间吸 收度 不 同, 从而 影响 结果。沙 世炎 等 [ 4] 介绍用醋酸镁显色测定制剂中蒽醌甙的含 量。Zwaring 比较了醋酸镁和氢氧化钠 , 认为前
度上无显著差异 ( P > 0 05) 。 表2 非那西丁和咖啡因含量测定结果 ( n = 3)
样 本法 部颁标准法 标示量 ( % ) RSD ( % ) 96 96 0 35 98 66 0 32 99 91 0 48 98 96 0 29 98 17 0 23 98 76 0 31 97 45 0 29 97 68 0 30
采用HPLC法对一种保健食品中总蒽醌含量的测定方法
2019年6月| 33酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚均达到基线分离，理论板数按大黄素峰计算均不低于5000，拖尾因子均在0.95～1.05，阴性对照无干扰。
见图1。
A. 混合对照品溶液；B. 供试品溶液；C. 阴性供试品溶液1.芦荟大黄素；2.大黄酸；3.大黄素；4大黄酚；5大黄素甲醚图1 对照品、供试品及阴性供试品的色谱图2.6 线性关系考察按照2.2项下的方法，取各对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL 含芦荟大黄素58.78μg、大黄酸116.00μg、大黄酚67.93μg，大黄素41.40μg，大黄素甲醚22.06μg 的混合标准储备液。
再以甲醇对倍稀释，摇匀，即得系列混合对照品溶液。
吸取各浓度混合对照品溶液10μL，进样，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线。
回归方程及线性范围分别为芦荟大黄素Y=49.092x+2.0575，1.84～58.78μg ·mL -1，r=1；大黄酸Y=43.821x+4.6572，3.63～116.00μg ·mL -1，r=1；大黄素Y=35.906x+0.9923，1.29～41.40μg ·mL -1，r=1；大黄酚Y=52.149x+3.8537，2.12～67.93μg ·mL -1，r=1；大黄素甲醚Y=40.763x+0.5908，0.69～22.06μg ·mL -1，r=1。
2.7 定量限将对照品溶液稀释进行测定，芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的定量限分别为0.92、1.59、1.48、0.71、0.78ng。
0 引言一种保健食品减肥片由制大黄、泽泻等有效成分组成，具有辅助减肥的保健功能。
其中制大黄含蒽醌类化合物，具有多种活性[1-3]。
本试验采用HPLC 法建立了总蒽醌5个成分的含测方法，结果表明此法专属性、重复性好，为大黄类保健食品的质量标准研究提供了依据。
1 仪器与试剂Agilent 1200液相色谱仪，芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚均购自中国食品药品检定研究院，甲醇、乙腈为色谱纯。
保健食品中总蒽醌的测定
保健食品中总蒽醌的测定1 仪器及试剂1.1仪器(1 分析天平(感量0.00001g ;(2 分光光度计(751型;(3 水浴锅;(4 刻度吸管。
1.2试剂1.2.1对照品:1, 8-二羟基蒽醌(中国生物制品鉴定所;1.2.2 5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液:10%氢氧化钠溶液与4%氢氧化铵溶液等量混合;1.2.3标准品溶液:精密城区25mg 1, 8—二羟基蒽醌对照品,置200ml 容量瓶中, 用乙醚溶解并稀释至刻度,摇匀,备用;1.2.4氯仿;1.2.5乙醚;1.2.6 5N 硫酸;1.2.7蒸馏水。
2 测定步骤中2.1标准曲线的绘制:精密量取上述标准溶液1ml 、2ml 、3ml 、4ml 、5ml , 分别至于25ml 容量瓶中,在水浴上挥净乙醚,放凉,分别加5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液至刻度,摇匀,以5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液为空白对照,在490nm 下,以1cm 比色杯测定吸光度,用回归法求标准曲线方程。
