持续瘤胃发酵方法测定混合饲料体外发酵产气量和pH值的试验研究

持续瘤胃发酵方法测定混合饲料体外发酵产气量和

pH值的试验研究

摘要：pH值和产气量是瘤胃发酵参数的重要指标，pH值的变化直接影响着反

刍动物的瘤胃内环境，影响着微生物的活动；本试验的目的是通过体外发酵方法测定混合饲料的体外发酵参数，为混合饲料在生产上应用提供理论参数。而产气量则在一定程度上反映了饲料的发酵类型和发酵程度，是评价饲料营养价值的重要指标。

关键词：pH值；瘤胃发酵参数

Continuous rumen fermentation method for determining mixed feed in vitro fermentation gas production rate and pH value of the test research

Abstract: ph value and gas production is rumen fermentation parameters of important indicators ，ph value change directly affects

the ruminant of rumen internal environment ，affect microbial

activity ，the purpose of this study is through the in vitro

fermentation method for determining mixed feed in vitro fermentation parameters ，for mixed feed in the production application provide theoretical parameters ，and the gas production is in a certain extent reflects the feed fermentation type and degree of fermentation .

Key words: ph value ; rumen fermentation parameters

目录

引言 - 1 -

1材料与方法 - 1 -

1.1试验材料 - 2 -

1.1.1试验动物 - 3 -

1.1.2试验材料 - 3 -

1.1.3试验仪器 - 4 -

1.2试验方法 - 4 -

1.2.1样品采集与处理 - 4 -

1.2.1.1瘤胃内容物的采集 - 5 - 1.2.1.2瘤胃微生物的培养 - 5 - 1.2.1.3开始培养 - 6 -

1.2.1.4更换饲料袋和取样 - 7 - 1.2.1.5样品采集 - 8 -

1.2.2瘤胃发酵指标测定方法 - 9 - 1.2.2.1pH值的测定 - 10 -

1.2.2.2产气量的测定 - 11 -

2讨论 - 12 -

3结论 - 13 -

4参考文献 - 14-

5致谢 - 15 -

6附录 - 16 -

前言

目前要以整体上全面清楚地实施瘤胃发酵调控以期获得能发挥动物最大生产性能的最佳发酵模式还不太现实这是因为人们对瘤胃发酵系统本身还不十分清楚, [2]特别是缺乏瘤胃微生物生态学、生理学和生化代谢方面的详尽知识, 就现阶段来说, 瘤胃发酵调控只停留在局部表面上, 是模糊被动的, 很多方面是知其然不知其所以然。[3]所以本试验通过体外发酵方法测定混合饲料的体外发酵参数，模拟瘤胃的内环境，通过数据进行分析，从而为混合饲料在生产上应用提供理论参数。

pH值和产气量是瘤胃发酵参数的重要指标。[1]人们在生产实践中, 有意或无意的改变,从而导致发酵终产物数量或质量的变更改善了饲料利用率, 提高了生产性能, 因而, 瘤胃发酵调控便一直被作为一个专门的研究课题受到人们的重视。本实验分别测定9种不同营养水平的混合饲料对pH的影响，分别在3、6、9、12、24小时进行测定，表明在同一时间内高能高蛋的饲料pH最高，而随时间的延长pH逐渐下降。产气量随着时间延长而增加，在中能时候产气量最大。

1材料与方法

1.1试验材料

1.1.1试验动物

瘤胃液供体动物为12只安装永久瘤胃瘘管的杂交绵羊，体重为35±2kg、健康，日粮组成精粗比为30:70。每天6：00和18：00两次等量饲喂，[4]自由饮水。日粮的具体组成及营养水平（见表1-1）。

表1-1 日粮组成及营养水平（干物质基础）

1.1.2 试验材料

本试验配制9种不同营养水平（不同能氮水平）的混合饲料，参照中国绵羊饲养标准，[7]按1.2倍的维持需要水平为中能量中蛋白水平（ME：9.36MJ/kg，CP：12.55%），在此基础上代谢能0.9倍为低能量水平（8.42MJ/kg）、1.1倍为高能量水平（10.29MJ/kg），CP 0.8倍为低蛋白水平（10.04%），1.2倍为高蛋白水平（15.06%）。营养水平和组成比例见表1-2。

表1-2 不同营养水平混合日粮的组成和比例（DM基础上%）

单外流体外培养系统Rusitec缓冲液配制按照McDougll’s buffer（见表1-3）。

表1-3 McDougll’s缓冲液成分组成

1.1.3试验仪器

Rusitec单外流连续培养系统

pH计（上海雷磁分析仪器厂，玻璃电极）

分光光度计

1.2试验方法

本试验以12只健康、安装永久瘤胃瘘管的杂交绵羊为瘤胃液供体，9种不同营养水平的混合饲料为发酵底物，采用单外流连续培养系统（Rusitec）进行单因素体外试验。共9个处理，每个处理3个重复。适应期7d，[5]试验期3d。采用SPSS分析处理。

1.2.1 样品采集与处理

1.2.1.1瘤胃内容物的采集

于早饲前从12只装有永久瘤胃瘘的杂交绵羊瘤胃中采集瘤胃内容物。在温度较低的环境中，即使动物只少量饮水也会给采集带来困难。将采集的瘤胃内容物用四层纱布过滤，液体和固体分别装在不同的塑料瓶或袋子中，尽可能避免空气的污染。Rusitec的每个发酵罐需要450mL到500mL的瘤胃液和70g的固态内容物。将采集到的瘤胃内容物尽快带回实验室。