重症急性胰腺炎动物模型研究进展

重症急性胰腺炎动物模型研究进展

发表时间：2012-11-05T16:04:09.937Z 来源：《中外健康文摘》2012年第24期供稿作者：陈秀金

[导读] L-精氨酸（L-Arg）诱导SAP模型可能与一氧化氮、细胞因子、氧自由基等介导组织细胞损伤有关。

陈秀金（云南省大理学院临床医学院云南大理 671000）

【中图分类号】R657.5+1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）24-0013-02

【摘要】目的综述重症急性胰腺炎动物模型的研究进展。方法大量查阅国内外有关重症急性胰腺炎动物模型制作的文献资料进行综述分析。结果截止目前对其发病机制尚未能完全阐明，临床上也缺乏卓有成效的治疗方案。结论建立一个可靠的胰腺炎模型来进一步研究探讨人类SAP的发病机制、病理生理变化、并发症的产生机制及确定治疗方案显得至关重要以。

【关键词】重症急性胰腺炎动物模型研究进展发病机制

急性胰腺炎（acute pancreatitis；AP）是由多种病因引起的胰腺内胰酶被激活所引起胰腺组织自身消化、水肿、出血甚至坏死的炎症反应。以急性上腹痛、恶心、呕吐、发热和血胰酶增高等为主要临床表现。病情较重者出现胰腺出血坏死，常继发感染、腹膜炎和休克等多种并发症，病死率高，称为重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis；SAP）。自从Cloude Bermand 于1856 年制作出第一个AP 动物模型之后，随着近年来医学科学新技术、新方法、新思路的不断引进，国内外学者相继运用多种方法成功设计出多种急性胰腺炎(AP)动物模型，来探讨AP 病因、发病机制、及其治疗方法。然而，截止目前对其发病机制尚未能完全阐明，临床上也缺乏卓有成效的治疗方案。为探讨SAP的病因、病机、病理及治疗方法，建立多种活体SAP动物模型。选择操作简单、合适的建模方案是实验过程中重要的步骤。本文对目前中外学者SAP动物模型研究进展进行简述，进行新研究的探索：

1.非侵入型SAP模型

1.1 雨蛙素诱发法

雨蛙素（caerulein；CAE）属于多肽类物质，其化学结构和药理作用与胆囊收缩素相似，可通过静脉注射或腹腔注射两种给药途径诱导SAP模型建立。大剂量CAE可刺激胰酶分泌，造成胰腺及其他组织器官损伤。胰酶激活PLA2可转化为脑磷脂和软磷脂转变为具有细胞毒性的溶血脑磷脂和软磷脂，溶解细胞膜磷脂结构，破坏线粒体，损伤血脑屏障，引起大脑代谢障碍和水肿[1]。有研究发现[2]，CAE可诱导小鼠体内过氧化物增值，表现为水肿、坏死、中性粒细胞浸润及SAM升高，胰腺与肺的炎性浸润与胞间黏附因子-1（ICAM-1）和P-选择蛋白的病变有关。Andraus等[3]研究发现，将CAE诱导的AP模型放入中度低温（28～32℃）环境中可加重大鼠模型的炎症反应。但CAE诱导建立SAP模型的研究成本较高。

1.2 L-精氨酸诱导法

L-精氨酸（L-Arg）诱导SAP模型可能与一氧化氮、细胞因子、氧自由基等介导组织细胞损伤有关。大剂量的L-Arg可增加NO生成，使参与能量代谢或抗氧化有关的酶失活；与Fe-S基团结合，干扰能量代谢；使超氧化物歧化酶丧失保护作用；损伤DNA，导致细胞死亡；降低血压，减少胰腺血供。SAP可导致多器官损伤，其损伤机制可能与促炎因子和抗炎因子的失衡有关。有研究发现[4]，P物质能激活TK腺细胞受体介导大鼠AP炎症反应。L-Arg诱导SAP模型建立，具有简便、经济，腺体病变均匀，可减少外源细菌污染等特点。

1.3 无胆盐乙酸氨酸饮食法

无胆盐乙酸氨酸（choline deficient ethionine supplemental；CDE）喂养能诱导幼鼠发生SAP,以及腹腔脂肪坏死和全身病变如酸中毒、缺氧等，可确保模型同质性和重复性，可通过改变CDE喂养时间控制小鼠死亡率。CDE诱导SAP模型稳定，复制简单，能较好的模拟人体SAP病变过程，适合于研究人体SAP发病机理和药物疗效。有研究发现[5]，乙醇混合饮食不会产生胰腺损伤，但可在病毒感染时导致更加严重的胰腺炎。

2.侵入性SAP模型

2.1胰胆管逆行注射法

胰胆管逆行注射法是结扎胰管后，进行胰管插管，将胰酶激活物或活性胰酶注入。Aho[6]等采用切开十二指肠方法成功诱导大鼠SAP 模型，近年来郝建志等[7]仅于大鼠腹部切开一个长约2cm的横切口，用4.5号头皮针穿刺十二指肠逆行进入胰胆管，避免了十二指肠切开胰胆管注射法的缺点，即肠漏、肠梗阻、液体丢失过多、肠蠕动功能减退等情况的发生提高了模型制备的成功率。该类模型适合研究SAP多器官损伤。十二指肠直接穿刺法成为现实中常用造模方法，有效提高试验成功率，降低动物死亡率[8,9]。逆行注射法造模效果可靠，但动物模型病情严重程度与灌注物浓度和体积、灌注压、时间、容量等有密切关系[10,11]。

2.2结扎法

结扎法主要包括胰管结扎和十二指肠结扎，结扎后胆胰管内压力增高，胆汁反流进入胰管，可导致胰管上皮黏膜屏障破坏，被磷脂酶A2分解破坏，胰脏内蛋白酶被激活，使胰组织自我消化，造成胰脏水肿、出血和坏死，造成全身炎症反应和多器官功能衰退。结扎法造模稳定，但由于破坏了体内环境，造成胆胰管内压力升高，病情进展迅速，增高了模型的死亡率，所以不宜长期进行治疗研究，推广过程受到限制。

2.3电针刺激法

电针刺激是国内学者首先发现的一种SAP造模方法，可较好的模拟胆源性胰腺炎[12]。对胆源性胰腺炎的发病病因及病理生理变化的研究具有较好的意义。但侵入性造模方法对机体损伤较严重，受外界影响较大，操作较复杂，常导致实验动物死亡。

3.联合应用

由于单一方法造模均具有一定缺陷，所以联合造模法可能成为理想造模法，各取优点，取长补短。但是其造模机理尚不明确，可能与胰脏MCD、炎性反应及补体的释放与激活有密切关系。研究发现[13]，SAP可引起血小板激活因子释放，造成多器官功能衰竭，成为SAP 病变过程中的关键，导致并发症和难以承受的高死亡率。联合诱导法造模胰腺病变均匀，病理变化与人体相似，可通过改变GDOC浓度、剂量及注射速度控制SAP病变的严重程度，适合于SAP不同病变阶段病因及治疗的研究。

4.展望

目前重症急性胰腺炎仍是困扰临床治疗的一大难题，因此对其发病机制及治疗基础的研究仍需不断地深入，鉴于目前国内外学者所建