2.2供试品溶液的制备及总蒽醌含量的测定:取本品50粒, 倾出内容物, 精密称定供试品内容物3g , 于250ml 烧瓶中,加5N 硫酸45ml ,直火加热水解2h ,加入氯仿40ml ,萃取3次(40ml , 30ml , 30ml ,萃取液用蒸馏水洗涤2次(20ml , 20ml ,再用5% 氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取4次(30ml , 20 ml , 20ml , 20ml ,合并萃取液,用氯仿洗涤数次至氯仿层无色,弃去氯仿层,用5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液定容至100ml ,摇匀,以5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液为空白对照,在490nm 下,以1cm 比色杯测定吸光度,由线性方程计算即得供试品溶液的浓度。
2.3结果计算:C1( μ g/ml ×5ml ×100mlC2 =———————————— ×( μg/100mgm ×10C=C2×1×100(g/Kg式中C :1kg 分析样品中含蒽醌量(gC2:100mg 分析样品中含蒽醌量( μgC1:由回归方程计算所得5ml 容量瓶中蒽醌的浓度( μ g/mlM : 所用分析样品的重量(g蒽醌类化合物按结构的不同可分成羟基蒽醌类、氧化蒽酚及蒽酚类、二蒽酮类。
中蒽醌的含量
中蒽醌的含量测定及其重要性中蒽醌是一类具有显著生物活性的化合物，广泛存在于植物、微生物和动物体内。
由于其独特的化学结构和药理作用，中蒽醌在医药、保健品、化妆品等领域具有广泛的应用价值。
因此，准确测定中蒽醌的含量对于保证产品质量、确保用药安全以及推动相关领域的科学研究具有重要意义。
一、中蒽醌的含量测定方法目前，测定中蒽醌含量的方法主要有重量法、荧光法、比色法、极谱法、薄层扫描法、高效液相色谱法等。
其中，高效液相色谱法（HPLC）因具有分离效果好、灵敏度高、重现性好等优点而被广泛应用。
该方法通过色谱柱将样品中的各组分分离，然后利用检测器对分离后的组分进行检测，最后根据标准曲线计算中蒽醌的含量。
在HPLC法中，选择合适的色谱柱、流动相以及检测波长是关键。
常用的色谱柱为C18柱，流动相为甲醇、乙腈等有机溶剂与水按一定比例混合的溶液。
检测波长的选择则根据中蒽醌的紫外吸收特性来确定，一般在200-400nm范围内。
此外，为了提高测定的准确性和重现性，还需要对样品进行适当的前处理，如提取、纯化等。
二、中蒽醌含量测定的应用1. 医药领域：中蒽醌具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种药理作用，因此在医药领域具有广泛的应用。
准确测定药物中中蒽醌的含量，对于保证药物疗效、控制药物剂量以及确保用药安全具有重要意义。
例如，在研发新药时，需要通过含量测定来评估药物的活性成分含量；在生产过程中，需要通过含量测定来控制药物的质量；在临床用药时，医生需要根据药物中中蒽醌的含量来确定用药剂量。
2. 保健品领域：中蒽醌作为一种天然活性成分，也被广泛应用于保健品中。
在保健品中添加适量的中蒽醌可以增强产品的保健功能，如抗氧化、抗衰老等。
因此，准确测定保健品中中蒽醌的含量对于保证产品质量和功效具有重要意义。
同时，含量测定还可以用于评估不同来源、不同生产工艺的保健品中中蒽醌的含量差异，为消费者提供更多选择。
3. 化妆品领域：中蒽醌在化妆品领域也有广泛的应用，主要用于美白、祛斑等方面。
不同剂量配伍的三黄泻心汤总蒽醌含量比较研究
不同剂量配伍的三黄泻心汤总蒽醌含量比较研究三黄泻心汤是一种古代中医药方，用于治疗心绞痛、心肌梗死、高血脂等疾病。
该方剂由三味中药组成，分别是黄芪、黄柏和大黄。
近年来，随着中医药的发展，对三黄泻心汤的研究也越来越深入，其中一个重要的研究方向就是对不同剂量配伍的三黄泻心汤总蒽醌含量进行比较研究。
本文旨在对不同剂量配伍的三黄泻心汤总蒽醌含量进行比较研究，为三黄泻心汤的临床应用提供科学依据。
一、三黄泻心汤的组成和药理作用三黄泻心汤是由黄芪、黄柏和大黄三味中药配伍而成的。
这三味药物均具有明显的药理作用和临床应用价值。
