霍山石斛组培快繁技术研究
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霍山石斛组培快繁技术研究
作者:周则刚,杨静
来源:《现代园艺·下半月园林版》 2015年第12期
周则刚1 杨静2
(1南京审计学院,江苏南京2118152;2南京林业大学,江苏南京210037)
摘要:基本培养基、生长调节剂的种类及浓度等因素对霍山石斛组培苗的生长、继代增殖、生根及开花进行了试验,以不断丰富霍山石斛快繁技术。结果表明:丛生芽诱导增殖的最佳培
养基为1/2MS +0.5mg/L6-BA + 0.25mg/LNAA,pH 值5.6;促进芽生根的最佳培养基为1/2MS
+0.5mg/L IBA,pH 值5.6;促进组培苗开花的最佳培养基为MS+1mg/LKT +0.2mg/L NAA,pH值5.8;组培苗移栽的最佳基质为腐树皮加兰花石(2:1)。
关键词:霍山石斛;组培;快繁
霍山石斛,为兰科石斛属多年生草本植物,安徽霍山特产的珍稀名贵中药,自古以来就被
认为是药用石斛中的上品,具有益精强阴、生津止渴、补虚赢、除胃中虚火之功效,在国内外
享有盛誉。但由于生长缓慢,繁殖率低以及生态环境的恶化和过度的采伐利用等原因,霍山石
斛的野生资源濒临灭绝,已成为国家重点保护的名贵药用植物。因此,利用植物组织培养技术
建立霍山石斛的无性系快速繁殖系统,提高繁殖系数,是短期内提供大量种苗的有效途径,对
霍山石斛野生资源的保护具有重要意义。
1 材料与方法
1.1 材料
霍山石斛无根试管苗取自皖西学院生物与制药工程系组培试验室。以MS和1/2MS为基本培养基,用1MNaOH和1MHCl 调节合适pH 值,120℃高压灭菌20min,冷却凝固后备用。培养条件:温度25±l℃,光照强度1600~2500Lx,每日光照16h。选择不同炼苗基质,温室温度20℃左右,湿度65%左右。
1.2 方法
1.2.1 丛生芽增殖。根据前期预试验结果,选择以芽繁芽的方式,诱导增殖的培养基共设
计5 组,分别为:MS +0.5mg/L 6-BA + 0.25mg/L NAA;MS+0.5mg/L 6-BA + 0.5mg/L NAA;
1/2MS +0.5mg/L 6-BA + 0.25mg/L NAA;1/2MS +0.5mg/L 6-BA+ 0.5mg/L NAA;1/2MS+0.5mg/L 6-BA + 0.3mg/L NAA;pH 值均为5.6,4周后观察结果。
1.2.2 壮苗生根。根据前期预试验结果,促进生根的培养基共设计5组,分别为:1/2MS
+0.5mg/ L IBA;MS+0.5mg/L IBA;1/2MS +0.3mg/L IBA;MS+0.3mg/L IBA;1/2MS+0.1mg/L IBA;pH 值均为5.7,4周后观察结果。
1.2.3诱导开花。根据前期预试验结果,促进组培苗开花的培养基共设计5组,分别为:
MS +1mg/L KT +0.2 mg/L NAA;MS+0.5mg/L KT +0.2mg/L NAA;MS+1mg/L KT + 0.5 mg/LNAA;
1/2MS+1mg/L KT+ 0.2mg/L NAA;1/2MS+0.5mg/L KT +0.2mg/L NAA;pH值均为5.8,2周后观
察结果。
1.3.4 炼苗移栽。根据前期预试验结果,组培苗的移栽基质共设计5 组:珍珠岩加沙土(1:1);碎树皮加兰花石(1:1);碎树皮加兰花石(2:1);碎树皮加沙土(1:1);花泥,3 周后观察结果。
2 结果与分析
2.1 丛生芽诱导增殖
丛生芽增殖的培养基共设计5 组,pH 值均为5.6,4 周后进行结果统计,培养基组成
1/2MS +0.5mg/L 6-BA+0.25mg/LNAA 比较适合丛生芽增殖,速度快且长势好。
2.2 丛生芽生根
促进丛生芽生根的培养基共设计5 组,pH 值均为5.7,每瓶接8 株,重复10 次。4 周后进行结果统计,培养基组成1/2MS+0.5mg/L IBA效果最好。
2.3 组培苗开花
促进组培苗开花的培养基共设计5 组,pH 值均为5.8,每瓶接8 株,重复10 次。2 周后进行结果统计,处理1(培养基组成MS+1mg/L KT+0.2mg/L NAA)的开花效果较好,处理5(培养基组成1/2MS +0.5mg/L KT+0.2mg/L NAA)仅1 株开花,但颜色偏白,凋谢早;处理2(培养基组成MS+0.5mg/L KT +0.2mg/L NAA)、3(培养基组成MS+1mg/L KT+0.5mg/L NAA)、4(培养基组成1/2MS+1mg/L KT+0.2mg/L NAA)没有花产生。
2.4 炼苗移栽
组培苗的移栽基质共设计5 组,温度20℃左右,湿度65%左右。3 周后进行结果统计。处理3(基质组成为碎树皮加兰花石(2:1))比较适合试管苗移栽,苗长势较好,长高0.5~
1cm;处理2(碎树皮加兰花石(1:1))中苗子长势一般;处理1(珍珠岩加沙土(1:1))和处理4(碎树皮加沙土(1:1))中,苗子几乎没变化;处理5(花泥)中,苗子叶片变黄。
3 结论与展望
植物组织培养是指在无菌条件下,将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体,培养在人工配制的培养基上,给予适当的培养条件,使其长成完整的植株。本试验通过对各种因素的调整,成功实现炼苗移栽。但还有很多有待进一步研究,比如提高大田移栽的成功以及试管苗花的人工授粉尝试等。
参考文献
1 陈心启,吉占和.中国兰花全书(第二版)[M].北京:中国林业出版社,2000:
2 刘守金,武祖发.霍山石斛的资源及生物学特性[J].中药材,2001(24)
3 谭云,叶庆生,刘伟.霍山石斛的组织培养研究[J].植物学通报,2005(22)
(责任编辑荷初)