1. 黄芪：黄芪为豆科植物黄芪的根，具有补气养血、益气健脾、消肿化脓、升阳固表的作用。
有研究表明，黄芪中含有丰富的总蒽醌类化合物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种药理作用。
2. 黄柏：黄柏为苦楝科植物苦楝的树皮，具有清热燥湿、凉血解毒、止血止痛的作用。
研究表明，黄柏中的总蒽醌化合物能够抑制血小板凝集、增加冠脉血流量，对心脏病具有保护作用。
综合以上三味药物的药理作用，三黄泻心汤具有补气养血、清热解毒、泻火通便的作用，适用于治疗心绞痛、心肌梗死、高血脂等疾病。
为了探讨三黄泻心汤总蒽醌含量与剂量配伍之间的关系，我们进行了一项实验研究。
我们选取了不同配伍比例的三黄泻心汤方剂，分别为1:1:1、2:1:1、1:2:1和1:1:2。
然后，我们采用高效液相色谱法（HPLC）对不同配伍比例的三黄泻心汤样品中的总蒽醌含量进行了测定。
我们对结果进行了比较分析。
实验结果显示，不同剂量配伍的三黄泻心汤总蒽醌含量存在明显差异。
在1:1:1配伍比例下，总蒽醌含量最高；而在其他配伍比例下，总蒽醌含量逐渐减少，其中以1:1:2配伍比例的总蒽醌含量最低。
这一结果表明，三黄泻心汤中不同药物的配伍比例对总蒽醌含量有明显影响，1:1:1比例是最优配伍比例。
三、结论与展望通过对不同剂量配伍的三黄泻心汤总蒽醌含量进行比较研究，我们发现了不同配伍比例下总蒽醌含量的差异。
测定大黄中总蒽醌含量的分光光度法改进
测定大黄中总蒽醌含量的分光光度法改进
刘翠哲;王汝兴;刘喜纲
【期刊名称】《天津中医药》
【年(卷),期】2004(21)4
【摘要】[目的]改进大黄药材中总蒽醌的含量测定方法。
[方法]1 ,8-二羟基蒽醌与碱显色后 ,2h内隔时扫描光谱图 ;对照品和样品同样处理后绘制标准曲线。
[结果]确定了最大吸收波长 ,消除了测定过程中样品湿热降解带来的误差。
[结论]通过方法学考察 ,证明此方法精密准确、回收率高 ,可以作为大黄中总蒽醌的含量测定方法。
【总页数】2页(P335-336)
【关键词】含量测定;大黄;总蒽醌;分光光度法
【作者】刘翠哲;王汝兴;刘喜纲
【作者单位】承德医学院中药研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R282.71
【相关文献】
1.紫外-可见分光光度法测定生大黄和醋大黄的总蒽醌含量 [J], 魏江存;陈勇;谢臻;李耀华;邓丽红;阙祖亮;庞丹青;
2.直接紫外分光光度法测定不同产地大黄中总蒽醌含量 [J], 金乾兴;戴晓燕;吴巧凤
3.紫外分光光度法测定骨伤康复外洗颗粒中大黄总蒽醌含量 [J], 柯颖川;吴文康
4.柱吸附—分光光度法测定大黄及其制剂中总蒽醌类成分的含量 [J], 魏有良
5.紫外-可见分光光度法测定生大黄和醋大黄的总蒽醌含量 [J], 魏江存; 陈勇; 谢臻; 李耀华; 邓丽红; 阙祖亮; 庞丹青
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减肥类保健食品中总蒽醌的检测方法与方法 不确定度的评定 党祎苗
减肥类保健食品中总蒽醌的检测方法与方法不确定度的评定党祎苗发表时间：2019-03-27T10:22:54.650Z 来源：《基层建设》2018年第34期作者：党祎苗[导读] 摘要：目的：建立减肥类保健食品中总蒽醌的检测方法，并对测定过程中可能引入的不确定度进行分析评定。
宁夏回族自治区食品检测研究院宁夏银川 750001摘要：目的：建立减肥类保健食品中总蒽醌的检测方法，并对测定过程中可能引入的不确定度进行分析评定。
方法：式样经测量过程提取测定;建立不确定度评定的数学模型，确定不确定度来源，计算合成不确定度和扩展不确定度。
结果：加标回收率范围为95%—105%，线性系数达0.999，在对10份样品进行加标回收，其总蒽醌的含量和扩展不确定度为（2038187.4）mg/100g,包含因子k=2,,相对扩展不确定度为4.6%。
结论：该实验方法步骤简单，仪器稳定，灵敏度高，重复性好，满足国家痕量检测的要求;本方法适用于减肥类保健食品中总蒽醌方法的不确定度评定。
关键词：减肥类保健食品中总蒽醌；紫外分光法；不确定度 Evaluation of Uncertainty of Detection Method and Method for Total Aquinone in Health Foods with Weight Loss DANG Yi MiaoNingxia Food Testing Research Institute,Ningxia Yinchuan 750001,China ABSTRACT：Objective: A method for detecting total anthraquinone in diet foods was established, and the uncertainty that might be introduced in the process was analyzed and evaluated.Method:The pattern is determined by the measurement process; The mathematical model of uncertainty evaluation is established, the source of uncertainty is determined, and the uncertainty of synthesis and expansion is calculated.Result:The standard recovery rate ranges from 95 % to 105 %, with a linear coefficient of 0.999. In the addition of 10 samples, the total anthraquinone content and expansion uncertainty is(2038,187.4) mg/100g, including the factor K = 2,, The relative expansion uncertainty is 4.6 %.Conclusion:The experimental method has simple steps, stable instrument, high sensitivity and good repeatability, and meets the requirements of trace detection in the country. This method is suitable for the uncertainty assessment of total anthraquinone in diet foods. Key words：Total anthraquinone in diet health food; Ultraviolet spectrophotometry; Degree of uncertainty 引言总蒽醌来源于掌叶大黄(大黄是我国的四大中药之一)的根茎，其颜色形状为棕黑色浸膏或棕色粉状结晶，是游离蒽醌、结合蒽醌、蒽酮、糖、鞣质等混合物，生物合性与大黄原药相同。
用碱比色法测定参芪防感口服液中蒽醌类成分
. 反应 ∀ 蒽醌成分含量测定的方法应用最普遍
的就是碱比色法 大黄素为对照品 于 Κ ¬
测定吸
收度 ∀
2 2 标准曲线 精密称取
大黄素 置
量瓶中 用乙醚溶解并
稀释至刻度 摇匀 ∀ 精密量取稀释液
和
分别置于
量瓶中 在水浴上蒸去乙醚 加
氢氧化钠2 氢氧化铵混合碱溶液 以下简称混合碱
使成 液∀
和 后 以混合碱为空白 在
波长处测定无吸收 ∀
2 5 稳定性试验
取 项下已测定的供试品溶液 后再进行测定 ∀ 表
明在 之内是稳定的 ∀
2 6 样品的含量测定
取 批样品 按/ 0项下方法制备供试品溶液 ∀ 以混
合碱为空白 在
波长处测定吸收度 ∀ 结果见表 ∀
表 1 参芪防感口服液中游离蒽醌的含量
Ταβ 1 ×
∏
≥
∏
样品批号
≤ Λ#
用碱比色法测定参芪防感口服液中蒽醌类成分
任力 周国军 宁夏医学院 宁夏 银川
辽宁省药检所
中图分类号
文献标识码
文章编号
2
22
参芪防感口服液是由人参 !黄芪 !大黄等五味中药组成 的纯中药制剂 是宁夏中医研究院的科研成果 ∀ 方 中的 人 参 !黄芪都 已 有 含 量 检 测 方 法 ∀ 大 黄 在 方 中 起 很 大 作 用 ∀
平均含量 ≤ Λ #
?
2 7 加样回收率试验 取按 / 0 项 下 制 作 已 测 过 的 缺 大 黄 的 空 白 供 试 液 加入一定量的大黄素乙醚液 ∀ 挥去乙醚 按/ 0项下
方法操作 测的加样回收率 结果见表 ∀ 表 2 加样回收率实验结果 ν
Ταβ 2 ×
∏
消补减肥片的质量研究
消补减肥片的质量研究
刘忠保;吴启南
【期刊名称】《基层中药杂志》
【年(卷),期】1996(010)002
【摘要】本文对消补减肥片中的君药大黄、黄芪进行了薄层定性一分析，并采用比色法对游离蒽醌及总蒽醌的含量进行了测定。
其回收率为１００．２５％。
【总页数】3页(P26-28)
【作者】刘忠保;吴启南
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R286.0
【相关文献】
1.消补减肥片治疗老年单纯性肥胖病的研究 [J], 李春生;冯晋光
2.消脂减肥（浓缩）丸质量标准研究 [J], 洪挺;任琦;王笑琴;赖杰仁;钱媛;杨毅生;
3.消脂减肥(浓缩)丸质量标准研究 [J], 洪挺;任琦;王笑琴;赖杰仁;钱媛;杨毅生
4.中药消补减肥方对体外培养肝细胞胆固醇合成作用的研究 [J], 刘维佳;徐萃华;李春生
5.消补减肥片治疗单纯性肥胖病的研究 [J], 李春生;王文春;陈楷;冯晋光;蔡玉珍;张人玲;魏开元;刘素梅;陈可冀
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黄芪中总蒽醌含量的测定
江培
【摘要】目的:探讨黄芪中总蒽醌含量的测定方法.方法:采用差示分光光度法测定
黄芪中的总蒽醌含量.结果:在0.00246~0.01968 mg/mL范围内线性关系良好,线
性回归方程为Abs.=45.69C+0.0013,(r=0.9999),黄芪中总蒽醌的含量为
0.5047%(RSD=0.1040).结论:该方法简单易行,平均加样回收率良好,结果可靠.
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2017(030)002
【总页数】4页(P243-246)
【关键词】差式分光光度法;黄芪;1,8-二羟基蒽醌;总蒽醌
【作者】江培
【作者单位】哈尔滨商业大学药学院哈尔滨 150076
【正文语种】中文
【中图分类】R284
黄芪作为一味传统的补益药，具有增强免疫功能、抗肿瘤、保肝、增强心肌收缩力及广泛的抗菌等药理作用[1]。
黄芪的化学成分以蒽醌及其苷类化合物为主，此外，还有萘醌类、萜类、己肽类、多糖类等其他化学成分[2]。
蒽醌类化合物（anthraquinones)是从天然植物中分离得到的天然醌类化合物，是迄今为止发现的最重要的也是数量最多的一类化合物[3]。
蒽醌类化合物具有多方面的药理活性，具有抗菌消炎，抗肿瘤等作用，故植物中蒽醌类化合物的提取分离以及含量测定也
成为了一个重要的研究课题。
本文主要针对黄芪的化学成分—总蒽醌进行提取分
离及其利用比色法进行含量测定的研究。
1.1 实验材料
黄芪，购自哈药集团世一堂大药房，干燥并粉碎后备用。
1.2 实验试剂
1,8-二羟基蒽醌(中国药品生物制品检定所提供，批号14299702)，苯（天津试剂
二厂生产，批号201411128，分析纯），氯仿（天津试剂二厂生产，批号20150311，分析纯），甲醇（成都试剂三厂生产，批号20140912，分析纯），其他试剂均为化学纯。
1.3 实验仪器
紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司)、FA-1004电子分析天平(上海
天平仪器厂)、AEL-40SM电子分析天平(SHI-MADZU)、W201B恒温水浴锅(上
海中生生物技术有限公司)。
该实验准备利用氯仿萃取与硫酸水解同步进行的方法，因为在热氯仿环境下游离蒽醌的溶解向正方向移动，萃取效率得到提高。
利用Borntragers反应原理，蒽醌
类化合物遇碱显红色或紫红色的这一特性。
由于带有游离羟基的蒽醌在碱性条件下或遇到醋酸镁甲醇液能产生此颜色变化，其他蒽类物质和蒽醌不发生该颜色变化[4]。
因此，采用差式分光光度法测定样品中总蒽醌含量，该方法能消除背景吸收，排除了其他成分对蒽醌类化合物测定的干扰[5]，且回收率高，结果准确可靠。
2.1 1,8-二羟基蒽醌最适波长的确立
精密称取105℃干燥2h的1,8-二羟基蒽醌10mg，置100mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为标准液(0.1g/L)。
精密吸取标准液1.0mL2份，分别置于
2个10mL容量瓶中，1份用甲醇稀释至刻度，另1份用0.5%醋酸镁甲醇溶液稀
释至刻度，摇匀。
分别用甲醇及0.5%醋酸镁甲醇液作为空白，在400～600nm
区间作二者的吸收光谱，如图1。
消除背景吸收后最适波长在510mn处。
2.2 总蒽醌供试品溶液的制备
精密称取黄芪粉末30.0g，置索氏提取器中，加苯150mL提取至溶液无色，水浴蒸干，冷却后，残渣加蒸馏水10mL，20%硫酸5 mL，30mL氯仿回流提取1h，倾入分液漏斗中，静置分层，取氯仿层，加无水硫酸钠脱水、抽滤，滤液水浴蒸干，残渣先加适量0.5%醋酸镁甲醇液溶解，后定容于10mL容量瓶中，为样品溶液1。
另取5.0mL提取液，同法处理后，用甲醇溶解定容于10mL容量瓶中，为样品溶
液2。
2.3 标准曲线的绘制
精密称取105Ⅰ干燥2 h的1,8-二羟基蒽醌10mg，用甲醇溶解，定容至100ml，精密吸取0.5、1.0、2.0、3.0、4.0ml各2份，分别置于10mL容量瓶中，1份加0.5%醋酸镁甲醇液稀释至刻度，另1份用甲醇稀释至刻度，摇匀。
前者置样品池，后者置参比池中，于510nm处测定各溶液吸收值(以下吸光度均以Abs.表示),，
以Abs为纵坐标,，浓度(以下浓度均以C表示)为横坐标,绘制标准曲线。
得标准曲线，y=45.69x+ 0.0013,r=0.999 9，线性范围为0.00246～0.01968 g/L。
详见
表1,图2。
2.4 测定方法的考察
2.4.1 精密度
取1,8-二羟基蒽醌标准品溶液(0.1003mg/mL)2mL，置10mL容量瓶中，1份加0.5%醋酸镁甲醇液稀释至刻度，另1份用甲醇稀释至刻度，摇匀。
前者置样品池，后者置参比池中，于510nm处连续测定6次，记录其吸光度，结果见表2,峰面积(RSD)为0.114 6%,表明本方法精密度良好。
2.4.2 稳定性
取供试品溶液，在分光光度计上,于510 nm处,以0.5%醋酸镁甲醇液为空白,每隔
10 min进行测定,结果见表3,RSD=0.773 4%,表明90 min内溶液的稳定性良好。
2.4.3 重复性
取同一批黄芪样品6份，每份约0.4g，按2.3.2方法制备供试品溶液，分别显色后于510nm处测定吸光度，结果表明样品中总蒽醌平均含量为0.670
5%,RSD=1.962 2%,重复性良好，结果见表4。
2.4.4 加样回收率
取黄芪粉末6份,每份0.2 g,精密称定,每2份1组,共3组。
分别加入1,8-二羟基蒽醌对照品1.0、1.3、1.5 mg,按照“供试品溶液的制备”项下的方法依法制得供试品溶液6份,在分光光度计上,于510 nm处,以0.5%醋酸镁甲醇液为空白,测定吸收度。
平均回收率为96.973 8%,RSD=1.054 5%,结果见表5。
2.5 含量测定结果
取粉碎过筛的各黄芪药材粉末按照上述方法制备3份供试品。
经测定取其平均值,结果见表6。
2.6 实验结果与讨论
2.6.1 1,8-二羟基蒽醌遇醋酸镁甲醇溶液发生颜色反应，使得吸收峰由429nm左右移动到510nm左右，其他蒽醌或醌类物质则无此颜色变化。
因此采用差式分光光度法测定样品中总蒽醌的含量，该方法能消除背景吸收，排除了其他成分对蒽醌类化合物测定的干扰。
2.6.2 总蒽醌在分光光度计上于200～800 nm处扫描,由扫描结果确定检测波长为510 nm。
2.6.3 黄芪中的总蒽醌在0.002 46～0.019 68 mg/mL范围内与吸收度线性关系良好，回归方程为：y=45.69x+0.0013,(r= 0.999 9)。
2.6.4 对测定方法进行考察，该方法精密度良好，加样回收率高，经验证，该方法简单易行，结果可靠。
通过对黄芪饮片中总蒽醌的提取分离，定量的测得了黄芪中即黄芪甲苷和黄芪多糖后又一个有效成分的含量——蒽醌的含量，该方法对实验条件要求不高，但准确性较高，结果可靠。
为黄芪中蒽醌类化合物的药理活性研究提供了理论依据。
也为黄芪饮片的质量控制提供了参考。
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